359 matches
-
ml utilizați la testarea oarbă efectuată cu apă (6.2). 7.1.2. Numărul de ml utilizați la testarea la rece cu soluția de zahăr (6.3). 7.1.3. 2 ml pentru fiecare 10 g de zaharoză prezentă în alicota utilizată sau o cantitate proporțională, dacă proba conține cel mult 10 g zaharoză (corectare pentru zaharoză). După efectuarea acestor corecții, fiecare ml soluție de iod (4.3) consumată corespunde unui mg de zahăr invertit. Conținutul de zahăr invertit, exprimat în
jrc538as1979 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85676_a_86463]
-
de laborator curat și se amestecă bine. 6.1.2. Se clătește biureta și se umple cu 0,25% (0,25 g/100 ml) soluție etalon de zahăr invertit (4.3). 6.1.3. Se introduce cu pipeta o parte alicotă de 20 ml amestec de soluții A și B (6.1.1) într-un balon de fierbere de 500 ml (5.1). Se adaugă 15 ml de apă în balon. Se varsă din biuretă 39 ml soluție de zahăr invertit
jrc538as1979 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85676_a_86463]
-
a). (NB: Când se calculează greutatea reziduului, se scade cantitatea de 2-metoxietoxietanol utilizat) - se deschide sticla de transfer prin îndepărtarea robinetului. - se dizolvă complet reziduul într-o cantitate cunoscută dintr-un solvent adecvat. - se efectuează determinarea dorită pe o parte alicotă. Formulele de calcul sunt: și , unde: m1 = masa de aerosoli luată în sticla de transfer, M2 = masa reziduului după încălzirea la 40°C, r = procentul de substanță specifică în m2 (determinat conform metodei adecvate), R = procentul de substanță specifică în
jrc622as1980 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85760_a_86547]
-
Se utilizează 500 μl pentru testele de C. m. ssp. sepedonicus, 500 μl pentru testele de Ralstonia solanacearum și 500 μl ca valoare de referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (în volum) la 500 μl din alicota de referință și la alicota de test rămasă, se agită și se depozitează la o temperatură între -16 și -24 ° C (săptămâni) sau între -68 și -86 °C (luni). În timpul testelor, alicotele de test se păstrează la o temperatură de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
testele de C. m. ssp. sepedonicus, 500 μl pentru testele de Ralstonia solanacearum și 500 μl ca valoare de referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (în volum) la 500 μl din alicota de referință și la alicota de test rămasă, se agită și se depozitează la o temperatură între -16 și -24 ° C (săptămâni) sau între -68 și -86 °C (luni). În timpul testelor, alicotele de test se păstrează la o temperatură de 4-10 °C. Nu sunt recomandate
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de 10-25 % (în volum) la 500 μl din alicota de referință și la alicota de test rămasă, se agită și se depozitează la o temperatură între -16 și -24 ° C (săptămâni) sau între -68 și -86 °C (luni). În timpul testelor, alicotele de test se păstrează la o temperatură de 4-10 °C. Nu sunt recomandate congelările și dezghețările repetate. În cazul în care extractul trebuie transportat, se va asigura livrarea în termen de 24-48 de ore într-o ladă frigorifică. 3.1
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
2 și, eventual, într-o soluție tampon. Ca martor similar pe aceeași lamă ar trebui utilizat, în măsura posibilului, țesut infectat în mod natural (conservat prin liofilizare sau congelare între -16 °C și -24 ° C). Ca martori negativi se folosesc alicote de extract de probă care au dat, în prealabil, un rezultat negativ la teste. Se utilizează lame de microscop cu multe godeuri dotate, de preferință, cu 10 ferestre cu un diametru minim de 6 mm. Materialul de control se testează
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
extractele de probă proaspăt preparate, dar procedura poate funcționa, de asemenea, cu extracte de probă conservate în soluție de glicerol la temperaturi între -16 °C și -24 °C sau între -68 °C și -86 °C. Ca martori negativi se folosesc alicote de extract de probă care au dus în prealabil la un rezultat negativ, cu ocazia testelor de depistare a C. m. ssp. sepedonicus. Ca martori pozitivi se prepară suspensii care conțin între 105 și 106 celule/ml de C. m.
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
negativi: - extract de probă care a dat anterior rezultate negative pentru C. m. ssp. sepedonicus; - tampoane martori folosite pentru a extrage bacteria și ADN-ul din probă; - amestec reactiv pentru PCR. De asemenea, trebuie incluși aici și următorii martori pozitivi: - alicote de extracte finale repuse în suspensie, după ce s-a adăugat C. m. ssp. sepedonicus (a se vedea apendicele 2 pentru preparare); - suspensie în mediu apos de 106 celule pe mililitru dintr-un izolat virulent de C. m. ssp. sepedonicus (de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
false, condițiile de creștere trebuie să fie optime. Pentru detaliile privind cultura, a se vedea apendicele 8. 7.1. Se repartizează pe pătlăgelele vinete, în conformitate cu una dintre metodele indicate în continuare (punctul 7.3 sau 7.4), tot restul de alicotă de test din extractul concentrat repus în suspensie, obținut în conformitate cu indicațiile din secțiunea 3.1.6 sau 3.2.5. Se folosesc doar plante ajunse în stadiul celei de-a doua sau a treia frunze, până la dezvoltarea completă a celei
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
este adecvat pentru cultura agentului patogen înainte de a-l utiliza pentru testarea probelor de rutină. Materialul de control se testează la fel ca și probele. 8.1. Desfășurare pe medii selective 8.1.1. Pe baza a 100 μl de alicotă de probă de extract concentrat de cartof repus în suspensie sau de sevă de pătlăgea vânătă, se efectuează diluții la a zecea parte într-un tampon de extract concentrat (a se vedea apendicele 3). 8.1.2. Tentativele de izolare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se desfășoare, cu ajutorul unui aplicator ("crosă de hockey"), 100 μl din fiecare probă, cu diluții de 1/100-1/10 000, pe un mediu MTNA sau NCP-88 (a se vedea apendicele 5). Nota bene: O altă strategie poate consta în desfășurarea alicotei inițiale de 100 μl de extract concentrat de cartof pe o primă lamă de agar cu ajutorul unui aplicator, întinderea în striuri pe o a doua lamă a restului rămas pe aplicator și repetarea procedurii pe o a treia lamă. Aplicatorul
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
niveluri de contaminare la a zecea parte, urmând diluția în următoarele cinci microfiole. Cele șase microfiole contaminate vor fi utilizate ca martori pozitivi. Cele patru microfiole necontaminate vor fi utilizate ca martori negativi. Microfiolele se etichetează în consecință. Se prepară alicote de 100 μl în microfiole sterile de 1,5 ml, astfel încât să se obțină nouă replici ale fiecărei probe martor. Se depozitează la temperaturi între -16 și -24 °C până în momentul utilizării. Prezența și cuantificarea C. m. ssp. sepedonicus în
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
ml tampon concentrat (apendicele 4). Se folosesc 500 μl pentru a testa R. solanacearum, 500 μl pentru Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus și 500 μl pentru referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (volum) la 500 μl de alicote de referință și la alicota de testare rămasă, se omogenizează în vortex și se depozitează la o temperatură situată între - 16 și - 24 °C (săptămâni) sau între - 68 și - 86 °C (luni). Alicotele de testare se păstrează în timpul testelor la
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se folosesc 500 μl pentru a testa R. solanacearum, 500 μl pentru Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus și 500 μl pentru referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (volum) la 500 μl de alicote de referință și la alicota de testare rămasă, se omogenizează în vortex și se depozitează la o temperatură situată între - 16 și - 24 °C (săptămâni) sau între - 68 și - 86 °C (luni). Alicotele de testare se păstrează în timpul testelor la o temperatură de 4-10 °C.
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de 10-25 % (volum) la 500 μl de alicote de referință și la alicota de testare rămasă, se omogenizează în vortex și se depozitează la o temperatură situată între - 16 și - 24 °C (săptămâni) sau între - 68 și - 86 °C (luni). Alicotele de testare se păstrează în timpul testelor la o temperatură de 4-10 °C. Nu se recomandă congelările și decongelările repetate. În cazul în care extrasele trebuie transportate, livrarea trebuie efectuată într-o geantă frigorifică în termen de 24 ore. 1.1
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
cazul în care este posibil, ar trebui să se folosească drept control similar pe aceeași lamă țesut infectat în mod natural (conservat prin liofilizare sau congelare la o temperatură între - 16 și - 24 °C). În calitate de control negativ, se pot folosi alicote de extracte de eșantioane care au dat rezultate negative la testele anterioare de detectare a R. solanacearum. Materialele de control pozitiv și negativ standardizate disponibile pentru acest test sunt prevăzute în apendicele 3. Se folosesc, pentru microscop, lame cu multe
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
ar trebui incluse în testul PCR: - Extractul eșantionului care a produs anterior rezultate negative pentru depistarea R. solanacearum; - Tampoanele de control utilizate pentru a extrage bacteria și ADN din eșantion; - Amestecul reactiv pentru PCR. Următoarele controale pozitive ar trebui incluse: - Alicote ale extractelor concentrate resuspendate la care s-a adăugat R. solanacearum (preparare: a se vedea apendicele 3 B). - Suspensie de 106 de celule pe ml dintr-un izolat virulent de R. solanacearum în apă (exemplu, NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de eșantioane proaspăt preparate, dar se pot folosi și extracte de eșantion conservate în soluție de glicerol la temperaturi cuprinse între - 16 °C și - 24 °C sau între - 68 °C și - 86 °C. Drept eșantioane de control negativ, se folosesc alicote de extracte de eșantion care au dat anterior rezultate negative la testele de identificare a R. solanacearum. Drept eșantioane de control pozitiv, se prepară suspensii conținând 105-106 de celule pe ml de biovar 2 R. solanacearum (de exemplu, sușa NCPPB
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
extract de eșantion care a dat anterior rezultate negative pentru R. solanacearum și o suspensie a unei bacterii care nu provoacă reacții încrucișate într-un tampon fosfat (PBS) ca eșantioane de control negativ. Drept eșantion de control pozitiv, se folosesc alicote de extracte de eșantion care au dat anterior rezultate negative, amestecate cu 103-104 de celule/ml de biovar 2 de R. solanacearum (de exemplu, sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; a se vedea apendicele 2 A și B). Pentru
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
disponibile pentru utilizare cu acest test sunt enumerate în apendicele 3 litera A. Materialul de control se testează în același mod ca și eșantioanele. Au fost validate două protocoale ELISA: (a) ELISA indirect (Robinson-Smith et al., 1995) (1) Se folosesc alicote de 100-200 μl de extract concentrat. (Se încălzește timp de patru minute la 100 °C în baie de abur sau într-un bloc de încălzire pentru a reduce rezultatele nespecifice în anumite cazuri). (2) Se adaugă un volum egal de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în baie de abur sau într-un bloc de încălzire pentru a reduce rezultatele nespecifice în anumite cazuri). (2) Se adaugă un volum egal de tampon dublu concentrat (apendicele 4) și se omogenizează în agitator. (3) Se aplică 100 μl alicote în fiecare dintre minimum două godeuri ale plăcii de microtitrare (de exemplu, Nunc-Polysorp sau echivalent) și se incubează o oră la 37 °C sau peste noapte la 4 °C. (4) Se scot extractele din godeuri. Se spală godeurile de trei
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
agitator. Se stabilesc niveluri decimale de contaminare continuând diluarea în următoarele cinci microfiole. Cele șase microfiole contaminate vor fi utilizate drept control pozitiv. Cele patru microfiole necontaminate se vor folosi în calitate de control negativ. Se etichetează microfiolele în consecință. Se prepară alicote de 100 μl în microfiole sterile de 1,5 ml pentru a obține nouă replici din fiecare eșantion de control. Se păstrează între - 16 și - 24 °C până la utilizare. Prezența și nivelul R. solanacearum în eșantioanele de control trebuie confirmate
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
corespunzător). Dacă, dintr-un motiv oarecare, congelarea începe înainte sau după intervalul de temperatură indicat, se oprește analiza și se reîncepe cu o altă probă de lapte. Dacă și noua probă se congelează înainte de temperatura indicată, se încălzește o fracțiune alicotă din laptele supus analizei la 45șC și se menține la această temperatură timp de cinci minute, pentru a permite topirea substanței grase cristaline. Se răcește apoi până la temperatura de testare și se trece imediat la o nouă analiză. Temperatura laptelui
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
pierderilor prin volatilizare, calcinarea nu poate fi utilizată ca tehnică de descompunere pentru dozajul mercurului. Prezența substanțelor organice volatile în soluția de măsurat poate conduce la obținerea unor false rezultate pozitive. Acest risc trebuie îndepărtat prin analizarea a două părți alicote ale fiecărei soluții eșantion, cu și fără tub umplut cu clorură de paladiu pe fibră de sticlă, plasat în fluxul gazos între soluție și celula de absorbție a detectorului. Dacă tubul de clorură de paladiu este conectat, nu trebuie să
jrc1579as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86720_a_87507]