9,341 matches
-
din hrean (M=44 kDa) este o enzimă stabilă și reactivă. Aceasta posedă patru resturi de lizină care nu sunt implicate în activitatea sa, dar sunt folosite ca legături chimice. În concordanță cu numele, hidrogen peroxidaza este un substrat pentru enzimă. Hidrogen peroxidaza formează oxigen ce acționează asupra cromogenului, tetrametilbenzidină (TMB). Această metodă tradițională folosită de biologi, este acum aplicată în sectoare ca protecția mediului înconjurător și analiza alimentelor (pesticide, aflatoxine, steroizi anabolici). Determinarea unui compus în aceste condiții este posibilă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
acționează asupra cromogenului, tetrametilbenzidină (TMB). Această metodă tradițională folosită de biologi, este acum aplicată în sectoare ca protecția mediului înconjurător și analiza alimentelor (pesticide, aflatoxine, steroizi anabolici). Determinarea unui compus în aceste condiții este posibilă numai dacă anticorpii adaptați și enzimele conjugate sunt disponibile. Relația concentrație-absorbanță Numărul anticorpilor legați de situsurile pereților vasului este relativ mic comparativ cu numărul moleculelor din soluție. Moleculele marcate sau nemarcate vor reacționa cu anticorpii proporțional cu concentrația lor relativă. Cantitatea ambelor molecule la nivelul peretelui
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
variază liniar cu concentrația. Dacă concentrația este plasată pe o scală logaritmică, o parte a graficului va fi liniară la o primă aproximare. Măsurarea absorbanței în aceste teste poate fi înlocuită prin detecție de fluorescență (fluorescența ELISA). În acest caz, enzima conjugată aleasă este o fosfatază alcalină care convertește substratul specific într-un compus fluorescent. Alte tehnici imunoenzimatice Există mai multe modalitați de a efectua o testare competitivă ELISA într-un mediu eterogen. Ohmicron a dezvoltat o abordare unde anticorpii sunt
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
elemente pot fi bine amestecate. Testarea folosind particule magnetice este condusă în mod similar cu testarea ELISA. După incubare, este aplicat un câmp magnetic pentru a ține anticorpii fixați de pereții containerului. Tehnica cunoscută ca și testul de imunotestare cu enzime multiplicate (TIEM) în fază omogenă este folosită în determinarea drogurilor și a hormonilor. În TIEM, anticorpii liberi sunt plasați într-un tub în care sunt adăugate proba și o cantitate cunoscută de antigen care este enzima asociată (enzima conjugată). Competiția
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
testul de imunotestare cu enzime multiplicate (TIEM) în fază omogenă este folosită în determinarea drogurilor și a hormonilor. În TIEM, anticorpii liberi sunt plasați într-un tub în care sunt adăugate proba și o cantitate cunoscută de antigen care este enzima asociată (enzima conjugată). Competiția apare în soluție. Substratul poate fi adăugat direct. Intensitatea culorii în acestă testare va fi datorată fracțiunii de enzimă nefixată. Dacă concentrația compusului este mică, o mare parte din enzimă va fi denaturată și culoarea soluției
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
imunotestare cu enzime multiplicate (TIEM) în fază omogenă este folosită în determinarea drogurilor și a hormonilor. În TIEM, anticorpii liberi sunt plasați într-un tub în care sunt adăugate proba și o cantitate cunoscută de antigen care este enzima asociată (enzima conjugată). Competiția apare în soluție. Substratul poate fi adăugat direct. Intensitatea culorii în acestă testare va fi datorată fracțiunii de enzimă nefixată. Dacă concentrația compusului este mică, o mare parte din enzimă va fi denaturată și culoarea soluției va fi
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
plasați într-un tub în care sunt adăugate proba și o cantitate cunoscută de antigen care este enzima asociată (enzima conjugată). Competiția apare în soluție. Substratul poate fi adăugat direct. Intensitatea culorii în acestă testare va fi datorată fracțiunii de enzimă nefixată. Dacă concentrația compusului este mică, o mare parte din enzimă va fi denaturată și culoarea soluției va fi slabă. Avantajele și limitările testărilor ELISA Testările ELISA dau rezultate semi-cantitative exacte și mai rapide decât tehnicile cromatografice. Ele sunt folosite
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
cantitate cunoscută de antigen care este enzima asociată (enzima conjugată). Competiția apare în soluție. Substratul poate fi adăugat direct. Intensitatea culorii în acestă testare va fi datorată fracțiunii de enzimă nefixată. Dacă concentrația compusului este mică, o mare parte din enzimă va fi denaturată și culoarea soluției va fi slabă. Avantajele și limitările testărilor ELISA Testările ELISA dau rezultate semi-cantitative exacte și mai rapide decât tehnicile cromatografice. Ele sunt folosite de cele mai multe ori pentru eliminarea mostrelor negative care ar putea interfera
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
loc răcoros. De aceea, metoda este limitată de timpul de viață redus al setului de analiză și este mai puțin folosită pentru analize în mediu înconjurător. III. 2. TESTĂRI RADIO-IMUNOLOGICE Un radioizotop poate fi folosit ca un marcator în loc de o enzimă folosită în testele imunochimice. Această metodă, introdusă în 1960 pentru măsurarea nivelului insulinei din ser, este numită radio-imunologie. Este transpunerea în imunochimie a aceluiași principiu ca acela folosit în determinarea ionului de sulfat. Testele radio-imunologice sunt similare cu testele ELISA
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
Funcțiile cele mai sensibile la autoxidare sunt de tip: - fenoli; - cateholi; - alcooli; - tioeteri; - acizi carboxilici; - nitriți; - aldehide. Reacțiile de oxidare sunt cauzate de oxigen, de prezența unor ioni divalenți ai metalelor tranziționale, pH, lumină, temperatură, solvent, substanțe ajutătoare, substanțe tampon, enzime, umiditatea atmosferică, stabilizanți, ambalaj și forma farmaceutică. Oxidarea este superioară la formele lichide față de cele solide sau semisolide, depinde de concentrația soluției (este invers proporțională cu concentrația); din acest motiv se recomandă prepararea de soluții concentrate ce pot apoi fi
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
important factor de hidroliză, deoarece intervine în echilibrul apos. În cazul ambalajelor o atenție deosebită trebuie acordată permeabilității acestora la vapori și gaze. Alți factori Reacțiile de solvoliză pot fi catalizate de cationii divalenți menționați la reacțiile de oxidare, de enzime, de lumină, de oxigen. În astfel de cazuri trebuie luată în considerare concentrația enzimei, a substratului, temperatura, pH-ul și activitatea ionilor. REACTII DE DECARBOXILARE Sunt reacții destul de rar întâlnite ca sursă a instabilității substanțelor medicamentoase. Depind de efectul reacțiilor
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
deosebită trebuie acordată permeabilității acestora la vapori și gaze. Alți factori Reacțiile de solvoliză pot fi catalizate de cationii divalenți menționați la reacțiile de oxidare, de enzime, de lumină, de oxigen. În astfel de cazuri trebuie luată în considerare concentrația enzimei, a substratului, temperatura, pH-ul și activitatea ionilor. REACTII DE DECARBOXILARE Sunt reacții destul de rar întâlnite ca sursă a instabilității substanțelor medicamentoase. Depind de efectul reacțiilor de oxidare și hidroliză. Sunt reacții influențate de temperatură, lumină, pH, enzime, polaritatea solvenților
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
considerare concentrația enzimei, a substratului, temperatura, pH-ul și activitatea ionilor. REACTII DE DECARBOXILARE Sunt reacții destul de rar întâlnite ca sursă a instabilității substanțelor medicamentoase. Depind de efectul reacțiilor de oxidare și hidroliză. Sunt reacții influențate de temperatură, lumină, pH, enzime, polaritatea solvenților și prezența ionilor metalici. Se decarboxilează acizii: salicilic, p-aminosalicilic etc. Ca măsuri de stabilizare se recomandă înlăturarea reacțiilor primare de oxidare și hidroliză, optimizarea metodelor de preparare, evitarea temperaturilor prea înalte, a luminii și utilizarea unor ambalaje adecvate
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
acord cu dreptul european (principiul liberei circulații sau alte reglementări de tip PAC) sau există o directiva europeană pe subiectul în cauză?" și, dacă da, "Este corect expusă?"; "Există noi reglementări survenite în cursul preparării?"; Toate ingredientele produsului sunt autorizate? (enzime, aditivi etc.)". De precizat, că niciun control nu este efectuat în schimburile dintre statele membre. În schimb, pentru importurile și exporturile cu țările din afara UE, comercianții pot fi supuși la un control al calității. În acest caz, trebuie respectată reglementarea
Agrointelligence. Securitatea agroalimentară - o nouă paradigmă a globalizării by Steluța Mădălina Pătrășescu Neacșu () [Corola-publishinghouse/Science/84938_a_85723]
-
fructe, vinuri demiseci și demidulci, tari și de desert, cidru, lichioruri, esențe) și în prepararea produselor de cofetărie. Prezența fructozei sau a zahărului invertit permite păstrarea unui gust dulce, plăcut cu folosirea redusă a zahărului. Utilizarea preparatelor enzimatice pe baza enzimei glucozofosfat- izomerază permite transformarea glucozei în fructoză, ceea ce duce la majorarea puterii de îndulcire, ajungîndu-se la 225% față de zaharoză. Fructoza este fermentată ușor de levuri la alcool etilic. Inițiatorii fermentației alcoolice sunt levurile (drojdiile) care prezintă microorganisme monocelulare de proveniență
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
fermentația alcoolică încetează și drojdia obține energia necesară dezvoltării ei prin respirație oxigenată. In acest caz se consumă glucoză mult mai puțină și ceea ce se consumă nu se transformă în alcool ci pentru dezvoltarea și înmulțirea drojdiilor. Cele mai importante enzime implicate în procesul de fermentație alcoolică sunt: • invertaza sau zaharaza ( β - fructofuranozidază ) - scindează zaharoza în glucoză și fructoză; • maltaza ( α- glucozidază ) - scindează maltoza în glucoză; • zimaza - transformă glucoza și fructoza în alcool etilic și bioxid de carbon. Maltaza prezintă activitate
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
6÷7), în timp ce invertaza are activitate maximă în mediu acid (pH = 4÷5), unde activitatea maltazei este aproape nulă. α- Glucozidaza acționează asupra legăturii glicozidice a moleculei de glucoză, în timp ce invertaza atacă legătura glicozidică a fructozei, fiind o enzimă specifică pentru forma furanozică a fructozei. Cele trei enzime sunt produse în principal de drojdiile din familia Saccharomyces: S. cerevisiae, S. carlsbergensis, S. sache, S. uvarum, dar și de tulpini din genurile Bacillus subtilis, Aspergillus niger, Candida utilis, Zymomonas mobilis
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
în mediu acid (pH = 4÷5), unde activitatea maltazei este aproape nulă. α- Glucozidaza acționează asupra legăturii glicozidice a moleculei de glucoză, în timp ce invertaza atacă legătura glicozidică a fructozei, fiind o enzimă specifică pentru forma furanozică a fructozei. Cele trei enzime sunt produse în principal de drojdiile din familia Saccharomyces: S. cerevisiae, S. carlsbergensis, S. sache, S. uvarum, dar și de tulpini din genurile Bacillus subtilis, Aspergillus niger, Candida utilis, Zymomonas mobilis etc. Mecanismul transformării monozaharidelor în alcool etilic sub acțiunea
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
sunt produse în principal de drojdiile din familia Saccharomyces: S. cerevisiae, S. carlsbergensis, S. sache, S. uvarum, dar și de tulpini din genurile Bacillus subtilis, Aspergillus niger, Candida utilis, Zymomonas mobilis etc. Mecanismul transformării monozaharidelor în alcool etilic sub acțiunea enzimelor din drojdii implică o serie de reacții intermediare complexe, legate între ele, care alcătuiesc calea Embden - Meyerhof- Parnas: • formarea monozaharidelor fosforilate - sub acțiunea hexochinazei și izomerazei; • decondensarea aldolică - sub acțiunea aldolazei; • formarea acidului piruvic - sub acțiunea fosfoglicerinmutazei, enolazei și fosfochinazei
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
ele, care alcătuiesc calea Embden - Meyerhof- Parnas: • formarea monozaharidelor fosforilate - sub acțiunea hexochinazei și izomerazei; • decondensarea aldolică - sub acțiunea aldolazei; • formarea acidului piruvic - sub acțiunea fosfoglicerinmutazei, enolazei și fosfochinazei piruvice; • formarea etanolului - catalizată de carboxilază și hidrocodehidrază. In cazul utilizării enzimelor de origine bacteriană (Zymomonas mobilis) transformările se conformează schemei Entner - Dondoroff. Degradarea anaerobă a glucidelor reprezintă un proces oxidativ care se petrece în organismele vii fără participarea oxigenului. Acest proces prezintă două aspecte: glicoliza - care se petrece în organismul regnului
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
plantele superioare. Glicoliza reprezintă procesul de degradare anaerobă a glucozei sau glicogenului care are drept rezultat formarea acidului lactic și poartă numele de calea glicolitică Embden- Meyerhof - Parnas. Sistemul multienzimatic care acționează catalitic în etapele succesive ale procesului cuprinde 11 enzime localizate în afara mitocondriilor, în citosolul celulelor. Energia eliberată în proces este stocată în legăturile fosfat ale ATP. Mecanismul biochimic al fermentației alcoolice este identic cu cel al glicolizei pînă la formarea acidului piruvic. Transformările glicolitice pot avea punct de plecare
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
oxidativă care are loc, se realizează înglobarea energiei rezultate din reacția de oxidare în molecula noului produs, sub forma unei legături macroergice. Oxidarea se realizează cu participarea NAD+ care acceptînd doi atomi de H de la aldehida glicerică, activată de către o enzimă ce conține gruparea -SH, dă naștere acidului 1,3- difosfogliceric. 7. Transferul grupei fosfat de la acidul 1,3-difosfogliceric la ADP: In această etapă, legătura macroergică a acidului 1,3- difosfogliceric este cedată unei molecule de ADP, care se transformă în
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
prin mecanismele de carboxilare și decarboxilare. Totodată acidul piruvic realizează și legătura dintre metabolismul glucidelor și metabolismul proteinelor deoarece prin transaminare se transformă în α-alanină. 11. Decarboxilarea acidului piruvic la acetaldehidă: Acidul piruvic suferă o decarboxilare la acetaldehidă sub acțiunea enzimei piruvat decarboxilază, care are drept coenzimă tiaminpirofosfatul. 12. Reducerea acetaldehidei la alcool etilic sub acțiunea enzimei alcool dehidrogenază. Această etapă este cuplată cu etapa oxidativă 6 din cadrul glicolizei, în care se generează permanent NADH și H+. În cazul utilizării enzimelor
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
metabolismul proteinelor deoarece prin transaminare se transformă în α-alanină. 11. Decarboxilarea acidului piruvic la acetaldehidă: Acidul piruvic suferă o decarboxilare la acetaldehidă sub acțiunea enzimei piruvat decarboxilază, care are drept coenzimă tiaminpirofosfatul. 12. Reducerea acetaldehidei la alcool etilic sub acțiunea enzimei alcool dehidrogenază. Această etapă este cuplată cu etapa oxidativă 6 din cadrul glicolizei, în care se generează permanent NADH și H+. În cazul utilizării enzimelor de origine bacteriană (Zymomonas mobilis) transformările se conformează schemei Entner- Dondoroff . Pe această cale glucidele sunt
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
enzimei piruvat decarboxilază, care are drept coenzimă tiaminpirofosfatul. 12. Reducerea acetaldehidei la alcool etilic sub acțiunea enzimei alcool dehidrogenază. Această etapă este cuplată cu etapa oxidativă 6 din cadrul glicolizei, în care se generează permanent NADH și H+. În cazul utilizării enzimelor de origine bacteriană (Zymomonas mobilis) transformările se conformează schemei Entner- Dondoroff . Pe această cale glucidele sunt oxidate la acid 6 - fosfogluconic. Acesta este apoi metabolizat în mod specific, după reacțiile: Acidul piruvic și aldehida fosfoglicerică suferă apoi transformări la alcool
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]