9,837 matches
-
administrare (imunizarea intravaginală), creșterea cantității de imunogen în vaccin, modificarea schemei de imunizare. Este curios cum recomandarea vaccinului pentru fetițe de 9-10 ani nu a condus și la modificarea dozei de VLP L1. S-a păstrat aceiași cantitate de proteină virală deși subiecții țintă au masă corporală de două ori mai mică decât femeile 16-23 ani înrolate în primele trialuri clinice. VLP din vaccinuri sunt înalt imunogene chiar și în absența adjuvanților dar adjuvanții au rămas în formularea actuală pentru promovarea
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
36%), pentru HPV 52 (32%). Se estimează că tipurile 45, 31 și 52 sunt responsabile de 12% din cancerele de col. Imunitatea post vaccinală este dependentă de proteinele capsidare L1. Răspunsul imun după infecția naturală poate controla și producția proteinelor virale cu risc oncogen E6 și E7, proteine timpurii care sunt implicate în extinderea proliferării celulelor epiteliului bazal și în întârzierea diferențierii (Schiller J. și Nardelli-Haefliger D., 2006). Specificitatea de tip a rezultatelor serologice depinde de prepararea unor VLP intacte conformațional
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
chiar și în absența adjuvanților, pentru că expun într-o formă structurată epitopii neutralizanți prezenți pe virusul autentic (Kirnbauer R. și colab., 1992; Schiller J. și Lowry D., 1996). Imunogenitatea înaltă a VLP L1 a fost probată și pentru alte proteine virale între care principalele proteine oncogene E7 și E6 (Suzich J.A., și colab., 1995). Lucrarea care a stabilit protocolul industrial de purificare pentru vaccinarea la om a fost publicată de Zhang L.F., și colab., 1991. Acest grup, condus de Jan
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
a stabilit protocolul industrial de purificare pentru vaccinarea la om a fost publicată de Zhang L.F., și colab., 1991. Acest grup, condus de Jan Frazer, a demonstrat că cel mai avantajos sistem de producție a unei cantități suficiente de proteină virală pentru un vaccin de uz uman este clonarea genei L1 într-un vector prokariot și expresia ei în E. coli. Patentul pentru proprietatea intelectuală asupra vaccinurilor HPV VLP L1 este deținut de australianul Frazer de la Universitatea din Queensland. Acest patent
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
se aplică două vaccinuri profilactice HPV care conțin proteina capsidară majoră L1 asamblată în VLP (virus-like particles). Vaccinurile sunt produse prin expresia genelor L1 în celule prokariote (Gardasil®) sau eukaryote (Cervarix®). Aceste proteine se asamblează în VLP care sunt capside virale goale, lipsite de genomul viral. Cele două vaccinuri comerciale sunt: Gardasil® - vaccin tetravalent; protejează împotriva genotipurilor HPV6/11/16/18. Vaccinul recombinant tetravalent produs de Merck Sharp & Dohme (MSD) poate preveni cancerul de col uterin, leziunile precanceroase, verucile genitale și
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
HPV care conțin proteina capsidară majoră L1 asamblată în VLP (virus-like particles). Vaccinurile sunt produse prin expresia genelor L1 în celule prokariote (Gardasil®) sau eukaryote (Cervarix®). Aceste proteine se asamblează în VLP care sunt capside virale goale, lipsite de genomul viral. Cele două vaccinuri comerciale sunt: Gardasil® - vaccin tetravalent; protejează împotriva genotipurilor HPV6/11/16/18. Vaccinul recombinant tetravalent produs de Merck Sharp & Dohme (MSD) poate preveni cancerul de col uterin, leziunile precanceroase, verucile genitale și alte afecțiuni cauzate de cele
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
Zhang LF. și colab., 1991, din totalul de masă proteică obținut dintr-un fermentor bacterian de 4 litri (aproape 10 g proteină), se obțin prin centrifugare în gradient 700 mg corpi incluzionari care conțin cantitatea cea mai mare de proteină virală. După precipitare cu uree și purificare cromatografică de obțin numai 250 mg proteină L1 HPV. Ambele produse sunt vaccinuri profilactice care trebuie administrate înaintea expunerii la infecție. După administrarea vaccinului, sistemul imun al gazdei generează un răspuns imun specific care
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
exemple: screening-ul citologic sau screening-ul virusologic, detecția ADN HPV etc.). Progresele recente în vaccinologie au condus la numeroase noi strategii de imunizare în scop preventiv sau terapeutic. Noi vaccinuri experimentale se adresează bolilor cu semnificație majoră pentru sănătatea publică: meningoencefalitele virale, noi viroze respiratorii, digestive, infecția HIV/SIDA etc. Vaccinurile candidate cu șanse de a fi introduse în practica curentă pot fi găsite la www.iavireport.org/trialsdb. Rezumând discuția la vaccinurile care și-au demonstrat eficiența și inocuitatea există 10
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
reactive va face și mai dificilă interpretarea frotiurilor Pap. În acest context, screening-ul inițial pentru ADN HPV are toate atributele de sensibilitate și specificitate pentru a fi recomandat ca test primar de screening. Posibilitatea genotipării și, eventual, a determinării încărcării virale va crește valoarea informațiilor furnizate clinicianului. În plus screening-ul HPV va permite lărgirea intervalului între examinări (5-6 ani) fără risc pentru creșterea proporției de leziuni decelate/tratate tardiv. Vaccinarea poate induce și o rată sporită de refuz al screening-ului. Recunoașterea
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
să aibă un anumit efect terapeutic. Includerea proteinei minore L2 și a oncoproteinelor E6/7 între imunogeni reprezintă soluțiile urmărite în prezent. Strategiile de administrare a acestor imunogeni sunt: vaccinuri subunitare (proteine/peptide sintetice), vaccinuri ADN, vaccinuri vector pe platforme virale sau bacteriene. Deși considerate un succes important al biotehnologiei, vaccinurile actuale ridică o serie de rezerve legate de costul excesiv, dependența de menținerea lanțului de frig în distribuție, administrarea parenterală și durata prognozat limitată a imunității induse mai ales, la
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
protecție heterologă; - să fie ieftine, stabile în timp și administrabile noninjectabil; - să aibe și aplicații terapeutice. Progresele în biologia moleculară și imunologie promit optimizarea performanțelor de siguranță și imunogenitate ale vaccinurilor. Între noile procedee de obținere menționăm: vaccinurile subunitare (peptide virale), antigene vectorizate de microorganisme modificate genetic, antigene produse de plante transgenice sau vaccinuri ADN. Fiecare procedeu trebuie însoțit de dezvoltarea unor kituri adecvate de diagnostic pentru evaluarea eficienței vaccinării (Dormitzer PR și colab., 2008). Alternative în studiu pentru vaccinuri HPV
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
bacterii sau virusuri recombinate, - Vaccinuri ADN. Posibilitatea îndeplinirii acestor deziderate poate fi evaluată din recapitularea imunobiologiei infecției HPV naturale. Populația de anticorpi rezultată în urma infecției HPV naturale este policlonală și heterogenă, recunoscând o diversitate de epitopi prezenți la suprafața capsidei virale dar și epitopi ai proteinelor timpurii reglatorii. Vaccinurile HPV alcătuite din VLP conțin imunogeni expuși exclusiv de proteina capsidară majoră L1. Există deci diferențe calitative și cantitative între răspunsul imun postvaccinare și răspunsul după infecția naturală. Afinitatea anticorpilor induși de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
acțiunii lor este datorat furnizării de semnale suplimentare, costimulatorii, limfocitelor imunocompetente. Foarte sumar, răspunsul imun consecutiv infecției HPV naturale depinde de sinergia a trei semnale (Fausch S.C. și colab., 2003): - activarea limfocitelor T helper care sunt stimulate de recunoașterea antigenelor virale de către TCR (receptorii celulelor T) - primul semnal; - activarea celulelor prezentatoare de antigen (macrofage dendritice, celulele Langerhans) stimulate de recunoașterea structurilor nonself prin TLR (Toll-like receptors) - al doilea semnal; - sinteza de citokine proinflamatorii - al treilea semnal (De Rosa S.C. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
adjuvanți. Adjuvanții aprobați și în Uniunea Europeană sunt alaunul și MF59 care scad doza necesară pentru obținerea titrurilor seroprotectoare și lărgesc și spectrul de protecție. În infecția HPV nu există viremie, conflictul virus-gazdă rezolvându-se la nivelul mucoaselor sau epidermului. Replicarea virală este intraepitelială și noncitocidă iar virionii progeni sunt eliberați odată cu descuamarea keratinocitelor superficiale, fără a veni în contact cu ganglionii locoregionali unde se edifică răspunsul imun. Altfel stau lucrurile în vaccinare. Vaccinurile HPV se administrează intramuscular iar imunogenii - VLP = virus-like
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
mult mai lungi decât în cazul VLP himeră. S-au sintetizat capsomere care conțin întreaga secvență a proteinelor L1, E6 și E7 cu imunogenitate remarcabilă (Fligge C. și colab., 2001). Studii recente au revăzut semnificația terapeutică a imunizării anti oncoproteine virale susținând că anticorpii anti-E2 au mai mare relevanță pentru eradicarea infecției HPV. VACCINURI HPV L2 Proteina capsidară minoră L2 conține epitopi liniari subdominanți dar care au un spectru de reactivitate extins pentru mai multe tipuri HPV (Kirnbauer R. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
anticorpi secretori IgA (S-IgA) care fixează virusul la poarta de intrare în complexe imune ce pot fi lesne eliminate. Datorită naturii polimerice a S-IgA, complexele imune de la nivelul mucoasei pot fixa un număr mai mare de variante antigenice virale. Sinteza accelerată de novo a IgA și IgG datorată limfocitelor B de memorie care debutează timpuriu, începând din ziua a 4-a după reinfecție. Persistența limfocitelor T CD8 de memorie care proliferează clonal încă din ziua a 3-a după
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
de IgG inferioare cu un logaritm celor obținute după injecția intramusculară dar acest lucru este compensat de sinteza locală a anticorpilor secretori. Cantitatea mare de imunogen necesară administrării enterale poate fi obținută prin utilizarea unor antigene enterobacteriene recombinate cu gene virale sau prin folosirea plantelor sau levurilor genetic modificate. În plus, administrarea enterică nu necesită procedee neeconomice de purificare a VLP. Varsard A. și colab., 2003 au demonstrat expresia proteinei L1 HPV 16 în Nicotiana tabacum, iar Warzecha H. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
induse. Datorită imunogenității slabe a ADN neprotejat (naked ADN) s-a apelat la diferite procedee de corecție: încapsularea în particule biodegradabile ZYC 101 (Garcia și colab., 2004), coadministrarea cu celule dendritice autologe, coadministrarea cu citokine sau cu alți adjuvanți. VECTORI VIRALI Vaccinurile cu vectori virali au avantajul de a fi înalt imunogene și de a induce și un oarecare răspuns heterolog. Rezervele în raport cu această soluție sunt imunitatea preexistentă a gazdei pentru vector (adenovirus sau virus vaccinal) și reacțiile adverse. Mai multe
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
a ADN neprotejat (naked ADN) s-a apelat la diferite procedee de corecție: încapsularea în particule biodegradabile ZYC 101 (Garcia și colab., 2004), coadministrarea cu celule dendritice autologe, coadministrarea cu citokine sau cu alți adjuvanți. VECTORI VIRALI Vaccinurile cu vectori virali au avantajul de a fi înalt imunogene și de a induce și un oarecare răspuns heterolog. Rezervele în raport cu această soluție sunt imunitatea preexistentă a gazdei pentru vector (adenovirus sau virus vaccinal) și reacțiile adverse. Mai multe studii preclinice au arătat
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
de Salmonella împreună cu bacilul Calmette-Guerin (Mycobacterium bovis) este o soluție de vaccin terapeutic care induce un răspuns imun celular citotoxic puternic (Jabbar și colab., 2000). O altă strategie a utilizării ADN HPV pentru producția de vaccin este construcția unui vector viral sau bacterian care să exprime și proteine himeră. Sistemul obține antigene himeră care induc răspuns imun puternic, humoral și celular, la animalele de experiență. Grefarea epitopilor străini are anumite limite în termenii mărimii (80 aminoacizi) și naturii epitopilor exprimați căci
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
proteine himeră. Sistemul obține antigene himeră care induc răspuns imun puternic, humoral și celular, la animalele de experiență. Grefarea epitopilor străini are anumite limite în termenii mărimii (80 aminoacizi) și naturii epitopilor exprimați căci proteinele himeră pot afecta viabilitatea recombinanților virali. Chiar dacă aceste vaccinuri nu previn evoluția cancerului, ele atenuează simptomatologia. În concluzie, vaccinurile de generația a 2-a constituie opțiunea pentru decada următoare, opțiune care va permite inducția unui răspuns heterolog sau/și cu proprietăți terapeutice în cancerul de col
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
reactive va face și mai dificilă interpretarea frotiurilor Pap. În acest context, screening-ul inițial pentru ADN HPV are toate atributele de sensibilitate și specificitate pentru a fi recomandat ca test primar de screening. Posibilitatea genotipării și, eventual, a determinării încărcării virale va crește valoarea informațiilor furnizate clinicianului. În plus, screening-ul HPV va permite lărgirea intervalului între examinări (5-6 ani) fără risc pentru creșterea proporției de leziuni decelate/tratate tardiv. Rezultatele excelente raportate de evaluarea eficienței celor două vaccinuri comercializate în prezent
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
un sistem intern de control de calitate și să fie verificate periodic de controale externe de calitate. Pentru aceste deziderate, laboratoarele trebuie să funcționeze cu îndeplinirea următoarelor condiții: Infrastructură (spații separate) și aparatură corespunzătoare pentru extracția, amplificarea și detecția ADN viral; Acreditare pentru proceduri de biologie moleculară, protocoale (SOP - standard operation procedures) și aplicarea cerințelor GLP (good laboratory practice); Sistem de monitorizare a performanțelor prin evaluări periodice cu paneluri de probe, disponibile la nivel național. În practică, laboratoarele care procesează un
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
sunt mai performante decât laboratoarele mici (Arbyn M. și colab., 2006). Acreditările periodice pot conduce și la rezultate negative însă este important ca panelurile de probe utilizate să fie corespunzătoare. Multe rezultate diferite între laboratoare se datoresc probelor cu încărcare virală mică. Acestea provin de la infecții HPV tranzitorii care nu au potențial oncogen și nici relevanță clinică. Pentru evaluarea vaccinării criteriul final primar considerat este leziunea CIN 3 și nu CIN 2. Este din ce în ce mai acceptată opinia că leziunile CIN 2 reprezintă
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
exemplu, nivelul de expresie a oncoproteinelor E6/E7. SUPRAVEGHEREA EFICIENȚEI VACCINĂRII Deși scopul vaccinării HPV este prevenirea cancerului de col și a leziunilor precanceroase, acest efect nu va putea fi remarcat decât după 10-20 ani, datorită evoluției îndelungate a carcinogenezei viral induse (Snijders P.J. și colab., 2006). Criteriul final secundar de supraveghere post-vaccinare este prevenirea infecției persistente cu genotipurile din vaccin. Este criteriul care poate fi verificat cel mai devreme, cu teste obiective, standardizate și reproductibile. Diagnosticul infecției persistente înseamnă detecția
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]