9,518 matches
-
RT - PCR (reverse transcriptase PCR) utilizează transcriptaze inverse, izolate din retrovirusuri, care au capacitatea de a-și crea o copie ADN a genomului lor (ARN), necesară perioadei în care se află în celulele eucariote. PCR poate fi utilizată și pentru detectarea mutațiilor punctiforme ale unei gene, direct sau indirect, prin studiul polimorfismului conformației catenelor unice de ADN (single strand conformational polymorphism - SSCP). Transferul proteinelor (Western blotting) a fost introdus inițial pentru a identifica antigenele proteice care leagă anticorpi specifici. Un amestec
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
detalii despre rolurile lor fiziologice, iar modificarea poziției unor proteine poate duce la elucidarea unor mecanisme patologice, au fost dezvoltate metode de vizualizare prin microscopie optică sau electronică, după marcarea fluorescentă a proteinelor. Hibridizarea in situ reprezintă un instrument de detectare și de evaluare a nivelelor relative de expresie și de distribuție a produșilor de transcripție ARN în cadrul celulelor și a țesuturilor. Utilizarea probelor non - radioactive prezintă o serie de avantaje față de cele radioactive: rezoluția mai înaltă, manipularea mai ușoară, reziduuri
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
din carcinoamele invazive [210]. Deși nu în toate cazurile, există o corelație între amplificarea genei și elementele de agresivitate și prognostic rezervat [176,271,359]. Amplificarea și supraexpresia c-erbB-2 este asociată cu forme agresive de cancer mamar, apărând astfel surprinzătoare detectarea prin imunohistochimie în carcinoamele ductale in situ [72]. Cunoașterea status-ului c-erbB-2 poate fi utilă în stabilirea terapiei deoarece există evidențe clare că tumorile c-erbB 2 pozitive prezintă un răspuns scăzut la terapia hormonală [245,321,470]. EGF și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
CEA și în cancerul mamar. Apar o serie de corelații cu supraviețuirea, invazia ganglionară, selectarea pacientelor pentru chimioterapia adjuvantă. Nu s-a clarificat încă în ce măsură concentrațiile plasmatice ar putea fi utilizate ca metodă de screening sau de monitorizare a evoluției (detectarea recurențelor sau a metastazelor). Valorile crescute sunt corelate cu stadiul bolii și cu răspunsul la tratament. Este descoperit în 30-50 % din toate cazurile, în formele avansate de boală, fiind evidențiat în 70% din cazuri. Susceptibilitatea unei paciente de a avea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
boală și a duratei de supraviețuire [380] deși unii nu au evidențiat acest lucru sau l-au remarcat doar în cazurile cu ganglioni axilari pozitivi. Amplificarea și supraexpresia c-erbB-2 este asociată cu forme agresive de cancer mamar, apărând astfel surprinzătoare detectarea prin imunohistochimie în carcinoamele ductale in situ [266].Emil ANTON, Nicolae IOANID - Cancerul glandei mamare - biologie moleculară și markeri tumorali Capitolul 1 DATE GENERALE Anatomie patologică; Biologie moleculară; Markeri tumorali serici Cu aproximativ jumătate de milion de noi cazuri în
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
RT - PCR (reverse transcriptase PCR) utilizează transcriptaze inverse, izolate din retrovirusuri, care au capacitatea de a-și crea o copie ADN a genomului lor (ARN), necesară perioadei în care se află în celulele eucariote. PCR poate fi utilizată și pentru detectarea mutațiilor punctiforme ale unei gene, direct sau indirect, prin studiul polimorfismului conformației catenelor unice de ADN (single strand conformational polymorphism - SSCP). Transferul proteinelor (Western blotting) a fost introdus inițial pentru a identifica antigenele proteice care leagă anticorpi specifici. Un amestec
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
detalii despre rolurile lor fiziologice, iar modificarea poziției unor proteine poate duce la elucidarea unor mecanisme patologice, au fost dezvoltate metode de vizualizare prin microscopie optică sau electronică, după marcarea fluorescentă a proteinelor. Hibridizarea in situ reprezintă un instrument de detectare și de evaluare a nivelelor relative de expresie și de distribuție a produșilor de transcripție ARN în cadrul celulelor și a țesuturilor. Utilizarea probelor non - radioactive prezintă o serie de avantaje față de cele radioactive: rezoluția mai înaltă, manipularea mai ușoară, reziduuri
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
din carcinoamele invazive [210]. Deși nu în toate cazurile, există o corelație între amplificarea genei și elementele de agresivitate și prognostic rezervat [176,271,359]. Amplificarea și supraexpresia c-erbB-2 este asociată cu forme agresive de cancer mamar, apărând astfel surprinzătoare detectarea prin imunohistochimie în carcinoamele ductale in situ [72]. Cunoașterea status-ului c-erbB-2 poate fi utilă în stabilirea terapiei deoarece există evidențe clare că tumorile c-erbB 2 pozitive prezintă un răspuns scăzut la terapia hormonală [245,321,470]. EGF și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
CEA și în cancerul mamar. Apar o serie de corelații cu supraviețuirea, invazia ganglionară, selectarea pacientelor pentru chimioterapia adjuvantă. Nu s-a clarificat încă în ce măsură concentrațiile plasmatice ar putea fi utilizate ca metodă de screening sau de monitorizare a evoluției (detectarea recurențelor sau a metastazelor). Valorile crescute sunt corelate cu stadiul bolii și cu răspunsul la tratament. Este descoperit în 30-50 % din toate cazurile, în formele avansate de boală, fiind evidențiat în 70% din cazuri. Susceptibilitatea unei paciente de a avea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
boală și a duratei de supraviețuire [380] deși unii nu au evidențiat acest lucru sau l-au remarcat doar în cazurile cu ganglioni axilari pozitivi. Amplificarea și supraexpresia c-erbB-2 este asociată cu forme agresive de cancer mamar, apărând astfel surprinzătoare detectarea prin imunohistochimie în carcinoamele ductale in situ [266]. A fost demonstrată o puternică relație cu Ki67 și p53 dar nu au fost evidențiate asocieri cu statusul menopauzal, volumul tumoral sau prezența metastazelor [380]. Herceptinul este un anticorp monoclonal recombinat care
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
studiați în capitolele precedente. Materiale și metode Studiul a fost efectuat pe același lot de paciente, investigate pentru markerii precedenți. În mod obișnuit, forma normală (wild-type) a proteinei p53 este foarte instabilă. Ca urmare, timpul de înjumătățire este foarte scurt, detectarea acestei forme fiind aproape imposibilă prin imunohistochimie. Formele care iau naștere prin diverse mecanisme (mutații, deleții) dobândesc stabilitate, ceea ce face ca proteina să se acumuleze în nucleu, dând posibilitatea detectării ei prin imunohistochimie. Studiul a fost realizat pe secțiuni la
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
foarte instabilă. Ca urmare, timpul de înjumătățire este foarte scurt, detectarea acestei forme fiind aproape imposibilă prin imunohistochimie. Formele care iau naștere prin diverse mecanisme (mutații, deleții) dobândesc stabilitate, ceea ce face ca proteina să se acumuleze în nucleu, dând posibilitatea detectării ei prin imunohistochimie. Studiul a fost realizat pe secțiuni la parafină. După deparafinare și hidratare, secțiunile au fost supuse unei etape pregătitoare, de demascare a situsurilor antigenice, prin tratare cu soluție de demascare (Retrieval Antigen Solution - DAKO), la 98 0
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
Este un biomarker de natură mucinică, recunoscut de 2 tipuri de anticorpi monoclonali. Valorile crescute ale CA 15-3 sunt frecvent asociate cu existența unui cancer mamar. Este cu utilizarea cea mai largă, mai ales în monitorizarea pacientelor, sensibilitatea sa în detectarea bolii în stadii precoce fiind redusă. Nivele serice crescute ale CA 15-3 depind de: stadiul bolii; numărul organelor interesate; sediul principal al metastazelor (valori crescute în metastaze pulmonare, hepatice). CA 15 3 poate fi util în urmărirea eficienței terapiei neoplasmului
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
că permite măsurarea ER și PR din cantități foarte mici de probă, a condus la obținerea unor kituri ce sunt comercializate. Metoda imuno-enzimatică (EIA Enzymatic immunoassays) Obținerea de anticorpi monoclonali specifici pentru proteinele receptoare pentru estrogeni și progesteronă a permis detectarea acestora în stare liberă, independent de procesul de legare al hormonului. A devenit astfel posibilă dezvoltarea studiilor referitoare la ER și PR, în sensul că este posibilă o recunoaștere antigenică directă a proteinelor și nu indirectă, bazată pe capacitatea de
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
prealabil investigarea expresiei ER și PR, având în vedere că efectele agenților terapeutici respectivi depind de statusul receptorilor hormonali. Astfel, studiul receptorilor hormonali trebuie să devină o investigație de rutină în abordarea diagnostică și terapeutică a unei tumori mamare maligne. Detectarea receptorilor hormonali reprezintă o importantă metodă de predicție a răspunsului la manipulare endocrină atât în cancerul mamar precoce cât și în cel avansat; Metoda imunohistochimică aduce o predicție valoroasă privind răspunsul la terapia endocrină chiar în prezența unor receptori estrogenici
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
studiu am utilizat același lot de paciente ca și pentru studiul dimensiunilor tumorale. Examinarea ganglionilor axilari a fost efectuată prin 3 metode: clinică, ultrasonografică și histologică. Examinarea clinică este metoda care se află la îndemâna oricărui specialist. Ca și în cazul detectării clinice a tumorilor mamare este necesară exeperiența, cu atât mai mult cu cât precizia acestei metode este marcată de o rată ridicată a evaluărilor fals pozitive sau fals negative [26, 64, 324]. Examinarea clinică a ariilor ganglionare a constituit un
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
fi metoda standard pentru stadializare și prevenirea recurențelor axilare [46,377]. O metodă introdusă recent în serviciul nostru constă în studiul ganglionului „santinelă” (GS). Acesta reprezintă primul releu limfatic ganglionar spre care drenează tumora. Starea GS certifică starea ganglionilor axilari. Detectarea ganglionului santinelă și prelevarea acestuia ar putea înlocui, într-un număr de cazuri, disecția axilară [52,75,94,164,165,166,326]. Pentru detectarea GS s-a utilizat un colorant albastru vital (izosulfan), Lymphazurin 2 ml. , injectat intratumoral, peritumoral sau
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
Acesta reprezintă primul releu limfatic ganglionar spre care drenează tumora. Starea GS certifică starea ganglionilor axilari. Detectarea ganglionului santinelă și prelevarea acestuia ar putea înlocui, într-un număr de cazuri, disecția axilară [52,75,94,164,165,166,326]. Pentru detectarea GS s-a utilizat un colorant albastru vital (izosulfan), Lymphazurin 2 ml. , injectat intratumoral, peritumoral sau, dacă tumora a fost excizată, pe versantul axilar al cavității restante. Volumul de colorant depinde de distanța de la tumora primară până la axilă și de
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
20 de paciente. Ganglionul santinelă a fost studiat histologic prin examen extemporaneu. Acuratețea examenului extemporaneu este apreciată astfel: fiabilitate 92%, specificitate 99%, sensibilitate 76%, rezultate fals negative 6,8%, rezultate fals pozitive 0,5%. Pentru a verifica fiabilitatea metodei, după detectarea și prelevarea ganglionului santinelă s-a completat intervenția cu disecția axilară a nivelelor I și II, indiferent de starea ganglionului santinelă. Examenul histologic la parafină a evidențiat faptul că datele furnizate de ganglionul santinelă au fost în concordanță, în toate
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
20 de paciente. Ganglionul santinelă a fost studiat histologic prin examen extemporaneu. Acuratețea examenului extemporaneu este apreciată astfel: fiabilitate 92%, specificitate 99%, sensibilitate 76%, rezultate fals negative 6,8%, rezultate fals pozitive 0,5%. Pentru a verifica fiabilitatea metodei, după detectarea și prelevarea ganglionului santinelă s-a completat intervenția cu disecția axilară a nivelelor I și II, indiferent de starea ganglionului santinelă. Examenul histologic la parafină a evidențiat faptul că datele furnizate de ganglionul santinelă au fost în concordanță, în toate
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
ganglionare modifică utilitatea folosirii de rutină a RLND, în timp ce caracteristicile tumorale au un rol din ce în ce mai proeminent. Urgența biopsiei ganglionului sentinelă pare să ofere o soluție în această dilemă. Dacă conceptul este valid, va fi posibilă elaborarea unei metode clare de detectare a prezenței metastazelor ganglionare fără a diseca,,orb” axila. Conceptul de „ganglion santinelă” De la Thomas Bartholin care a utilizat termenul de „limfatic” în 1653, acest sistem a atras atenția a numeroși anatomiști și fiziologi. Semnificația sistemului limfatic ca și calea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
deplin înțeleasă în acel timp. Morton și colaboratorii se angajează într-o vastă cercetare a limfoscintigrafiei cutanate ca o metodă de depistare a ganglionilor pelvini în melanom. [282]. Imediat după raportul original a lui Morton în 1992, a fost introdusă detectarea radiocoloizilor cu cameră gamma pentru detectarea ganglionului sentinelă, [283] cu rezultate încurajatoare, ipoteza părând adevărată cu privire la rolul și existența ganglionului sentinelă. Astfel, limfoscintigrafia lanțului mamar intern în cancerul de sân constituie o modalitate deosebită pentru evaluarea atât a statusului lanțului
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
și colaboratorii se angajează într-o vastă cercetare a limfoscintigrafiei cutanate ca o metodă de depistare a ganglionilor pelvini în melanom. [282]. Imediat după raportul original a lui Morton în 1992, a fost introdusă detectarea radiocoloizilor cu cameră gamma pentru detectarea ganglionului sentinelă, [283] cu rezultate încurajatoare, ipoteza părând adevărată cu privire la rolul și existența ganglionului sentinelă. Astfel, limfoscintigrafia lanțului mamar intern în cancerul de sân constituie o modalitate deosebită pentru evaluarea atât a statusului lanțului mamar intern cât și a localizării
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
nu necesară limfadenectomia axilară în cancerul glandei mamare ?!. Evidențierea ganglionului sentinelă descoperit prin urmărirea a două trunchiuri limfatice, după colorare cu albastru de metilen Evidențierea intraoperatorie a ganglionului sentinelă, atât prin metoda colorării cu albastru de metilen, cât și prin detectarea limfoscintigrafică cu camera Gamma Probe CONCLUZII FINALE Volumul tumoral face parte din grupul factorilor de prognostic clasici. Dimensiunea tumorii primare reprezintă, în general, un element prognostic important deși, date mai recente, indică rolul de prim ordin al status-ului ganglionilor
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
mai redusă comparativ cu cei clinico-patologici su cu cei evidențiaiț prin imunohistochimie. Dozarea CA 15-3 se dovedește superioară celei de CEA. Se impune ca obligatorie monitorizarea dozărilor de CA 15-3 sub forma unor fișe personale (grafice). Superioritatea metodelor imunologice de detectare a modificărilor metabolismului celulelor neoplazice, constă în faptul că orice recidivă, metastază sau nouă apariție a antigenelor exprimate de aceleași celule tumorale, se vor exprima printr-o creștere a concentrației serice a markerului avut în vedere, cu mult înaintea apariției
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]