3,509 matches
-
cât și de la cele nonreceptoare. Importanța proteinei RAS în semnalizarea mitogenă a fost evidențiată în experiențe de microinjectare, în care introducerea proteinei RAS în celulele cultivate a indus proliferarea celulară, în absența stimulării cu factor de creștere. Inhibiția activității proteinei RAS endogene, fie prin microinjectarea anticorpilor monoclonali anti-RAS, fie prin expresia unei gene mutante ras, dominant negative, blochează proliferarea celulară, ca răspuns la o varietate de factori de creștere mitogenici. Cercetările au dovedit că produsul genei ras reprezintă elementul central al
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ras, toți membrii acestei familii codificând pentru proteine 21 (P21), care sunt implicate în transducția semnalului de la receptorii cuplați cu proteina G. Un semnal din receptor declanșează legarea lui GTP la proteina RAS, iar GTP-RAS transmite semnalul în celulă. Proteinele RAS au activitate GTP-azică și astfel GTP-RAS este rapid convertit în GDP-RAS, inactiv. Mutațiile de substituție în secvența de nucleotide a acestei gene, colineare cu substituții în secvența de aminoacizi a proteinei RAS, au fost identificate într-o varietate mare de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și, ca urmare, semnalul GTP-RAS este inactivat mai lent, iar această stare determină un răspuns celular excesiv, la semnalul din receptor. Proteina codificată de protooncogena ras este o GTP-ază membranară a cărei activitate este legată de semnalizarea transmembranară. Între proteina RAS de la drojdie, și proteina RAS de la om există o omologie a secvenței de aminoacizi de aproximativ 50%, ceea ce este dovada înaltului conservatorism al genei care codifică pentru această enzimă, consecință a îndeplinirii unui aceluiași rol, la specii atât de îndepărtate
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
este inactivat mai lent, iar această stare determină un răspuns celular excesiv, la semnalul din receptor. Proteina codificată de protooncogena ras este o GTP-ază membranară a cărei activitate este legată de semnalizarea transmembranară. Între proteina RAS de la drojdie, și proteina RAS de la om există o omologie a secvenței de aminoacizi de aproximativ 50%, ceea ce este dovada înaltului conservatorism al genei care codifică pentru această enzimă, consecință a îndeplinirii unui aceluiași rol, la specii atât de îndepărtate filogenetic. Proteina RAS se găsește
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
GDP). Când semnalele extracelulare induc activarea proteinei RAS, aceasta convertește GDP (guanozin-difosfat) în GTP (guanozin-trifosfat), al doilea acumulator celular de energie, după ATP. Prin hidroliză, GTP eliberează energia și se convertește în GDP. Formarea GDP se asociază cu trecerea proteinei RAS în forma sa inactivă. Durata de acțiune a formei active a proteinei RAS, ca GTP-ază, este foarte scurtă, fiind condiționată de interacțiunea sa cu alte proteine care stimulează hidroliza GTP. Alte proteine cu care interacționează proteina RAS sunt cele care
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
RAS. Cheia activării genei ras, ca răspuns la factorii mitogeni, pare a fi un factor Sos, de schimbare a nucleotidului cu guanină. Acesta se asociază cu tirozinkinazele receptoare, prin molecule adaptoare care conțin domenii SH2 și SH3. Asocierea activează proteina RAS în aval de tirozinkinaze, în numeroase sisteme biologice (mamifere, Drosophila, Caenorhabditis elegans). Complexul activat RAS-GTP interacționează cu proteinele efectoare pentru a transmite mai departe semnalul mitogen, inițiat de legarea factorului de creștere. RAF-protein-serin/treoninkinaza pare a fi ținta critică a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
critică a lui RAS. Proteinele oncogene RAF sunt capabile să inducă proliferarea celulară, chiar și atunci când funcția RAS este blocată prin anticorpi monoclonali specifici sau printr-o mutație RAS inhibitor-dominantă, ceea ce reprezintă un indiciu că RAF acționează în aval de RAS, în calea de semnalizare mitogenă. Formarea complexelor RAS-RAF necesită forma activă a lui RAS, legată la GTP și se realizează prin interacțiunea dintre domeniul efector al lui RAS și domeniul reglator N-terminal al lui RAF. Cercetări recente arată că
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
lui RAF. Cercetări recente arată că RAF este efectorul direct al lui RAS și că funcția esențială a lui RAS este de a cupla RAF protein-serin/treoninkinaza la stimularea prin factorul de creștere al proteintirozinkinazelor receptoare. Nu este exclus ca RAS să interacționeze și cu alți efectori, inclusiv GAP sau NF1. Legarea factorului de creștere activează tirozinkinazele receptoare, conducând la activarea RAS, RAF și MAP-kinazei. Fosforilarea activează apoi factorii de transcriere, conducând la inducția tranzientă a lui c-fos și c-jun, precum și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
cuplați cu proteina G de a acționa ca proteine oncogenice, pledează în același sens. Studiul oncogenelor protein-tirozin-kinazice a permis descoperirea rolului fosforilării proteinelor, în general și al fosforilării protein tirozinei în particular, în sistemele moleculare transductoare ale semnalelor mitogene. Genele ras aparțin unei familii mari de gene care codifică pentru proteinele ce leagă nucleotidul cu baza azotată guanină și care se numesc proteine G. Proteinele G reprezintă veritabili comutatori moleculari care reglează o varietate mare de căi de transducție a semnalului
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
starea de bază. Mutațiile în oncogenele activate ras anulează activitatea hidrolitică, iar proteina rămâne în conformația sa activă. Mutații similare au fost descrise pentru genele ce codifică proteinele G convenționale. Proteinele G formează suprafamilia GTP-azelor, la care se adaugă proteinele RAS. Ele au o potențială activitate oncogenă. Activitatea lor este reglată prin legarea și hidroliza GTP. GTP-azele sunt frecvent implicate în oncogeneza umană, jucând rol central în propagarea semnalelor inițiate prin legarea factorului de creștere la receptorul protein-tirozin-kinazic. Proteina RAS activează
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
care celulele primesc și execută instrucțiuni referitoare la procesele de proliferare celulară. Mutațiile care activează aceste gene sunt fie mutații structurale care conduc la sinteza și activitatea constitutivă a unei proteine, în absența vreunui semnal specific (de exemplu, proteinkinazele și RAS), fie mutații reglatoare care conduc la sinteza proteinei în momente sau în locuri nepotrivite (de exemplu, produșii protooncogenelor nucleare și chiar factorii de creștere). Consecința mutației protooncogenelor este generarea în celulă, a unui semnal intern persistent de creștere, fără intervenția
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
intervenția unui stimul extern (Cooper, 1995). Proteinele G cuplează o varietate de receptori membranari la mesagerii secundari intracelulari și în numeroase tipuri celulare pot acționa ca produși oncogenici. Oncogenele ras, prevalente în tumorile umane, apar prin mutații care mențin proteinele RAS într-o stare constitutiv activă, de legare a GTP. Și alte proteine acționează ca oncoproteine sau ca produși ai genelor supresoare de tumori, prin reglarea funcției RAS. Printre acestea se includ factori de schimb al nucleotidului guaninic și proteine adaptoare
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de legare a GTP. Și alte proteine acționează ca oncoproteine sau ca produși ai genelor supresoare de tumori, prin reglarea funcției RAS. Printre acestea se includ factori de schimb al nucleotidului guaninic și proteine adaptoare care, în mod normal, activează RAS ca răspuns la stimularea factorului de creștere, ca și produsul genei supresoare de tumori NF1, care reglează, inhibând RAS, prin stimularea activității GTP-azice. Proteina RAS joacă un rol central în semnalizarea proliferării celulare, ca răspuns la stimularea receptorilor factorilor de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
care funcționează ca efectori în aval, în căile de transducție a semnalului, inițiate de legarea factorilor de creștere la receptorii membranari. În particular, RAF joacă un rol central în transducția semnalului din receptorii protein tirozin-kinazei, fiind activată în aval de RAS și apoi servind la activarea unei cascade de protein kinaze, care în cele din urmă declanșează proliferarea celulară. Astfel, activitatea proteinserin/treonin-kinazelor, ca proteine oncogenice, extinde conceptul potrivit căruia transformarea celulară este consecința dereglării activității unei enzime care în mod
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
substituția unui singur aminoacid în proteina RAS, în poziția 12: în proteina sintetizată sub direcția protooncogenei normale în această poziție se află glicina, iar în proteina oncogenei H-ras, din linia celulară transformată EJ, se află valina. Studiile ulterioare asupra oncogenelor ras din diferite tumori au evidențiat faptul că mutațiile punctiforme care conduc la substituția unui singur aminoacid reprezintă o caracteristică universală a activării ras. Multe substituții ale aminoacidului glicina din poziția 12, cu diferiți aminoacizi, alții decât valina, activează potențialul transformant
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
etichetă Alu. Markerul Alu este lincat cu oncogena activă în neoplazia de vezică urinară, la om. În linia celulară umană tumorală desemnată EJ ca și în neoplazia de vezică urinară se află o oncogenă ce reprezintă omologul celular al oncogenei ras din genomul retrovirusului sarcomului Harvey. Oncogena celulară din linia EJ a fost desemnată c-ras. Diferența structurală dintre gena celulară ras activă (din celulele tumorale) și gena ras inactivă (din celulele normale) este foarte subtilă, dar cele două gene se
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
desemnată EJ ca și în neoplazia de vezică urinară se află o oncogenă ce reprezintă omologul celular al oncogenei ras din genomul retrovirusului sarcomului Harvey. Oncogena celulară din linia EJ a fost desemnată c-ras. Diferența structurală dintre gena celulară ras activă (din celulele tumorale) și gena ras inactivă (din celulele normale) este foarte subtilă, dar cele două gene se diferențiază net din punct de vedere funcțional. Fragmentele de restricție ale ADN din celule normale sunt identice cu cele din celule
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ca urmare a evenimentului mutațional al genei c-ras, condiționează modificarea funcției proteinei P21 și, ca urmare, determină convertirea celulei pe calea transformării maligne. Evenimentul mutațional reprezentat de o singură transversie G→T este suficient să transforme protooncogena normală c-ras într-o oncogenă celulară. Transformarea malignă a celulelor poate fi consecința unui alt proces molecular-celular și anume cel al AMPLIFICĂRII GENICE A PROTOONCOGENELOR. Într-o celulă normală, de regulă, genele sunt prezente în două exemplare. De la această regulă nu fac
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
tipuri de neoplazii. Astfel, c-myc este amplificată de 5-10 ori în leucemia acută mieloidă și de 10 ori în carcinomul de colon, iar protooncogena c-erb B este amplificată de 30 de ori, în carcinomul epidermoid. În carcinomul mamar, protooncogena N-ras este amplificată de 5-10 ori, iar în carcinomul primar pulmonar, de colon și rect, protooncogena C-K-ras-2 este amplificată de 4-20 de ori (Watson și colab., 1987). Amplificarea protooncogenelor, cu instalarea stării de transformare malignă, poate fi rezultatul mecanismelor de remaniere
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
neoplaziei pulmonare umane este strâns înrudită cu oncogena v-ras din genomul virusului sarcomului Kirsten. Protooncogenele celulare c-ras aparțin unei familii multigenice, întâlnită la diferite specii de vertebrate, ce cuprinde trei gene și două pseudogene desemnate H-ras-1, K-ras-2, N-ras și respectiv H-ras-2 și K-ras-1. Pseudogenele H-ras-2 și K-ras-1 sunt foarte asemănătoare cu oncogenele H-ras-1 și respectiv K-ras-2, cu deosebirea că acestea din urmă nu prezintă introni. La om s-a dovedit că protooncogenele celulare funcționale H-ras-1, K-ras-2 și N-
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și respectiv H-ras-2 și K-ras-1. Pseudogenele H-ras-2 și K-ras-1 sunt foarte asemănătoare cu oncogenele H-ras-1 și respectiv K-ras-2, cu deosebirea că acestea din urmă nu prezintă introni. La om s-a dovedit că protooncogenele celulare funcționale H-ras-1, K-ras-2 și N-ras codifică toate pentru proteina P 21, cu o secvență de 189 aminoacizi, primii 86 fiind identici pentru proteina P 21 codificată de toate cele trei oncogene celulare funcționale. Restul de 103 aminoacizi ai proteinei P 21 se prezintă într-o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
distribuția mutațiilor) Figura 20.6. Mutațiile din APC în polipoza de colon și în carcinomul de colon (din Passarge, 2000). În dezvoltarea carcinomului de colon sunt implicați cel puțin șase loci genici asociați cu Polyposis Coli. În două protooncogene recesive ras desemnate K-ras1 și K-ras2, precum și în patru gene dominante supresoare de tumori au fost identificate mutații somatice care condiționează patogeneza cancerului colorectal. Cele mai multe forme de carcinom de colon nu se asociază cu Polyposis Coli (Passarge, 2000). Markeri ADN de tip
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
în hibrizi de celule somatice, precum linia celulară fibrosarcomatoasă umană HT1080. Aceasta conține o alelă activată a genei N-ras, iar revertanții netumorigeni ai acestor celule exprimă im nivel ceva mai redus (de până la două ori) al proteinei activate N-ras p21, comparativ cu partenerii lor tumorigenici. Sunt și alte exemple prin care autorul argumentează inexistența unui efect direct al genelor supresoare de tumori asupra expresiei oncogenelor. Astfel, atunci când celulele murine transformate cu oncogene virale ras sau oncogene celulare ras activate
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ori) al proteinei activate N-ras p21, comparativ cu partenerii lor tumorigenici. Sunt și alte exemple prin care autorul argumentează inexistența unui efect direct al genelor supresoare de tumori asupra expresiei oncogenelor. Astfel, atunci când celulele murine transformate cu oncogene virale ras sau oncogene celulare ras activate din protooncogene sunt fuzionate cu celule normale, hibrizii celulari nu sunt tumorigeni și continuă să exprime proteina 21 activată la nivel ridicat în locații corespunzătoare din membrana plasmatică. Și linia celulară umană EJ de carcinom
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
N-ras p21, comparativ cu partenerii lor tumorigenici. Sunt și alte exemple prin care autorul argumentează inexistența unui efect direct al genelor supresoare de tumori asupra expresiei oncogenelor. Astfel, atunci când celulele murine transformate cu oncogene virale ras sau oncogene celulare ras activate din protooncogene sunt fuzionate cu celule normale, hibrizii celulari nu sunt tumorigeni și continuă să exprime proteina 21 activată la nivel ridicat în locații corespunzătoare din membrana plasmatică. Și linia celulară umană EJ de carcinom de vezică urinară care
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]