3,199 matches
-
specificitate optimă și este de obicei jumătate din titru. Figura 1 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (i) și 2.3 pct. (i) Diluție standard a extractului concentrat resuspendat T = titru FITC T/4 T/2 T 2T => diluțiile duble ale antiserului Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (ii) și 2.3 pct. (ii) FITC Diluție
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
diluțiile duble ale antiserului Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (ii) și 2.3 pct. (ii) FITC Diluție standard a antiserului pur pur 1/10 !/100 1/1000 => Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (ii) și 2.3 pct. (ii) FITC Diluție standard a antiserului pur pur 1/10 !/100 1/1000 => Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă Se acoperă ferestrele de test cu diluția
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă Se acoperă ferestrele de test cu diluția sau diluțiile antiserului. În ferestrele FITC se aplică PBS. Volumul antiserului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul extractului aplicat. 2.3.2. Se incubează acoperit timp de 30 de minute la temperatura camerei. 2.3.3. Se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă Se acoperă ferestrele de test cu diluția sau diluțiile antiserului. În ferestrele FITC se aplică PBS. Volumul antiserului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul extractului aplicat. 2.3.2. Se incubează acoperit timp de 30 de minute la temperatura camerei. 2.3.3. Se scutură picăturile
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
minute în soluție tampon IF - Tween și apoi cinci minute în tampon IF (apendicele 3). Excesul de umezeală se îndepărtează cu grijă. 2.3.4. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă. Se acoperă ferestrele de test și fereastra FITC cu diluția conjugatului FITC utilizat pentru determinarea titrului. Volumul conjugatului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul antiserului aplicat. 2.3.5. Se incubează acoperit timp de 30 de minute la temperatura camerei. 2.3.6. Se scutură picăturile de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
sau contaminare. Notă: Dacă se observă acestea, testul trebuie repetat. Se observă celulele intens fluorescente cu morfologia caracteristică a Ralstonia solanacearum în ferestrele de test. Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a sușei de control pozitiv la aceeași diluție a antiserului. Celulele cu colorație incompletă sau cu fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare, dacă nu sunt în număr mare (vezi interpretarea rezultatului testului IF). Interpretarea rezultatului testului IF: (i) Dacă nu sunt descoperite celule intens fluorescente cu morfologie
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
celule pe ml) de celule incomplet sau slab fluorescente în titrul antiserului, trebuie efectuat un al doilea test: - un test bazat pe un principiu biologic diferit sau - o repetare a testului IF, cu un al doilea antiser sau cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza Robinson - Smith et al., 1995 Se folosește antiser pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul suspensiei de 106 celule pe ml din sușa omologă de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
șC sau peste noapte la 4 șC. 3.4. Se scot extractele din puțuri. Se spală puțurile de trei ori cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
trei ori cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică 100 μl de diluție conjugată în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.8. Se scoate conjugatul din puțuri. Puțurile se spală ca mai înainte (3
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică 100 μl de diluție conjugată în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.8. Se scoate conjugatul din puțuri. Puțurile se spală ca mai înainte (3.4 și 3.6). 3.9. Se prepară soluția de substrat de fosfatază alcalină (apendicele 5
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cu sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. 5. Testul de placare selectivă În baza Elphinstone et al., 1996 5.1 Testul se efectuează printr-o tehnică corespunzătoare de diluare galvano-plastică, cum ar fi: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cel puțin două diluții zecimale, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu selectiv SMSA modificat (apendicele 7) și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Dacă se consideră util, se face o striere a diluției de 10 μl din extractul concentrat resuspendat. Bucla se trece
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu selectiv SMSA modificat (apendicele 7) și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Dacă se consideră util, se face o striere a diluției de 10 μl din extractul concentrat resuspendat. Bucla se trece prin flacără între striații. (ii) (ii) se transferă un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat în mediul selectiv SMSA modificat și se împrăștie cu o baghetă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
selectiv SMSA modificat și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Bagheta se întinde pe cel puțin alte două plăci cu mediu SMSA modificat fără a se trece prin flacără. 5.2 Prin aceeași tehnică de diluție, se aplică o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă din rasa 3 / biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv pe un set de plăci separate cu mediu SMSA modificat. 5.3 Plăcile se incubează la
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Silicon antispumant DC 1,0 ml la litru Pirofosfat tetrasodic 1,0 g la litru Se autoclavizează separat. Se adaugă până la concentrația dorită. Tampon de concentrare: 10 mM tampon fosfat, pH 7,2 Acest tampon este utilizat pentru resuspendarea și diluția talonului și extractelor concentrate de cartof. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
celule fluorescente tipice pe câmp (c). Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe fereastră (C). Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe ml de extract concentrat (N). unde y = volumul de extract concentrat pe fereastră, F = factorul de diluție al extractului concentrat. Apendicele 5 Materiale pentru testul ELISA Tampon de acoperire din carbonat dublu concentrat, pH 9,6 Na2CO3 6,36 g NaHCO3 11,72 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de agitare magnetică, teflonate 5.11. Biurete, 25 ml 5.12. Baloane conice, 250 ml 6. PROCEDEU 6.1. Într-un pahar de 50 ml se cântăresc între 6 la 7 g proba, se aduce pH-ul la 3 prin diluție cu acid clorhidric (4.9) și se spală într-o pâlnie de separare cu 100 ml apă distilata. Se adaugă succesiv 25 ml etanol (4.3), 25 ml soluție de diclorura de p-toluidina (4.6) și 25-30 ml tetraclorura
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
două cazuri, si se amestecă. Se filtrează dispersiile peste filtrul cutat (3.4) și se folosește 1 μl din fiecare filtrat pentru realizarea cromatografiei pe hârtie, descrisă la punctul 5. Se prepară încă o dată două dispersii din fiecare proba prin diluția a 1 g și respectiv 5 g în 50 ml apă, acidulata cu acid clorhidric diluat (2.7), se aduce la semn cu apă și se amestecă. Se filtrează dispersiile peste filtrul cutat (3.4) și se folosește 1 μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
proceduri speciale de autorizare simplificată numai medicamentele homeopate care satisfac toate condițiile următoare: ... - cale de administrare orală sau externă; - absența unor indicații terapeutice specifice pe etichetă produsului sau în orice informație legată de produsul respectiv; - existența unui grad sufucient de diluție pentru a garanta siguranța medicamentului; în particular, medicamentul nu poate conține nici mai mult de o parte la 10.000 din tinctura-mama, nici mai mult de 1% din cea mai mica doză folosită în alopatie pentru substanțele active a caror
EUR-Lex () [Corola-website/Law/249373_a_250702]
-
o serie de fabricație la alta a acestor medicamente, cererea trebuie să fie însoțită de următoarele documente: ... - denumirea științifică sau alta denumire dintr-o farmacopee a sușei/sușelor homeopate, împreună cu declararea diverselor căi de administrare, forme farmaceutice și grade de diluție care urmează să fie autorizate; - un dosar care să descrie modul de obținere și control al sușelor homeopate și justificarea utilizării homeopate a acestora, pe baza unei bibliografii adecvate; - dosarul de fabricație și control al fiecărei forme farmaceutice și o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/249373_a_250702]
-
Articolul 779 În plus față de mențiunea clară a cuvintelor "medicament homeopat", eticheta și, unde este cazul, prospectul pentru medicamentele prevăzute la art. 711 alin. (1) poartă exclusiv următoarele informații: - denumirea științifică a sușei sau a sușelor urmată de gradul de diluție, folosindu-se simbolurile farmacopeii utilizate conform art. 695 pct. 4; dacă medicamentul homeopat este alcătuit din două sau mai multe sușe, denumirea științifică a sușelor pe etichetă poate fi suplimentata cu o denumire inventată; - numele și adresa deținătorului autorizației de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/249373_a_250702]
-
se poate dovedi mai puțin evident. Trebuie să se folosească anticorpii unei sușe de referință a C. m. ssp. sepedonicus. Se recomandă să se determine titrul pentru fiecare nou lot de anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai înaltă diluție la care se obține o reacție optimă, atunci când se testează o suspensie care conține între 105 și 106 celule pe mililitru, a unei sușe omoloage de C. m. ssp. sepedonicus folosind un conjugat adecvat de izotiocianat de fluoresceină (FITC), în conformitate cu
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
C. m. ssp. sepedonicus folosind un conjugat adecvat de izotiocianat de fluoresceină (FITC), în conformitate cu recomandările producătorului. Soluția brută de anticorpi policlonali sau monoclonali trebuie să prezinte un titru de imunofluorescență de cel puțin 1:2 000. În momentul efectuării testului, diluția/diluțiile de lucru ale anticorpilor trebuie să fie aproximativ egale cu jumătatea titrului. Se folosesc anticorpi validați (a se vedea site-ul web la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Testul trebuie efectuat pe extracte de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]