1,957 matches
-
determine titrul pentru fiecare nou lot de anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai înaltă diluție la care se obține o reacție optimă, atunci când se testează o suspensie care conține între 105 și 106 celule pe mililitru, a unei sușe omoloage de C. m. ssp. sepedonicus folosind un conjugat adecvat de izotiocianat de fluoresceină (FITC), în conformitate cu recomandările producătorului. Soluția brută de anticorpi policlonali sau monoclonali trebuie să prezinte un titru de imunofluorescență de cel puțin 1:2 000. În momentul
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
g și resuspendare în aceeași cantitate de tampon de extract concentrat. Acest lucru este rareori necesar, în special atunci când proba este fixată de lamă prin flambare (a se vedea punctul 2.2). Se pregătesc lame martori pozitivi distincți ai unei sușe omoloage sau ai oricărei alte sușe de referință a C. m. ssp. sepedonicus într-o suspensie de extract de cartof, astfel cum se indică în apendicele 2 și, eventual, într-o soluție tampon. Ca martor similar pe aceeași lamă ar
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de tampon de extract concentrat. Acest lucru este rareori necesar, în special atunci când proba este fixată de lamă prin flambare (a se vedea punctul 2.2). Se pregătesc lame martori pozitivi distincți ai unei sușe omoloage sau ai oricărei alte sușe de referință a C. m. ssp. sepedonicus într-o suspensie de extract de cartof, astfel cum se indică în apendicele 2 și, eventual, într-o soluție tampon. Ca martor similar pe aceeași lamă ar trebui utilizat, în măsura posibilului, țesut
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
celulelor care prezintă o fluorescență vie și o morfologie caracteristică pentru C. m. ssp. sepedonicus (a se vedea site-ul web http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a sușei martor pozitiv pentru o diluție identică de anticorpi. Celulele a căror colorare este incompletă sau care prezintă o fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare. La cea mai mică suspiciune de contaminare, testul trebuie repetat. Acest lucru se poate întâmpla
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de probă care au dus în prealabil la un rezultat negativ, cu ocazia testelor de depistare a C. m. ssp. sepedonicus. Ca martori pozitivi se prepară suspensii care conțin între 105 și 106 celule/ml de C. m. ssp. sepedonicus (sușe NCPPB 4053 sau PD 406, de exemplu) într-o soluție tampon fosfatată la 0,01 M, pe baza unei culturi de trei până la cinci zile (a se vedea apendicele 2 pentru preparare). Se prepară lame martori pozitivi distincte ale sușei
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
sușe NCPPB 4053 sau PD 406, de exemplu) într-o soluție tampon fosfatată la 0,01 M, pe baza unei culturi de trei până la cinci zile (a se vedea apendicele 2 pentru preparare). Se prepară lame martori pozitivi distincte ale sușei omoloage sau ale oricărei alte sușe de referință de C. m. ssp. sepedonicus într-o suspensie de extract de cartof, astfel cum se indică în apendicele 2. Utilizarea unei oligosonde eubacteriene marcate cu izotiocianat de fluoresceină (FITC) permite controlarea procesului
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de exemplu) într-o soluție tampon fosfatată la 0,01 M, pe baza unei culturi de trei până la cinci zile (a se vedea apendicele 2 pentru preparare). Se prepară lame martori pozitivi distincte ale sușei omoloage sau ale oricărei alte sușe de referință de C. m. ssp. sepedonicus într-o suspensie de extract de cartof, astfel cum se indică în apendicele 2. Utilizarea unei oligosonde eubacteriene marcate cu izotiocianat de fluoresceină (FITC) permite controlarea procesului de hibridizare, colorând toate eubacteriile prezente
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
celulelor care prezintă o fluorescență vie și o morfologie caracteristică pentru C. m. ssp. sepedonicus (a se vedea site-ul web http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a sușei martor pozitiv sau superioară acesteia. Celulele a căror colorare este incompletă sau care prezintă o fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare. 5.3.3. La cea mai mică suspiciune de contaminare, testul trebuie repetat. Acest lucru se poate întâmpla
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se vedea secțiunea 10). 9. IDENTIFICARE Se identifică culturi pure de izolați presupuși de C. m. ssp. sepedonicus utilizând cel puțin două dintre testele prezentate în continuare, bazate pe principii biologice diferite. După caz, pentru fiecare test efectuat se includ sușe de referință cunoscute. 9.1. Teste de identificare de nutriție și enzimatice Se determină caracteristicile fenotipice menționate în continuare, care sunt în mod sistematic prezente sau absente la C. m. ssp. sepedonicus, în conformitate cu metodele lui Lelliott și Stead (1987), Klement
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
anonim (1987). Toate mediile trebuie să incubeze la 21 °C și să fie examinate după șase zile. În cazul în care nu se constată nici o multiplicare, se lasă la incubat până la 20 de zile. Fiecare test trebuie să includă o sușă cunoscută de C. m. ssp. sepedonicus ca martor. Testele de nutriție și cele fiziologice trebuie să fie efectuate pe un inoculat provenit de la repicări pe agar nutritiv. Comparațiile morfologice trebuie să se efectueze pe baza culturilor pe agar nutritiv cu
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1995; Mills et al., 1997; Pastrik și Rainey, 1999; Schaad et al., 1999). (d) Identificarea C. m. ssp. sepedonicus este pozitivă atunci când amplimerii PCR au aceeași dimensiune și prezintă aceleași polimorfisme de lungime a fragmentelor de restricție ca și pentru sușa martor pozitivă. 9.4. Test FISH (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru în apă ultrapură. (b) Se urmează procedura testului FISH (a se vedea secțiunea 5). (c) Testul FISH este pozitiv în cazul în care
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
cât și pentru a evalua virulența culturilor identificate ca fiind C. m. ssp. sepedonicus. 10.1. Se prepară un inoculum de aproximativ 106 celule/ml pe baza unei culturi de trei zile a izolatului care trebuie testat și a unei sușe martor pozitive corespunzătoare de C. m. ssp. sepedonicus. 10.2. Se inoculează 5-10 tulpini de plante tinere de pătlăgea vânătă în stadiul celei de-a treia frunze (a se vedea secțiunea 7.3 sau 7.4). 10.3. Se pun
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
la adresa http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main Apendicele 2 Prepararea martorilor pozitivi și negativi pentru aplicarea la conuri a testelor de depistare PCR/IF și FISH Se pune în cultură timp de 72 de ore o sușă virulentă de C. m. ssp. sepedonicus [NCPPB 4053 sau PD 406] pe un mediu de bază MTNA și se pune în suspensie într-un tampon fosfatat la 10 mM, astfel încât să se obțină o densitate celulară de aproximativ 1-2 x
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
bene: Testele preliminare trebuie să permită detectarea reproductibilă a cel puțin 103-104 celule de C. m. ssp. sepedonicus pe mililitru de extract de probă. De asemenea, testele preliminare nu trebuie să arate nici un fals rezultat pozitiv cu o gamă de sușe bacteriene selecționate. 1. Protocol PCR multiplex cu control PCR intern (Pastrik, 2000) 1.1. Oligonucleotide primeri Primer direct PSA-1 5' - ctc ctt gtg ggg tgg gaa aa - 3' Primer indirect PSA-R 5' - tac tga gat gtt tca ctt ccc c
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
întrucât: (1) Spania a informat celelalte state membre și Comisia că, în cadrul controalelor fitosanitare efectuate în 2003, s-au descoperit numeroase infestări ale fructelor citrice originare din Argentina sau Brazilia cu organisme dăunătoare, în special cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) și cu Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice). În plus, infestările fructelor citrice originare din Brazilia cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) au fost, de asemenea, raportate în 2003 de către
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
că, în cadrul controalelor fitosanitare efectuate în 2003, s-au descoperit numeroase infestări ale fructelor citrice originare din Argentina sau Brazilia cu organisme dăunătoare, în special cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) și cu Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice). În plus, infestările fructelor citrice originare din Brazilia cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) au fost, de asemenea, raportate în 2003 de către Țările de Jos și Regatul Unit. (2) Spania a luat
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
sau Brazilia cu organisme dăunătoare, în special cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) și cu Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice). În plus, infestările fructelor citrice originare din Brazilia cu Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) au fost, de asemenea, raportate în 2003 de către Țările de Jos și Regatul Unit. (2) Spania a luat măsuri de urgență oficiale interzicând importurile pe teritoriul său de fructe citrice originare din Argentina sau Brazilia de la
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
noiembrie 2004. Articolul 3 Între 1 mai și 30 noiembrie 2004, Comisia urmărește în mod continuu evoluția situației. În cazul în care devine evident că aceste măsuri de urgență nu sunt suficiente pentru a împiedica introducerea Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) sau a Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice) sau nu au fost respectate, Comisia ia măsuri mai severe sau măsuri alternative, în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 16 alineatul (3) din Directiva 2000/29/CE
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
2004, Comisia urmărește în mod continuu evoluția situației. În cazul în care devine evident că aceste măsuri de urgență nu sunt suficiente pentru a împiedica introducerea Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) sau a Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice) sau nu au fost respectate, Comisia ia măsuri mai severe sau măsuri alternative, în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 16 alineatul (3) din Directiva 2000/29/CE. Articolul 4 Spania adaptează până la 30 aprilie 2004 măsurile pe
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
alternative, în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 16 alineatul (3) din Directiva 2000/29/CE. Articolul 4 Spania adaptează până la 30 aprilie 2004 măsurile pe care le-a luat pentru a se proteja împotriva introducerii și răspândirii Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) și a Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice), astfel încât aceste măsuri să se conformeze articolelor 1 și 2 și informează de îndată Comisia cu privire la măsurile adaptate. Articolul 5 Prezenta decizie este reexaminată până la 31
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
Directiva 2000/29/CE. Articolul 4 Spania adaptează până la 30 aprilie 2004 măsurile pe care le-a luat pentru a se proteja împotriva introducerii și răspândirii Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) și a Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice), astfel încât aceste măsuri să se conformeze articolelor 1 și 2 și informează de îndată Comisia cu privire la măsurile adaptate. Articolul 5 Prezenta decizie este reexaminată până la 31 ianuarie 2005. Articolul 6 Prezenta decizie se adresează statelor membre
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
din Argentina sau Brazilia sunt însoțite de certificatul prevăzut la articolul 13 alineatul (1) din Directiva 2000/29/CE, care atestă oficial că: (a) fructele sunt originare dintr-o zonă recunoscută, care nu a fost afectată de Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice), în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 18 alineatul (2) din Directiva 2000/29/CE și menționată pe certificat, sau (b)- în conformitate cu un control oficial și regim de examinare, nu s-au observat simptome de Xanthomonas campestris (toate
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
fiind patogene pentru citrice), în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 18 alineatul (2) din Directiva 2000/29/CE și menționată pe certificat, sau (b)- în conformitate cu un control oficial și regim de examinare, nu s-au observat simptome de Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice) la locul de producție de la începutul ultimului ciclu de vegetație și - în conformitate cu un control oficial și un regim de examinare, care include un regim de testare corespunzător, fructele recoltate la locul de producție nu sunt afectate
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
la locul de producție de la începutul ultimului ciclu de vegetație și - în conformitate cu un control oficial și un regim de examinare, care include un regim de testare corespunzător, fructele recoltate la locul de producție nu sunt afectate de Xanthomonas campestris (toate sușele fiind patogene pentru citrice), și - fructele au fost supuse unui tratament, precum cel cu ortofenilfenat de sodiu și care a fost menționat pe certificat, și - locul de producție, instalațiile de ambalare, exportatorii și orice alt operator implicat în manipularea fructelor
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]
-
Argentina sau Brazilia sunt însoțite de certificatul prevăzut la articolul 13 alineatul (1) din Directiva 2000/29/CE, care atestă oficial că: (a) fructele sunt originare dintr-o zonă recunoscută, care nu a fost afectată de Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice), în conformitate cu procedura prevăzută la articolul 18 alineatul (2) din Directiva 2000/29/CE și menționată pe certificat, sau (b)- nu s-au observat simptome de Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele fiind patogene pentru citrice) la locul
32004D0416-ro () [Corola-website/Law/292391_a_293720]