2,419 matches
-
acută (vezi metodă C.1), de preferință efectuat pe specii alese pentru prezentul test. Rezultatele pot fi utile în alegerea intervalului adecvat de concentrații de lucru la testul în stadiile de viață timpurii. Ar trebui cunoscute solubilitatea în apă (inclusiv solubilitatea în apă folosită la test) și presiunea vaporilor substanței testate. Este oportun să fie disponibilă o metodă analitică fiabila de cuantificare a substanței în soluții testate, a cărei precizie și ale cărei limite de detecție sunt cunoscute și menționate în
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
preferință prin simpla amestecare sau agitare a substanței testate în apa de diluare, folosind mijloace mecanice (de exemplu cu agitator sau ultrasunete). Pentru obținerea unei soluții de bază cu o concentrație corespunzătoare se pot folosi coloane de saturare (coloane de solubilitate). Folosirea solvenților sau a agenților de dispersie trebuie evitată pe cât posibil; totuși, în unele cazuri, astfel de compuși pot fi necesari pentru a produce o soluție de bază cu o concentrație corespunzătoare. Exemple de solvenți adecvați sunt acetona, etanolul, metanolul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
de cinci concentrații. Nu este necesară testarea concentrațiilor mai ridicate fie de CL50 la 96 de ore, fie mai ridicate de 100 mg/l (care valoare este mai scăzută dintre acestea) Concentrația maximă testată nu trebuie să depășească limită de solubilitate a substanței în apă. Când se folosește un agent de dispersie la prepararea soluțiilor (vezi pct. 1.6.6), concentrația finală a acestuia în recipiente trebuie să nu depășească 0,1 ml/l și este de preferat să fie aceeași
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
6. 2.2. INTERPRETAREA REZULTATELOR Rezultatele se interpretează cu precauție atunci cand concentrațiile măsurate ale substanțelor toxice ajung la niveluri apropiate de limitele de detecție ale metodei analitice. Rezultatele se interpretează de asemenea cu precauție în cazul concentrațiilor mai mari decât solubilitatea în apă a substanței. 2.3. RAPORTUL Raportul testului trebuie să cuprindă următoarele informații: 2.3.1. Substanță testată: - natură fizică și proprietățile fizico-chimice relevante, - datele de identificare chimică, inclusiv puritatea și metodă analitică de cuantificare a substanței, după caz
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
se resping și se înlocuiesc cu albine sănătoase înaintea începerii testului. 1.5.4. Pregătirea dozelor Dacă substanță testată este un compus miscibil cu apă, se poate dispersa direct în soluția de zaharoza 50%. Pentru produsele și substanțele tehnice cu solubilitate mică în apă, se pot utiliza purtători care pot să fie solvenți organici, emulgatori sau agenți de dispersie cu toxicitate mică pentru albine (de ex. acetone, dimetilformamidă, dimetilsulfoxid). Concentrația purtătorului depinde de solubilitatea substanței testate și ar trebui să fie
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
50%. Pentru produsele și substanțele tehnice cu solubilitate mică în apă, se pot utiliza purtători care pot să fie solvenți organici, emulgatori sau agenți de dispersie cu toxicitate mică pentru albine (de ex. acetone, dimetilformamidă, dimetilsulfoxid). Concentrația purtătorului depinde de solubilitatea substanței testate și ar trebui să fie aceeași pentru toate concentrațiile experimentate ale substanței. Cu toate acestea, în general, este potrivită o concentrație a purtătorului de 1% care nu trebuie să fie depășită. Se prepară soluțiile etalon corespunzătoare, adică, dacă
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
etaloane de toxicitate (de ex. parationul). 1.6.3. Expunerea 1.6.3.1. Administrarea dozelor Fiecărei grupe de albine i se administrează 100-200 μl soluție apoasa 50% de zaharoza, ce conține substanță testată la concentrația corespunzătoare. Pentru produsele cu solubilitate mică, toxicitate mică sau concentrație mică în preparat este necesar un volum mare, deoarece trebuie să se utilizeze proporții mai mari din soluția de zaharoza. Se monitorizează cantitatea de hrană tratată consumată per grupa. După consumarea hranei (de obicei în
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
masic % mE masă totală a substanței încercate extrase din sol și pereții vasului experimental în două etape μg Vrec volumul supernatantului recuperat după stabilirea echilibrului de adsorpție cm3 P oa coeficientul de partiție octanol/apă pKa constantă de disociere Să solubilitatea apei g l-1 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Se adaugă volume cunoscute de soluții ale substanței încercate, nemarcate sau marcate radioactiv, în concentrații cunoscute în CaCl2 0,01 M, la probele de sol cu un conținut de substanță
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
marcate radioactiv cu o compoziție și puritate cunoscute. La indicatorii cu perioada de înjumătățire scurtă se aplică corecții de dezintegrare. Înaintea realizării unei încercări de adsorbție/desorbție, trebuie să fie cunoscute datele referitoare de substanță testată, prezentate în continuare: (a) solubilitatea în apă (A.6); (b) presiunea de vapori (A.4) și/sau constantă legii lui Henry; (c) degradarea abiotica: hidroliza în funcție de pH (C. 7); (d) coeficientul de partiție (A.8); (e) biodegradabilitatea imediată (C.4) sau transformarea aerobica și anaerobică
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
dacă, în scară de timp a încercării, se observă o modificare, se recomandă că studiul principal să se realizeze prin analizarea atât a solului cât și a fazelor apoase. În realizarea prezenței încercări, pot să apară dificultăți pentru substanțele cu solubilitate mică în apă (Sw < 10-4 g l-1), precum și pentru substanțele cu sarcini mari, deoarece concentrația în faza apoasa nu se poate măsura analitic cu suficientă precizie. În situațiile de acest fel, trebuie să se ia măsuri suplimentare. Modalitatea de
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
dispozitiv de filtrare; filtre cu o porozitate de 0,2 μm, sterile, de unică folosință. Trebuie să se acorde o atenție deosebită la alegerea materialului pentru filtru, pentru a evita pierderile de substanță testată pe acestă; pentru substanțele încercate cu solubilitate mică, nu se recomandă un material de filtrare organic. (e) Instrumente analitice, potrivite pentru măsurarea concentrației substanței încercate. (f) etuva de laborator care permite menținerea unei temeraturi de103 -110oC. 1.7.2. Caracterizarea și selectarea solurilor Solurile se caracterizează prin
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
este, de preferință, mai mare cu trei ordine de mărime decât limită de detecție a metodei analitice utilizate. Pragul menționat asigura măsurători precise pentru metodologia urmată în prezența metodă; în afară de aceasta, concentrația soluției mama trebuie să fie mai mică decât solubilitatea în apă a substanței de încercat. Este de preferat ca soluția mama să se prepare chiar înaintea aplicării pe probele de sol și să se păstreze închisă, la întuneric, la 4oC. Durată depozitarii depinde de stabilitatea substanței încercate și de
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
preferat ca soluția mama să se prepare chiar înaintea aplicării pe probele de sol și să se păstreze închisă, la întuneric, la 4oC. Durată depozitarii depinde de stabilitatea substanței încercate și de concentrația acesteia în soluție. Numai pentru substanțele cu solubilitate mică (Să < 10-4 g l-1), ar putea să fie necesar un agent de solubilizare corespunzător, daca dizolvarea substanței încercate este dificilă. Agentul de solubilizare respectiv: (a) trebuie să fie miscibil cu apă, de ex. metanol sau acetonitril; (b) concentrația
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
0,1%); și (c) nu trebuie să fie un agent tensioactiv sau să intre în reacții solvolitice cu substanță chimică încercată. Utilizarea unui agent de solubilizare se stipulează și se justifică în raportarea rezultatelor. O altă posibilitate pentru substanțele cu solubilitate mică constă în adăugarea substanței încercate în sistemul experimental prin îmbogățire: substanță de încercat se dizolvă într-un solvent organic, din care se ia un alicot care se adaugă în sistemul format din sol și soluție de CaCl2 0.01
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
efectua măsurători exacte chiar și atunci când se produc adsorbții puternice ( > 90%) și de determinare a izotermelor de adsorbție. Se recomandă, daca este posibil, ca și concentrația inițială a substanței (C0) să nu fie mai mare decât jumătate din limită de solubilitate a acesteia. În continuare se prezintă un exemplu de mod de calcul al concentrației soluției mama (Csm). Se consideră o limită de detecție de 0,01 μg cm-3 și o adsorbție de 90%; astfel, concentrația inițială a substanței încercate în
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
Izotermele de adsorbție și cinetica de desorbție/izotermele de desorbție 1.9.4.1. Izotermele de adsorbție Se utilizează cinci concentrații ale substanței încercate, care cuprind de preferință două ordine de mărime; în alegerea concentrațiilor respective, se ține seama de solubilitatea în apă și de concentrațiile în soluție apoasa rezultate la echilibru. Pe toată durata studiului se menține același raport sol/soluție. Testarea de adsorbție se realizează așa cum s-a descris anterior, cu singura diferență că fază apoasa se analizează doar
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
μg cm-3 R = eroarea analitică în determinarea R‡ = eroarea calculată datorită erorii analitice R APENDICE 3 METODE DE ESTIMARE PENTRU Kd 1. Metodele de estimare permit estimarea Kd din corelațiile cu, de exemplu, valorile Poa (12) (39) (63-68), datele privind solubilitatea apei (12) (19) (21) (39) (68-73) sau datele privind polaritatea, rezultate din aplicarea CLIP (cromatografia lichidă de înaltă performanță) la faza inversata (74-76). Conform celor prezentate în tabelele 1 și 2, Kco sau Kso se calculează din ecuațiile menționate și
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
polare și (2) nu se pot aplica pentru un conținut foarte mic de substanță organică în sol (12). În afară de aceasta, desi s-au găsit corelații satisfăcătoare între Poa și adsorbție (19), nu se poate spune același lucru pentru relația dintre solubilitatea apei și gradul de adsorbție (19) (21); până în prezent, studiile sunt foarte contradictorii. 3. În tabelele 1 și 2 se prezintă câteva exemple de corelații între coeficientul de adsorbție și coeficientul de partiție octanol-apă și respectiv solubilitatea în apă. Tabelul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
pentru relația dintre solubilitatea apei și gradul de adsorbție (19) (21); până în prezent, studiile sunt foarte contradictorii. 3. În tabelele 1 și 2 se prezintă câteva exemple de corelații între coeficientul de adsorbție și coeficientul de partiție octanol-apă și respectiv solubilitatea în apă. Tabelul 1. Exemple de corelație între coeficientul de distribuție a adsorbției și coeficientul de partiție octanol-apă; pentru alte exemple (12) (68) Substanțe Corelații Autori Urei substituite log Kso = 0,69 + 0,52 log Poa Briggs (1981) (39) Clorurate
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
log Kso = 4,4 + 0,72 log Poa Gerstl și Mingelgrin (1984) (66) Hidrocarburi aromate log Kco = -2,53 + 1,15 log Poa Vowles și Mantoura (1987) (67) Tabelul 21. Exemple de corelație între coeficientul de distribuție a adsorbției și solubilitatea în apă; pentru alte exemple vezi (68) (69). Substanțe Corelații Autori Diferite pesticide log Kso = 3,8 - 0,561 log Să Gerstl și Mingelgrin (1984) (66) Substanțe clorurate aromate, alifatice log Kso = (4,040 +/-0,038) - (0,557+/-0,012
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
al solului Kco este un indicator util al capacității de fixare a unei substanțe chimice pe o substanță organică din sol și din nămolul de epurare și permite compararea diferitelor substanțe chimice. Parametrul menționat se poate estima prin corelări cu solubilitatea apei și coeficientul de partiție n-octanol/apă (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7). Metodă experimentală descrisă în prezența testare utilizează CLIP pentru estimarea coeficientului de adsorbție Kco în sol și în nămolul de epurare (8). Estimările prezintă o credibilitate
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
dintre concentrațiile substanței dizolvate în n-octanol și apa; este o mărime adimensionala. (5) 1.3. SUBSTANȚELE DE REFERINȚĂ Înaintea utilizării metodei, este necesar să se cunoască formulă structurală, puritatea și constantă de disociere (dacă este cazul). Sunt utile datele privind solubilitatea în apă și solvenți organici, coeficientul de partiție octanol-apă și caracteristicile hidrolizei. Pentru a corela datele de retenție CLIP măsurate pentru o substanță testată cu coeficientul de adsorbție al acesteia Kco, trebuie să se reprezinte grafic curbă de etalonare pentru
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
pentru îmbunătățirea și validarea metodei (12). Rezultatele sunt prezentate în tabelul 2 din apendice. 1.7. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.7.1. Estimarea preliminară a coeficientului de adsorbție Coeficientul de partiție octanol-apă Poa (= Koa) și, într-o anumită măsură, solubilitatea în apă se pot utiliza că indicatori pentru gradul de adsorbție, în special pentru substanțele neionizate și, prin urmare, se pot utiliza pentru aflarea preliminară a domeniului. Au fost publicate o serie de corelații utile pentru cateva grupe de substanțe
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
unui test de toxicitate acută (metodă C.2, partea I) efectuat cu Daphnia magna trebuie să fie disponibile. Rezultatul poate să fie util la selectarea unui domeniu potrivit de concentrații experimentale în testele de reproducere. Este necesar să se cunoască solubilitatea în apă și presiunea de vapori a substanței testate și să existe o metodă analitică fiabila pentru determinarea cantitativa a substanței în soluțiile experimentale, cu eficientă recuperării și limită de detecție specificate. Datele privind substanță testată, care pot să fie
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
solvenți potriviți se pot utiliza acetona, etanolul, metanolul, dimetilformamidă și trietilen glicolul. Exemple de agenți de dispersie potriviți sunt Cremophor RH40, metilceluloza 0,01% și HCO-40. În orice caz, substanța testată în soluțiile experimentale nu trebuie să depășească limită de solubilitate în mediul experimental. Se utilizează solvenți pentru a obține o soluție mama care să se poată doză cu exactitate în apă. La concentrația recomandată a solventului în mediul experimental final (adică ≤ 0,1 ml/l), solvenții enumerați anterior nu sunt
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]