5,095 matches
-
în liniile celulare de melanoame și în melanocitele umane și murine (Vile și Hart, 1993). De notat că expresia genică a fost detectată într-un număr mic de tipuri celulare, ceea ce denotă restricția expresiei genice. Dacă se cunosc promotori cu specificitate tumorală, este posibilă țintirea directă a tumorii cu gene corespunzătoare. Introducerea ADN mediată de receptori este o a treia metodă posibilă prin care genele pot fi direcționate precis spre tumori. Această metodă a fost testată inițial în modele netumorale, dar
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
mediată de receptori este o a treia metodă posibilă prin care genele pot fi direcționate precis spre tumori. Această metodă a fost testată inițial în modele netumorale, dar poate fi aplicată pentru tumori, dacă se cunosc markeri de suprafață cu specificitate tumorală. În acest caz, ADN este cuplat cu proteine specifice care interacționează cu receptorii suprafeței celulare. Tehnica a utilizat în principal particule de adenovirus sau peptide fuzogenice de influenza pentru a media transferul genelor de interes, deoarece proteinele de atașare
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
splenice cu activitate litică față de țintele CT 26. În plus, la șoarecii presensibilizați cu celule tumorale care exprimă H-2KS, dimensiunea tumorii a scăzut după vaccinarea cu ADN care codifică H-2KS. Investigațiile au evidențiat posibilitatea de a activa răspunsul imun cu specificitate tumorală, prin expresia unor molecule străine, CMH I pe celulele tumorale de adenocarcinom care, în mod normal, sunt slab imunogenice. S-a dovedit astfel capacitatea de a stimula răspunsul imun prin modificarea contextului în care este prezentat sistemului imunitar antigenul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
celulele tumorale sunt slab imunogenice (Roth și colab.; 1994). Introducerea genei pentru B7 în tumori a amplificat răspunsul antitumoral. Prezența lui B7 a permis eliberarea semnalelor costimulatoare pentru producerea IL-2 și proliferarea consecutivă a limfocitelor T citotoxice (CTL) CD8+, cu specificitate tumorală (Schwartz, 1992). Efectele anti-tumorale potențiale ale multor molecule imunomodulatoare, incluzând IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-7, IL-12, IFN-γ, factorul de necroză tumorală (TNF), factorul β de creștere tumorală (TGF-β), factorul granulocitar stimulator al coloniei (G-CSF), factorul macrofagic stimulator al
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
pe cale chimică, au respins grefele aceleiași tumori. Studiile au oferit baza cercetărilor pentru identificarea antigenelor specific tumorale ale neoplaziilor umane, în speranța găsirii unor ținte pentru imunoterapia acestora. Din păcate, în neoplaziile umane au fost identificați foarte puține antigene cu specificitate tumorală. Totuși, au fost identificate anumite antigene asociate tumorilor, caracterizate prin expresia lor preferențială în tumori. Antigenele asociate tumorilor au fost folosite ca ținte pentru inducția răspunsului imun, cu specificitate tumorală. Răspunsul imun antitumoral poate fi generat direct față de tumoră
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
în neoplaziile umane au fost identificați foarte puține antigene cu specificitate tumorală. Totuși, au fost identificate anumite antigene asociate tumorilor, caracterizate prin expresia lor preferențială în tumori. Antigenele asociate tumorilor au fost folosite ca ținte pentru inducția răspunsului imun, cu specificitate tumorală. Răspunsul imun antitumoral poate fi generat direct față de tumoră, dacă celulele tumorale exprimă antigene specific tumorale. Situsul expresiei genice poate fi controlat prin introducerea unor regiuni promotoare cu specificitate tumorală într-un ADN plasmidic, sau prin conjugarea ADN cu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
au fost folosite ca ținte pentru inducția răspunsului imun, cu specificitate tumorală. Răspunsul imun antitumoral poate fi generat direct față de tumoră, dacă celulele tumorale exprimă antigene specific tumorale. Situsul expresiei genice poate fi controlat prin introducerea unor regiuni promotoare cu specificitate tumorală într-un ADN plasmidic, sau prin conjugarea ADN cu proteine care interacționează cu receptorii de suprafață, specifici tumorilor. Pe această cale, se asigură expresia genei injectate, cum ar fi gena unei toxine sau a unei citokine, numai la nivelul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
conjugarea ADN cu proteine care interacționează cu receptorii de suprafață, specifici tumorilor. Pe această cale, se asigură expresia genei injectate, cum ar fi gena unei toxine sau a unei citokine, numai la nivelul țintei tumorale, obținându-se astfel distrugerea cu specificitate a tumorii sau stimularea unui răspuns imun celular localizat. Deoarece plasmacitoamele și limfoamele cu celule B supraexprimă imunoglobuline (Ig) de suprafață, asemenea molecule au fost țintite ca antigene cu specificitate tumorală. În consecință, s-au utilizat modele murine pentru testarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
numai la nivelul țintei tumorale, obținându-se astfel distrugerea cu specificitate a tumorii sau stimularea unui răspuns imun celular localizat. Deoarece plasmacitoamele și limfoamele cu celule B supraexprimă imunoglobuline (Ig) de suprafață, asemenea molecule au fost țintite ca antigene cu specificitate tumorală. În consecință, s-au utilizat modele murine pentru testarea efectelor vaccinării cu proteine Ig idiotipice și vaccinuri ADN idiotipice. Prima demonstrație încununată de succes a inducerii imunității antitumorale a fost realizată într-un model de plasmacitom murin (Eisen și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
murin (Eisen și colab., 1975). Anticorpi anti-idiotipici (anti-Id) au fost sintetizați ca răspuns la vaccinarea șoarecilor cu gammaglobulinele sintetizate de celulele plasmacitomului, oferind protecție față de celulele tumorale transferate. Limfomul murin BCL1 reprezintă un alt model utilizat pentru caracterizarea antigenelor cu specificitate tumorală și dezvoltarea strategiilor imunoterapiei anticanceroase. În limfoame cu celule B, imunoglobulina de suprafață este marker de suprafață specific tumoral și poate fi ținta unui vaccin ADN inductor al sintezei anticorpilor anti-idiotipici. SV40 (virusul simian 40) induce transformarea celulelor în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
viabile (Tevethia și colab., 1980; Bright și colab., 1994). Imunizarea intramusculară, intraperitoneală sau subcutanată a șoarecilor BALB/c cu ADN plasmidic care conține gena antigenului T din SV40, declanșează un răspuns imun antitumoral protector. Datorită limitării informației cu privire la antigenele cu specificitate tumorală, abordarea directă a vaccinurilor genetice specific antitumorale este mult mai dificilă decât inducerea unui răspuns imun generalizat. Identificarea antigenelor specific tumorale a permis utilizarea tehnologiilor de imunizare ADN și stimularea imunității protectoare antitumorale. Numeroase studii pe modele animale au
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
specific față de celulele tumorale care exprimă antigenul. Au fost realizate tratamente antitumorale cu vaccinuri ADN care țintesc în mod specific celulele melanomului, prin injecții directe intratumorale cu constructe ADN care au gena β-galactozidazei sub controlul direct al unui promotor cu specificitate melanocitară (Vile și Hart, 1993). Vaccinul a stimulat expresia β-galactozidazei în melanoamele B16 la șoarecii singenici, nu însă și în tumorile Colo 26. Aceste experiențe au evidențiat capacitatea de stimulare directă și specifică a expresiei genelor la situsul tumoral și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
imun local prin recrutarea celulelor imune la situsul tumoral. Pentru utilizarea eficientă a vaccinurilor ADN este necesară realizarea unor cercetări complexe, suplimentare, întrucât se cunosc prea puțin mecanismele prin care sistemul imunitar este stimulat să producă anticorpi sau CTL cu specificitate tumorală, după vaccinarea ADN. Tehnicile de terapie genică necesită un eveniment de infecție cu un virus nepatogen, manipulat genetic, pentru a se realiza transducția genei de interes, în organismul afectat de o tară ereditară. Teoretic, astfel de tehnici mimează o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
anti HBc de origine maternă la copii născuți din mame purtătoare cronice nu le conferă protecție față de infecția cu HBV. S-a constatat că imunizarea numai față de HBc protejează cimpanzeul față de infecția cu HBV, dar este posibil ca CTL cu specificitate HBc să joace un rol important. Primul vaccin HBV aplicat la om a fost reprezentat de injecții cu particule subvirale, goale, de 22 nm, purificate din plasma sangvină a purtătorilor cronici. Odată cu răspândirea infecției HIV, un astfel de vaccin a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Acesta este primul exemplu de protecție conferită de un vaccin ADN, la cimpanzeu (Boyer și colab., 1997). Rămâne de văzut dacă diversitatea antigenică a HIV poate fi învinsă prin utilizarea antigenelor multiple simultane sau dacă sunt necesare constructe cu diferite specificități antigenice ale învelișului. Vaccinarea ADN a fost evaluată pentru utilitatea sa ca un posibil mijloc imunoterapeutic. Injectarea vaccinului ADN cu gena pentru proteina învelișului a indus creșterea titrului anticorpilor specifici față de gp 120 și gp 41, atât la cimpanzeul deja
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
competițional la nivelul buclei de legare a ATP, situsul de legare a ATP reprezentând un motiv cu semnătură înalt conservată în esență, în toate domeniile kinazelor. În consecință, au început strădaniile în direcția identificării unor compuși inhibitori cu mai mare specificitate pentru celulele tumorale. Abordând problema în mod empiric, de screening a sute de compuși cu efect inhibitor asupra kinazelor, unele echipe de cercetare au reușit să identifice asemenea compuși, fără să se cunoască ce stă la baza unei asemenea acțiuni
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
plasmatică, deoarece anticorpii nu au acces în interiorul celulei. Dar, un asemenea dezavantaj legat de medicamentele reprezentate de molecule mici este surmontat de faptul că domeniile extracelulare ale receptorilor tirozinkinazelor sunt structuri unice, oferind posibilitatea de a dezvolta reactivi de mare specificitate pentru care este anulată probabilitatea de a inhiba alte kinaze. Modalitățile de acțiune a unor astfel de anticorpi monoclonali sunt nenumărate și includ blocarea legării ligandului, prevenirea dimerizării receptorului, intensificarea degradării receptorului și recrutarea celulelor imunoefectoare. Herceptin care țintește receptorul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
L, enzimă prezentă ubicvitar în celulele mamiferelor, prin care se realizează tăierea ARN monocatenar, după secvențele UN (Clemens și Williams, 1978; Zhou și colab., 1993). ARN antisens împotriva unei anumite ținte lincate la 2-5A determină degradarea ARN țintă cu mare specificitate și cu eficiență de cel puțin 20 de ori mai mare față de a ARN antisens simplu. Efectul antitumoral al 2-5A-anti-hTR este specific celulelor telomerază pozitive din cancerul de vezică urinară. Koga și colaboratorii (2001) au lucrat cu liniile celulare UM-UC-2
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
canceroase de vezică urinară, dar nu afectează dramatic viabilitatea celulelor normale (fibroblaste) în care nu se evidențiază o activitate telomerazică, în condiții normale, ceea ce constituie un argument privind declararea acțiunii specifice a ARN antisens față de componenta ARN telomerazică și a specificității tratamentului cu 2-5A-anti-hTR asupra celulelor tumorale din cancerul de vezică urinară. Tratamentul timp de patru zile cu spA4-anti hTR aplicat liniilor celulare canceroase a inhibat semnificativ activitatea telomerazică la 75%, în comparație cu tratamentul doar cu lipofectamină sau cu spA4-anti (M6)hTR
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Ambross, 2001; Gottesman, 2002). Aceste ARN-uri derivă din precursori mai lungi de ~70 ribonucleotide care conțin o repetiție inversată ce permite formarea unei bucle „hairpin” (agrafă). Această buclă este clivată din precursor de către o ribonuclează de tip III cu specificitate pentru structuri dublu catenare ribonucleice - adică ARN dublu catenar și care s-a numit dicer. Această ribonuclează cu specificitate pentru ARN bicatenar este considerată a aparține unui sistem de supraveghere genetică, comparabil cu misiunea sistemului imunitar de supraveghere a prezenței
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
inversată ce permite formarea unei bucle „hairpin” (agrafă). Această buclă este clivată din precursor de către o ribonuclează de tip III cu specificitate pentru structuri dublu catenare ribonucleice - adică ARN dublu catenar și care s-a numit dicer. Această ribonuclează cu specificitate pentru ARN bicatenar este considerată a aparține unui sistem de supraveghere genetică, comparabil cu misiunea sistemului imunitar de supraveghere a prezenței și eliminării nonselfului. Sistemul dicer devine activ în momentul în care în celulă este prezent un ARN dublu catenar
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
pentru celulă. Și, întrucât o asemenea structură bicatenară ARN ar compromite funcționarea mesagerului, ea trebuie eliminată. Acest tip de microARN s-a numit și ARN de interferență și s-a notat cu iARN. Un asemenea iARN poate inactiva cu mare specificitate anumite gene țintă din celulă prin clivarea moleculelor lungi dublu catenare de ARN produse de pe matrița ADN a unor transgene introduse pe căi artificiale în celulă, rezultând molecule mici de ARN de aproximativ 22 ribonucleotide lungime care s-au numit
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
unui ARNm care are o secvență asemănătoare cu a moleculei inductoare. Mecanismul interferenței ARN este complex, dar în principiu presupune degradarea unei molecule dublu-catenare ARN lungi în duplexuri scurte de 21-25 perechi de ribonucleotide sub acțiunea unei endonucleaze ARN cu specificitate pentru structuri poliribonucleotidice bicatenare, numită Dicer. Duplexurile scurte se numesc și siRNA-uri, adică ARN-uri mici de interferență (de la small short interfering RNAs). siRNA-urile se leagă la ARNm corespunzătoare și induc asamblarea unui complex enzimatic care s-a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
rezistente la infecția HIV-1. Utilizarea ribozimelor (molecule ribonucleice autocatalitice) în terapia anticanceroasă vizează anihilarea componentei ARN a telomerazei, blocarea splicing-ului pre-ARNm la joncțiunile intronexon sau a peptidil-transferazei din ribozomi. Terapia genică vizează utilizarea acelor ribozime care taie ARN țintă cu specificitate de secvență. În figura 32.13 se prezintă principiul utilizării unei ribozime transclivatoare, de tip „cap de ciocan”, spre a distruge un ARNm mutant. Utilizarea ARN de interferență (ARNi) în inhibarea (anularea) unei alele mutante dăunătoare reprezintă un demers de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
din genul Taphrina. În cazul nodozităților radiculare ale leguminoaselor, apariția acestora este consecința infectării celulelor vegetale cu bacterii simbiotice fixatoare de azot molecular din genul Rhizobium, specia cea mai comună fiind Rhizobium leguminosarum, dar existând și specii bacteriene care manifestă specificitate de gazdă (pentru lucernă, pentru trifoi etc.). Cercetările noastre (Gavrilă și Mihăescu, 1987, Gavrilă, 2003) au adus unele lămuriri privind mecanismele genetice care se desfășoară în celula gazdă, consecutive infecției cu Rhizobium reprezentate de cicluri endomitotice, urmate de adoptarea mecanismului
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]