9,837 matches
-
este de 84%, iar între HC2 și AMP între 84,4-85,9% (Stevens M.P. și colab., 2007). Automatizarea cu ajutorul unei platforme BeeBlot™ a demonstrat fiabilitatea kit-urilor Roche crescând viteza și reproductibilitatea determinărilor (Stevens M.P., și colab., 2008). Amplificarea ADN viral se realizează în cicluri multiple de denaturare-amorsare-elongare în cunoscutele mașini numite termocycleri. Noile mașini LightCycler™ combină amplificarea simultană a mai multor specii de ADN viral cu analiza datelor de kinetică. LightCycler™ utilizează aerul ca mediu pentru controlul temperaturii reducând semnificativ
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
kit-urilor Roche crescând viteza și reproductibilitatea determinărilor (Stevens M.P., și colab., 2008). Amplificarea ADN viral se realizează în cicluri multiple de denaturare-amorsare-elongare în cunoscutele mașini numite termocycleri. Noile mașini LightCycler™ combină amplificarea simultană a mai multor specii de ADN viral cu analiza datelor de kinetică. LightCycler™ utilizează aerul ca mediu pentru controlul temperaturii reducând semnificativ timpul de testare (obișnuit, 40 cicluri în 25 minute). Folosirea unor capilare fine de borosilicat ca vase de reacție permite transferul eficient al căldurii. Modificările
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
teste Roche (AMP și LA) sunt relativ ușor de utilizat și oferă o metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
ușor de utilizat și oferă o metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite de risc oncogen. Rezultate reproductibile au fost publicate în privința corelației încărcării virale pentru HPV 16
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite de risc oncogen. Rezultate reproductibile au fost publicate în privința corelației încărcării virale pentru HPV 16 (nu și pentru alte genotipuri) și prezența sau progresia leziunilor CIN2/3. Determinarea semicantitativă a încărcării virale se poate face cu metoda HC2 dar sunt metode mai sensibile, precum real-time PCR multiplex care dau rezultate de o
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite de risc oncogen. Rezultate reproductibile au fost publicate în privința corelației încărcării virale pentru HPV 16 (nu și pentru alte genotipuri) și prezența sau progresia leziunilor CIN2/3. Determinarea semicantitativă a încărcării virale se poate face cu metoda HC2 dar sunt metode mai sensibile, precum real-time PCR multiplex care dau rezultate de o acuratețe sporită. TESTE RAPIDE Un deziderat important al metodelor de diagnostic sau de screening este furnizarea unor rezultate imediate ceea ce
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
induse de vaccin. 6. Nivelul foarte limitat de protecție încrucișată față de alte genotipuri HPV, nivel care, probabil, se va pierde odată cu prelungirea intervalului de urmărire post-vaccinare. 7. Proprietățile oncogene ale unor genotipuri HPV neincluse în vaccin. 8. Modificarea distribuției genotipurilor virale ca efect al vaccinării generalizate. 9. Absența proprietăților terapeutice ale vaccinurilor actuale. 10. Impactul vaccinurilor actuale asupra vaccinurilor de a 2-a generație. 11. Costul ridicat al vaccinării. Inițierea programelor trebuie precedată de negocieri care să conducă la obținerea vaccinurilor
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
Posibilul rol al infecției HPV în cancerul cervical a fost semnalat între 1974-1976 (zur Hausen H. și colab., 1974, zur Hausen H., 2002). În 1976, Meisels și Fortin au remarcat apariția koilocitelor pe frotiurile cervicale, aspect ce indică prezența infecției virale, sugerând posibile diferențieri între leziunea benignă care nu progresează în cancer și leziunea care are potențial carcinogen. În 1976, Gissmann și zur Hausen au reușit să precizeze diversitatea genotipurilor ADN HPV și împărțirea lor în raport cu riscul oncogen înalt (HPV hr
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
umane se bazează pe detecția frecventă a ADN HPV hr în unele leziuni precanceroase sau în neoplaziile cervicale și ale regiunii ano-genitale. Studii detaliate au lămurit etapele moleculare ale carcinogenezei HPV, Munger și colab., 1989, demonstrând proprietățile transformante ale oncoproteinelor virale E6 și E7. Descoperirea decisivă pentru producția vaccinului HPV a fost făcută de o echipă de cercetători chinezi (Zhou și colab., 1991) în laboratorul lui Frazer. Ei au reușit să purifice proteina capsidară majoră a HPV care are proprietatea de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
cancer s-a dovedit oportună în cancerul de col datorită numărului mare de cazuri și eficienței limitate a altor intervenții profilactice. Mai mult, durata mare a carcinogenezei cu papilomavirusuri face acest proces reversibil. Vaccinurile HPV actuale controlează infecția cu genotipurile virale cu potențial oncogen înalt, rămânând însă neinfluențate infecții responsabile de alte 30% cazuri de cancer de col. Aceiași boală fiind asociată etiologic mai multor virusuri, se pune întrebarea dacă excluderea unora prin vaccinare nu va antrena creșterea potențialului oncogen al
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
rămânând însă neinfluențate infecții responsabile de alte 30% cazuri de cancer de col. Aceiași boală fiind asociată etiologic mai multor virusuri, se pune întrebarea dacă excluderea unora prin vaccinare nu va antrena creșterea potențialului oncogen al celorlalte. Substituirea unui genotip viral prin altul este un fenomen de ecologie virală care se poate produce în două condiții: 1. Când există o competiție (fie și parțială) între genotipuri în cursul infecției naturale; 2. Când vaccinul nu induce protecție încrucișată între competitori. În cazul
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
cazuri de cancer de col. Aceiași boală fiind asociată etiologic mai multor virusuri, se pune întrebarea dacă excluderea unora prin vaccinare nu va antrena creșterea potențialului oncogen al celorlalte. Substituirea unui genotip viral prin altul este un fenomen de ecologie virală care se poate produce în două condiții: 1. Când există o competiție (fie și parțială) între genotipuri în cursul infecției naturale; 2. Când vaccinul nu induce protecție încrucișată între competitori. În cazul HPV nu există competiție între genotipuri ci dimpotrivă
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
și 11 șansele de a fi infectat cu HPV 16/18/31 sunt de aproape trei ori mai mari. Acest risc rămâne chiar după ajustarea rezultatelor în raport cu particularități ale comportamentului sexual sau după corecția privind alte coinfecții transmise sexual. Ecologia virală poate fi influențată și dacă durata infectivității cu un subtip afectează timpul pentru regresia sau vindecarea unei infecții subsecvente cu un alt subtip. În studii repetat confirmate, seropozitivitatea inițială pentru un subtip nu influențează evoluția altor infecții. Aceste date fundamentează
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
probabilă și nu a fost argumentată nici practic, după secvențierea izolatelor HPV 16 provenind din mai multe areale geografice. Gardasil este un vaccin tetravalent recombinant non-infecțios preparat din particule asemănătoare virusului. Vaccinul este tetravalent deoarece conține proteinele majore ale capsidei virale (L1) de la 4 genotipuri HPV: 6, 11, 16, 18. Aceste proteine sunt produse prin tehnologia ADN recombinant în celule de drojdie (Saccharomyces cerevisiae) și ele au proprietatea de a se autoasambla în particule asemănătoare virusului (VLP - virus like particles). Vaccinul
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
cerevisiae) și ele au proprietatea de a se autoasambla în particule asemănătoare virusului (VLP - virus like particles). Vaccinul este noninfecțios în sensul că nu poate produce bolile împotriva căruia este destinat ci asigură protecție împotriva lor. VLP nu conțin genomul viral, nu pot infecta celulele susceptibile. HPV infectează numai oamenii și primatele hominoide, demonstrând spectrul restrâns de gazdă al acestor virusuri. Același lucru s-a constatat pentru papilomavirusurile animale. Conceptul utilizării unor vaccinuri împotriva infecției cu papilomavirusuri ca mijloc de prevenție
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
probat la animale. La mai multe specii (canine, bovine etc.) infecția persistentă favorizează dezvoltarea unor tumori. Vaccinarea cu imunogeni de tip VLP, specifici fiecărei specii, induce un răspuns imun umoral care asigură protecție în cazul expunerii la virus. Prevenind infecția virală, vaccinarea previne și dezvoltarea consecutivă a cancerului. Această protecție este restrânsă la fiecare genotip, protecția heterologă este precară și se pierde în timp. Indicația de administrare a Gardasil se bazează pe demonstrarea eficienței în trialuri clinice la femei între 16-26
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
o revigorare consistentă a titrului de anticorpi. Celălalt vaccin HPV, Cervarix™, este un vaccin bivalent care diferă de Gardasil™ nu numai prin compoziția limitată la două genotipuri oncogene (HPV 16 și 18) dar și prin sursa de obținere a imunogenilor virali și prin adjuvanții adăugați vaccinului. Cervarix™ conține o cantitate de trei ori mai mică de proteină virală ceea ce ar trebui să-i confere o reactogenitate diminuată. Cu toate acestea, titrurile de anticorpi induse sunt comparabile cu ale vaccinului tetravalent, sugerând
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
de Gardasil™ nu numai prin compoziția limitată la două genotipuri oncogene (HPV 16 și 18) dar și prin sursa de obținere a imunogenilor virali și prin adjuvanții adăugați vaccinului. Cervarix™ conține o cantitate de trei ori mai mică de proteină virală ceea ce ar trebui să-i confere o reactogenitate diminuată. Cu toate acestea, titrurile de anticorpi induse sunt comparabile cu ale vaccinului tetravalent, sugerând o anumită competiție între componentele vaccinului. Vaccinul Cervarix™ a demonstrat și un grad limitat de inducție a
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
mai mari (zeci-sute de ori) și mai persistente (vezi capitolul 7). Diferențele calitative sunt date de limitarea compoziției vaccinului la un singur determinant imunologic - proteina capsidară majoră L1. Gazda infectată natural elaborează și efectori imuni cu specificitate împotriva altor proteine virale: E6, E7, E2 etc. Anticorpii anti-E2 și E6 sunt critici pentru regresia infecției naturale. Anticorpii anti- E7 și E6 blochează funcția celor două oncoproteine virale. O problemă care vizează siguranța vaccinului pe termen lung este posibilitatea suplinirii funcționale a E7
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
capsidară majoră L1. Gazda infectată natural elaborează și efectori imuni cu specificitate împotriva altor proteine virale: E6, E7, E2 etc. Anticorpii anti-E2 și E6 sunt critici pentru regresia infecției naturale. Anticorpii anti- E7 și E6 blochează funcția celor două oncoproteine virale. O problemă care vizează siguranța vaccinului pe termen lung este posibilitatea suplinirii funcționale a E7 și E6 de la genotipurile din vaccin de aceleași proteine ale altor genotipuri oncogene sau chiar neoncogene. Proteina virală timpurie E6 este activă în oncogeneză prin
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
și E6 blochează funcția celor două oncoproteine virale. O problemă care vizează siguranța vaccinului pe termen lung este posibilitatea suplinirii funcționale a E7 și E6 de la genotipurile din vaccin de aceleași proteine ale altor genotipuri oncogene sau chiar neoncogene. Proteina virală timpurie E6 este activă în oncogeneză prin blocarea genei celulare pentru antioncoproteina p53 (tumour-suppressor protein). P53 este paznicul integrității genomului celular. În multe cancere p53 este anihilat funcțional dar căile sale de acțiune rămân intacte și pot fi resuscitate (fig
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
celular. În multe cancere p53 este anihilat funcțional dar căile sale de acțiune rămân intacte și pot fi resuscitate (fig. 1). Funcția nealterată a p53 face celula capabilă să răspundă la leziunile genomice provocate de carcinogeni distincți: radiații, carcinogeni chimici, virali etc. De asemenea, activarea p53 permite inițierea programelor celulare care conduc la apoptoză sau la senescență în cazul în care leziunile genomice celulare persistă. În acest fel, celulele cu potențial oncogen sunt eliminate. Probabil că această vulnerabilitate a celulelor canceroase
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
Studiile de biologie moleculară continuă să investigheze căile de reactivare a p53 în cancerele de col propunând diferite strategii, de la inhibitori chimici ai antagoniștilor p53 la terapia genică. Vaccinurile de generație secundă încearcă să argumenteze posibilitatea anihilării imunologice a oncoproteinelor virale, incluzând E6 și E7 în VLP himeră (vezi capitolul 7). PRIORITĂȚI RECENTE PENTRU AMELIORAREA VACCINURILOR HPV Vaccinurile comercializate reprezintă numai o etapă a imunoprofilaxiei cancerului de col. Fiecare vaccin trebuie însoțit de mijloacele de diagnostic al eficienței, iar criteriile clinice
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]