9,837 matches
-
exemple: screening-ul citologic sau screening-ul virusologic, detecția ADN HPV etc.). Progresele recente în vaccinologie au condus la numeroase noi strategii de imunizare în scop preventiv sau terapeutic. Noi vaccinuri experimentale se adresează bolilor cu semnificație majoră pentru sănătatea publică: meningoencefalitele virale, noi viroze respiratorii, digestive, infecția HIV/SIDA etc. Vaccinurile candidate cu șanse de a fi introduse în practica curentă pot fi găsite la www.iavireport.org/trialsdb. Rezumând discuția la vaccinurile care și-au demonstrat eficiența și inocuitatea există 10
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
reactive va face și mai dificilă interpretarea frotiurilor Pap. În acest context, screening-ul inițial pentru ADN HPV are toate atributele de sensibilitate și specificitate pentru a fi recomandat ca test primar de screening. Posibilitatea genotipării și, eventual, a determinării încărcării virale va crește valoarea informațiilor furnizate clinicianului. În plus screening-ul HPV va permite lărgirea intervalului între examinări (5-6 ani) fără risc pentru creșterea proporției de leziuni decelate/tratate tardiv. Vaccinarea poate induce și o rată sporită de refuz al screening-ului. Recunoașterea
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
să aibă un anumit efect terapeutic. Includerea proteinei minore L2 și a oncoproteinelor E6/7 între imunogeni reprezintă soluțiile urmărite în prezent. Strategiile de administrare a acestor imunogeni sunt: vaccinuri subunitare (proteine/peptide sintetice), vaccinuri ADN, vaccinuri vector pe platforme virale sau bacteriene. Deși considerate un succes important al biotehnologiei, vaccinurile actuale ridică o serie de rezerve legate de costul excesiv, dependența de menținerea lanțului de frig în distribuție, administrarea parenterală și durata prognozat limitată a imunității induse mai ales, la
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
protecție heterologă; - să fie ieftine, stabile în timp și administrabile noninjectabil; - să aibe și aplicații terapeutice. Progresele în biologia moleculară și imunologie promit optimizarea performanțelor de siguranță și imunogenitate ale vaccinurilor. Între noile procedee de obținere menționăm: vaccinurile subunitare (peptide virale), antigene vectorizate de microorganisme modificate genetic, antigene produse de plante transgenice sau vaccinuri ADN. Fiecare procedeu trebuie însoțit de dezvoltarea unor kituri adecvate de diagnostic pentru evaluarea eficienței vaccinării (Dormitzer PR și colab., 2008). Alternative în studiu pentru vaccinuri HPV
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
bacterii sau virusuri recombinate, - Vaccinuri ADN. Posibilitatea îndeplinirii acestor deziderate poate fi evaluată din recapitularea imunobiologiei infecției HPV naturale. Populația de anticorpi rezultată în urma infecției HPV naturale este policlonală și heterogenă, recunoscând o diversitate de epitopi prezenți la suprafața capsidei virale dar și epitopi ai proteinelor timpurii reglatorii. Vaccinurile HPV alcătuite din VLP conțin imunogeni expuși exclusiv de proteina capsidară majoră L1. Există deci diferențe calitative și cantitative între răspunsul imun postvaccinare și răspunsul după infecția naturală. Afinitatea anticorpilor induși de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
acțiunii lor este datorat furnizării de semnale suplimentare, costimulatorii, limfocitelor imunocompetente. Foarte sumar, răspunsul imun consecutiv infecției HPV naturale depinde de sinergia a trei semnale (Fausch S.C. și colab., 2003): - activarea limfocitelor T helper care sunt stimulate de recunoașterea antigenelor virale de către TCR (receptorii celulelor T) - primul semnal; - activarea celulelor prezentatoare de antigen (macrofage dendritice, celulele Langerhans) stimulate de recunoașterea structurilor nonself prin TLR (Toll-like receptors) - al doilea semnal; - sinteza de citokine proinflamatorii - al treilea semnal (De Rosa S.C. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
adjuvanți. Adjuvanții aprobați și în Uniunea Europeană sunt alaunul și MF59 care scad doza necesară pentru obținerea titrurilor seroprotectoare și lărgesc și spectrul de protecție. În infecția HPV nu există viremie, conflictul virus-gazdă rezolvându-se la nivelul mucoaselor sau epidermului. Replicarea virală este intraepitelială și noncitocidă iar virionii progeni sunt eliberați odată cu descuamarea keratinocitelor superficiale, fără a veni în contact cu ganglionii locoregionali unde se edifică răspunsul imun. Altfel stau lucrurile în vaccinare. Vaccinurile HPV se administrează intramuscular iar imunogenii - VLP = virus-like
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
mult mai lungi decât în cazul VLP himeră. S-au sintetizat capsomere care conțin întreaga secvență a proteinelor L1, E6 și E7 cu imunogenitate remarcabilă (Fligge C. și colab., 2001). Studii recente au revăzut semnificația terapeutică a imunizării anti oncoproteine virale susținând că anticorpii anti-E2 au mai mare relevanță pentru eradicarea infecției HPV. VACCINURI HPV L2 Proteina capsidară minoră L2 conține epitopi liniari subdominanți dar care au un spectru de reactivitate extins pentru mai multe tipuri HPV (Kirnbauer R. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
anticorpi secretori IgA (S-IgA) care fixează virusul la poarta de intrare în complexe imune ce pot fi lesne eliminate. Datorită naturii polimerice a S-IgA, complexele imune de la nivelul mucoasei pot fixa un număr mai mare de variante antigenice virale. Sinteza accelerată de novo a IgA și IgG datorată limfocitelor B de memorie care debutează timpuriu, începând din ziua a 4-a după reinfecție. Persistența limfocitelor T CD8 de memorie care proliferează clonal încă din ziua a 3-a după
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
de IgG inferioare cu un logaritm celor obținute după injecția intramusculară dar acest lucru este compensat de sinteza locală a anticorpilor secretori. Cantitatea mare de imunogen necesară administrării enterale poate fi obținută prin utilizarea unor antigene enterobacteriene recombinate cu gene virale sau prin folosirea plantelor sau levurilor genetic modificate. În plus, administrarea enterică nu necesită procedee neeconomice de purificare a VLP. Varsard A. și colab., 2003 au demonstrat expresia proteinei L1 HPV 16 în Nicotiana tabacum, iar Warzecha H. și colab
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
induse. Datorită imunogenității slabe a ADN neprotejat (naked ADN) s-a apelat la diferite procedee de corecție: încapsularea în particule biodegradabile ZYC 101 (Garcia și colab., 2004), coadministrarea cu celule dendritice autologe, coadministrarea cu citokine sau cu alți adjuvanți. VECTORI VIRALI Vaccinurile cu vectori virali au avantajul de a fi înalt imunogene și de a induce și un oarecare răspuns heterolog. Rezervele în raport cu această soluție sunt imunitatea preexistentă a gazdei pentru vector (adenovirus sau virus vaccinal) și reacțiile adverse. Mai multe
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
a ADN neprotejat (naked ADN) s-a apelat la diferite procedee de corecție: încapsularea în particule biodegradabile ZYC 101 (Garcia și colab., 2004), coadministrarea cu celule dendritice autologe, coadministrarea cu citokine sau cu alți adjuvanți. VECTORI VIRALI Vaccinurile cu vectori virali au avantajul de a fi înalt imunogene și de a induce și un oarecare răspuns heterolog. Rezervele în raport cu această soluție sunt imunitatea preexistentă a gazdei pentru vector (adenovirus sau virus vaccinal) și reacțiile adverse. Mai multe studii preclinice au arătat
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
de Salmonella împreună cu bacilul Calmette-Guerin (Mycobacterium bovis) este o soluție de vaccin terapeutic care induce un răspuns imun celular citotoxic puternic (Jabbar și colab., 2000). O altă strategie a utilizării ADN HPV pentru producția de vaccin este construcția unui vector viral sau bacterian care să exprime și proteine himeră. Sistemul obține antigene himeră care induc răspuns imun puternic, humoral și celular, la animalele de experiență. Grefarea epitopilor străini are anumite limite în termenii mărimii (80 aminoacizi) și naturii epitopilor exprimați căci
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
proteine himeră. Sistemul obține antigene himeră care induc răspuns imun puternic, humoral și celular, la animalele de experiență. Grefarea epitopilor străini are anumite limite în termenii mărimii (80 aminoacizi) și naturii epitopilor exprimați căci proteinele himeră pot afecta viabilitatea recombinanților virali. Chiar dacă aceste vaccinuri nu previn evoluția cancerului, ele atenuează simptomatologia. În concluzie, vaccinurile de generația a 2-a constituie opțiunea pentru decada următoare, opțiune care va permite inducția unui răspuns heterolog sau/și cu proprietăți terapeutice în cancerul de col
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
reactive va face și mai dificilă interpretarea frotiurilor Pap. În acest context, screening-ul inițial pentru ADN HPV are toate atributele de sensibilitate și specificitate pentru a fi recomandat ca test primar de screening. Posibilitatea genotipării și, eventual, a determinării încărcării virale va crește valoarea informațiilor furnizate clinicianului. În plus, screening-ul HPV va permite lărgirea intervalului între examinări (5-6 ani) fără risc pentru creșterea proporției de leziuni decelate/tratate tardiv. Rezultatele excelente raportate de evaluarea eficienței celor două vaccinuri comercializate în prezent
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
un sistem intern de control de calitate și să fie verificate periodic de controale externe de calitate. Pentru aceste deziderate, laboratoarele trebuie să funcționeze cu îndeplinirea următoarelor condiții: Infrastructură (spații separate) și aparatură corespunzătoare pentru extracția, amplificarea și detecția ADN viral; Acreditare pentru proceduri de biologie moleculară, protocoale (SOP - standard operation procedures) și aplicarea cerințelor GLP (good laboratory practice); Sistem de monitorizare a performanțelor prin evaluări periodice cu paneluri de probe, disponibile la nivel național. În practică, laboratoarele care procesează un
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
sunt mai performante decât laboratoarele mici (Arbyn M. și colab., 2006). Acreditările periodice pot conduce și la rezultate negative însă este important ca panelurile de probe utilizate să fie corespunzătoare. Multe rezultate diferite între laboratoare se datoresc probelor cu încărcare virală mică. Acestea provin de la infecții HPV tranzitorii care nu au potențial oncogen și nici relevanță clinică. Pentru evaluarea vaccinării criteriul final primar considerat este leziunea CIN 3 și nu CIN 2. Este din ce în ce mai acceptată opinia că leziunile CIN 2 reprezintă
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
exemplu, nivelul de expresie a oncoproteinelor E6/E7. SUPRAVEGHEREA EFICIENȚEI VACCINĂRII Deși scopul vaccinării HPV este prevenirea cancerului de col și a leziunilor precanceroase, acest efect nu va putea fi remarcat decât după 10-20 ani, datorită evoluției îndelungate a carcinogenezei viral induse (Snijders P.J. și colab., 2006). Criteriul final secundar de supraveghere post-vaccinare este prevenirea infecției persistente cu genotipurile din vaccin. Este criteriul care poate fi verificat cel mai devreme, cu teste obiective, standardizate și reproductibile. Diagnosticul infecției persistente înseamnă detecția
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
este de 84%, iar între HC2 și AMP între 84,4-85,9% (Stevens M.P. și colab., 2007). Automatizarea cu ajutorul unei platforme BeeBlot™ a demonstrat fiabilitatea kit-urilor Roche crescând viteza și reproductibilitatea determinărilor (Stevens M.P., și colab., 2008). Amplificarea ADN viral se realizează în cicluri multiple de denaturare-amorsare-elongare în cunoscutele mașini numite termocycleri. Noile mașini LightCycler™ combină amplificarea simultană a mai multor specii de ADN viral cu analiza datelor de kinetică. LightCycler™ utilizează aerul ca mediu pentru controlul temperaturii reducând semnificativ
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
kit-urilor Roche crescând viteza și reproductibilitatea determinărilor (Stevens M.P., și colab., 2008). Amplificarea ADN viral se realizează în cicluri multiple de denaturare-amorsare-elongare în cunoscutele mașini numite termocycleri. Noile mașini LightCycler™ combină amplificarea simultană a mai multor specii de ADN viral cu analiza datelor de kinetică. LightCycler™ utilizează aerul ca mediu pentru controlul temperaturii reducând semnificativ timpul de testare (obișnuit, 40 cicluri în 25 minute). Folosirea unor capilare fine de borosilicat ca vase de reacție permite transferul eficient al căldurii. Modificările
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
teste Roche (AMP și LA) sunt relativ ușor de utilizat și oferă o metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
ușor de utilizat și oferă o metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite de risc oncogen. Rezultate reproductibile au fost publicate în privința corelației încărcării virale pentru HPV 16
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană a infecției cu alte genotipuri, chiar lipsite de risc oncogen. Rezultate reproductibile au fost publicate în privința corelației încărcării virale pentru HPV 16 (nu și pentru alte genotipuri) și prezența sau progresia leziunilor CIN2/3. Determinarea semicantitativă a încărcării virale se poate face cu metoda HC2 dar sunt metode mai sensibile, precum real-time PCR multiplex care dau rezultate de o
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]