1,112 matches
-
cu certitudine infirmata. Capitolul 7 Principii și aplicații ale testelor virusologice și evaluarea rezultatelor lor A. Detectarea antigenului viral 1. Un test sandwich ELISA indirect înlocuiește testul de fixare a complementului, ca metodă selectata pentru detectarea antigenului viral al bolii veziculoase a porcului. Testul este același că cel utilizat pentru diagnosticul febrei aftoase. Testele pentru cele două boli trebuie să fie efectuate în același timp, cu excepția cazului în care febră aftoasa a fost deja infirmata. Se recomandă în special probe de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
cel utilizat pentru diagnosticul febrei aftoase. Testele pentru cele două boli trebuie să fie efectuate în același timp, cu excepția cazului în care febră aftoasa a fost deja infirmata. Se recomandă în special probe de epiteliu sau de lichid din leziunile veziculoase, în care atât virusul bolii veziculoase a porcului, cât și cel al febrei aftoase pot fi prezente la titruri înalte la porcii cu infecție acută și care sunt detectați în câteva ore*1). 1) Rezultatele pozitive ELISA sunt asociate cu
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
Testele pentru cele două boli trebuie să fie efectuate în același timp, cu excepția cazului în care febră aftoasa a fost deja infirmata. Se recomandă în special probe de epiteliu sau de lichid din leziunile veziculoase, în care atât virusul bolii veziculoase a porcului, cât și cel al febrei aftoase pot fi prezente la titruri înalte la porcii cu infecție acută și care sunt detectați în câteva ore*1). 1) Rezultatele pozitive ELISA sunt asociate cu prezența a cel puțin 10 5
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
1). 1) Rezultatele pozitive ELISA sunt asociate cu prezența a cel puțin 10 5 TCID50 - doze infecțioase de cultură de țesut - de virus în probe. Rânduri duplicat din plăcile ELISA multigodeu sunt acoperite cu antiser de iepure contra virusului bolii veziculoase a porcului și pentru fiecare dintre cele 7 serotipuri ale virusului febrei aftoase. Acestea sunt seruri de blocare. Suspensii ale probei de testat se adaugă la fiecare godeu al celor două rânduri. Controale pozitive sunt de asemenea incluse. Ser de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
1 deasupra limitei de fond indică o reacție pozitivă. 2. Pot fi folosite sisteme alternative bazate pe anticorpi monoclonali, sisteme care selectează anticorpi monoclonali precum anticorpii de blocare și anticorpii peroxidazo-conjugati monoclonali că anticorpi de detecție, pentru detectarea antigenului bolii veziculoase a porcului și pentru diagnosticul diferențial de febră aftoasa în probele de epiteliu, lichid vezicular sau cultură de țesut infectat. 3. Poate fi folosit un sistem bazat pe anticorpi monoclonali pentru a se studia variația antigenica dintre tulpinile virusului bolii
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
a porcului și pentru diagnosticul diferențial de febră aftoasa în probele de epiteliu, lichid vezicular sau cultură de țesut infectat. 3. Poate fi folosit un sistem bazat pe anticorpi monoclonali pentru a se studia variația antigenica dintre tulpinile virusului bolii veziculoase a porcului. Antigenele virale crescute în tesutul-cultura sunt blocate de un antiser hiperimun de iepure contra bolii veziculoase a porcului, adsorbit de faza solidă. Secvențe corespunzătoare de anticorpi monoclonali reacționează și legarea anticorpilor monoclonali la tulpinile sălbatice este comparată cu
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
țesut infectat. 3. Poate fi folosit un sistem bazat pe anticorpi monoclonali pentru a se studia variația antigenica dintre tulpinile virusului bolii veziculoase a porcului. Antigenele virale crescute în tesutul-cultura sunt blocate de un antiser hiperimun de iepure contra bolii veziculoase a porcului, adsorbit de faza solidă. Secvențe corespunzătoare de anticorpi monoclonali reacționează și legarea anticorpilor monoclonali la tulpinile sălbatice este comparată cu legarea anticorpilor monoclonali la tulpinile parentale. O legatura similară indică prezenta epitopilor, împărțiți între tulpinile parentale și cele
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
la tulpinile parentale. O legatura similară indică prezenta epitopilor, împărțiți între tulpinile parentale și cele sălbatice. B. Izolarea și creșterea virusului 1. Că rutină, suspensii filtrate de probe de epiteliu, lichid vezicular sau fecale suspecte de a conține virusul bolii veziculoase a porcului trebuie să fie inoculate pe culturi de celule sensibile. Dacă cantitatea și calitatea probelor prelevate din leziuni și supuse examinării sunt insuficiente pentru examinarea imediată prin ELISA, este necesară creșterea de virus în cultura de țesut pentru a
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
IB-RS-2. Trebuie să fie utilizate două diluții de suspensie epiteliala, una de concentrație mare (1/500) și una de concentrație mică (1/10) pentru a evita interferență cu virusul crescut pe interferon, a cărui eliberare va interfera cu virusul bolii veziculoase a porcului. Pentru izolarea virusului sunt adăugate numai antibiotice, în vederea menținerii mediului. Pentru diagnosticul diferențial față de febră aftoasa trebuie, de asemenea, să fie inoculate celule tiroidiene primare de bovine sau celule renale de pui de hamster (BHK-21). 3. Dacă se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
orb. 5. Inocularea simultană a unei linii celulare porcine și a unuia dintre sistemele de cultură de țesut menționat mai sus - de preferat celule tiroidiene bovine primare - este un ghid util pentru a determina dacă probele veziculare conțin virusul bolii veziculoase a porcului sau virusul febrei aftoase care, ca și în primul sistem, se va dezvolta numai în celule de origine porcină. Totuși culturile de virus al febrei aftoase, cu o istorie îndelungată de transmitere între porci, pot, de asemenea, să
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
să se dezvolte, de preferință, în sistemele de culturi celulare de origine porcină. C. Reacția de polimerizare în lanț pentru depistarea genomului (PCR) 1. Metode de recunoaștere a acidului nucleic pot fi utilizate pentru a detecta genomul viral al bolii veziculoase a porcului în materialul clinic și care folosește tehnică PCR pentru a stabili legăturile dintre tulpinile de virus al bolii veziculoase a porcului, prin determinarea secvenței de nucleotide a unei părți de genom. Tehnici care folosesc PCR au fost perfectate
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
genomului (PCR) 1. Metode de recunoaștere a acidului nucleic pot fi utilizate pentru a detecta genomul viral al bolii veziculoase a porcului în materialul clinic și care folosește tehnică PCR pentru a stabili legăturile dintre tulpinile de virus al bolii veziculoase a porcului, prin determinarea secvenței de nucleotide a unei părți de genom. Tehnici care folosesc PCR au fost perfectate pentru a se îmbunătăți sensibilitatea diagnosticului. Au fost descrise proceduri de PCR-RT ușor diferite, folosind primeri care corespund unor regiuni intens
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
diferite, folosind primeri care corespund unor regiuni intens conservate din genele 1C și 1D ale genomului viral. 2. Tehnică PCR este rapidă - rezultatele sunt de obicei disponibile în 24 de ore - și se detectează toate genotipurile de virus al bolii veziculoase a porcului, fiind suficient de sensibilă pentru a se utiliza la prelevarea probelor de la cazurile suspecte clinic de boală. 3. Atunci când este suspectată infecția subclinica sau atunci când probele sunt colectate după dispariția bolii clinice ori când este necesara procesarea probelor
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
detectare cel puțin la fel de sensibil, dar considerabil mult mai rapid decât pasajul multiplu pe cultură de țesut. 4. Prin secventarea a aproximativ 200 de nucleotide din cadrul genei 1D care codifică proteină structurală majoră VP1 este posibilă gruparea tulpinilor virusului bolii veziculoase a porcului, conform omologiei lor de secvență, precum și a tulpinilor înrudite epidemiologic și care provoacă boli în regiuni diferite sau la perioade diferite. D. Evaluarea rezultatelor testelor virusologice 1. Detectarea de antigene sau de genom al virusului bolii veziculoase a
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
bolii veziculoase a porcului, conform omologiei lor de secvență, precum și a tulpinilor înrudite epidemiologic și care provoacă boli în regiuni diferite sau la perioade diferite. D. Evaluarea rezultatelor testelor virusologice 1. Detectarea de antigene sau de genom al virusului bolii veziculoase a porcului prin metodele ELISA sau PCR are aceeași valoare de diagnostic că și izolarea virusului. 2. Totuși izolarea virusului trebuie să fie considerată că test de referință și trebuie să fie utilizată că test de confirmare, daca este necesar
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
legatura epizootologica directă cu un focar confirmat. ... Capitolul 8 Principii și aplicații ale testelor serologice și evaluarea rezultatelor acestora A. Test de neutralizare a virusului (VN) 1. Microtestul cantitativ de virus neutralizare (VN) pentru detectarea anticorpilor induși de virusul bolii veziculoase a porcului este efectuat pe celule IB-RS-2 sau pe un sistem de celule echivalent, în plăci de microtitrare cu fundul lat din categoria cu cultura de țesut. 2. Virusul este crescut în monostraturi de celule IB-RS-2 și depozitat fie la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
fără glycerol. Serurile sunt inactivate înaintea testării la 56°C timp de 30 de minute. B. ELISA 1. Testul ELISA pentru detectarea anticorpilor este un test competitiv bazat pe anticorpi monoclonali. Dacă proba de ser conține anticorpi ai virusului bolii veziculoase a porcului, legătura unor anticorpi monoclonali selectați, conjugați cu peroxidaza, cu antigenul virusului bolii veziculoase a porcului va fi inhibata. În acest test ELISA antigenul viral al bolii veziculoase a porcului este blocat în faza solidă, folosindu-se anticorpi monoclonali
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
B. ELISA 1. Testul ELISA pentru detectarea anticorpilor este un test competitiv bazat pe anticorpi monoclonali. Dacă proba de ser conține anticorpi ai virusului bolii veziculoase a porcului, legătura unor anticorpi monoclonali selectați, conjugați cu peroxidaza, cu antigenul virusului bolii veziculoase a porcului va fi inhibata. În acest test ELISA antigenul viral al bolii veziculoase a porcului este blocat în faza solidă, folosindu-se anticorpi monoclonali, apoi probele de ser sunt incubate în diluție corespunzătoare, urmată de adăugarea anticorpului monoclonal conjugat
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
anticorpi monoclonali. Dacă proba de ser conține anticorpi ai virusului bolii veziculoase a porcului, legătura unor anticorpi monoclonali selectați, conjugați cu peroxidaza, cu antigenul virusului bolii veziculoase a porcului va fi inhibata. În acest test ELISA antigenul viral al bolii veziculoase a porcului este blocat în faza solidă, folosindu-se anticorpi monoclonali, apoi probele de ser sunt incubate în diluție corespunzătoare, urmată de adăugarea anticorpului monoclonal conjugat cu peroxidaza. Ulterior inhibiția legăturii anticorpului monoclonal cu antigenul bolii veziculoase a porcului este
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
viral al bolii veziculoase a porcului este blocat în faza solidă, folosindu-se anticorpi monoclonali, apoi probele de ser sunt incubate în diluție corespunzătoare, urmată de adăugarea anticorpului monoclonal conjugat cu peroxidaza. Ulterior inhibiția legăturii anticorpului monoclonal cu antigenul bolii veziculoase a porcului este măsurată prin intermediul unui substrat și al unui cromogen. 2. Un test ELISA indirect de blocare, care folosește anticorpi monoclonali izotipi specifici pentru a se detecta IgG sau IgM specifică porcului contra virusului bolii veziculoase a porcului, este
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
cu antigenul bolii veziculoase a porcului este măsurată prin intermediul unui substrat și al unui cromogen. 2. Un test ELISA indirect de blocare, care folosește anticorpi monoclonali izotipi specifici pentru a se detecta IgG sau IgM specifică porcului contra virusului bolii veziculoase a porcului, este util pentru evaluarea timpului de la infecția porcilor sau de la contaminarea spațiilor infectate. În cazul acestui test ELISA izotipul specific antigenului viral este blocat în faza solidă, folosindu-se un anticorp de captare a antigenului. Dacă proba de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
timpului de la infecția porcilor sau de la contaminarea spațiilor infectate. În cazul acestui test ELISA izotipul specific antigenului viral este blocat în faza solidă, folosindu-se un anticorp de captare a antigenului. Dacă proba de ser conține anticorpi pentru virusul bolii veziculoase a porcului, aceștia sunt detectați folosindu-se o IgG antiporc sau o IgM antiporc monoclonal conjugat cu peroxidaza. Ulterior această legătură este măsurată prin intermediul unui substrat și al unui cromogen. Testul ELISA izotip specific poate fi util, de asemenea, pentru
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
zile și necesită facilități pentru culturi celulare. Testul ELISA este mult mai rapid și poate fi mult mai ușor standardizat. Testul ELISA de competiție cu anticorpi monoclonali este cel mai fiabil. Testul ELISA descris până în prezent, utilizând anticorpi ai bolii veziculoase a porcului, este recomandat ca test de screening pentru un număr mare de probe. Totuși testul de VN trebuie să fie utilizat că test de confirmare, daca este necesar, în special după prima detectare de probe pozitive într-o exploatație
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
reactanții unici au, în general, următorul profil: titrul anticorpilor scăzut la testul de VN, linia de graniță pozitivă la testul ELISA de competiție pe bază de anticorpi monoclonali, nici o IgM și nici o IgG la testul ELISA izotip specific pentru boala veziculoasa a porcului*3). ... Capitolul 9 Semne clinice și particularități ale bolii veziculoase a porcului 1. Boală veziculoasa a porcului este o boală contagioasă a porcilor, produsă de un enterovirus din familia Picornaviridae care poate evolua sub forma veziculoasa subclinica, ușoară
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
de VN, linia de graniță pozitivă la testul ELISA de competiție pe bază de anticorpi monoclonali, nici o IgM și nici o IgG la testul ELISA izotip specific pentru boala veziculoasa a porcului*3). ... Capitolul 9 Semne clinice și particularități ale bolii veziculoase a porcului 1. Boală veziculoasa a porcului este o boală contagioasă a porcilor, produsă de un enterovirus din familia Picornaviridae care poate evolua sub forma veziculoasa subclinica, ușoară sau severă, ce depinde de tulpina de virus implicată, de calea și
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]