2,365 matches
-
induce proliferarea celulară, imortalizarea și transformarea prin cuplarea cu antioncogena celulară pRb; L1 - proteina capsidară majoră, autoagregă formând particule virus like (VLP); L2 - proteina capsidară minoră: este probabil implicată în împachetarea ADN și posedă epitopi comuni între mai multe genotipuri . Genomul viral este alcătuit din 8 ORF (open reading frames) majore. Numai una dintre cele două catene ADN ale genomului papilomavirusurilor este transcrisă (Munger K., și colab., 2004). În tipurile HPV de risc crescut, transcrierea începe de la doi promotori virali: unul
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
virus like (VLP); L2 - proteina capsidară minoră: este probabil implicată în împachetarea ADN și posedă epitopi comuni între mai multe genotipuri . Genomul viral este alcătuit din 8 ORF (open reading frames) majore. Numai una dintre cele două catene ADN ale genomului papilomavirusurilor este transcrisă (Munger K., și colab., 2004). În tipurile HPV de risc crescut, transcrierea începe de la doi promotori virali: unul care inițiază în amonte de ORF E6 - codifică proteinele virale timpurii și altul exprimat înainte de a realiza replicarea productivă
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
scuamos. Dezorganizarea arhitecturală și mitozele atipice sunt semne certe ale malignizării. PATOGENIA LEZIUNILOR MALIGNE Replicarea HPV este corelată cu procesul de diferențiere celulară, de keratinizare. Numai epiteliul bazal este susceptibil la infecție. În celulele bazale replicarea este non productivă, iar genomul viral persistă în copii puține (una per celulă) episomal. În epiteliul suprabazal replicarea este productivă și numărul de copii se amplifică. Proteinele E6 și E7 dereglează ciclul de creștere celular prin legarea și inactivarea antioncogenelor (p53 și pRb), a ciclinelor
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
fie ca un element extracromozomial (episomal), fie prin integrarea în ADN-ul gazdei, ca o singură copie sau mai multe copii repetate în tandem, în mai multe situri cromozomiale fragile. Proteinele E1 și E2 sunt necesare pentru replicarea episomală a genomului HPV în keratinocitele umane. Replicarea episomală a HPV 31 în keratinocite este controlată de nivelul E1 și E2, iar creșterea expresiei lor conduce la creșterea numărului de copii genomice HPV 31 per celulă. Într-un studiu publicat online (www.genome
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
creșterea numărului de copii genomice HPV 31 per celulă. Într-un studiu publicat online (www.genome.org), cercetători spanioli au cartografiat modificările ADN în cazul a trei virusuri oncogene (virusul Epstein-Barr, virusul hepatitei B și HPV) și au găsit că genomul viral suferă modificări în cursul progresiei carcinogenezei (Fernandez A.F. și colab., 2009). Aceste modificări sunt mai evidente la nivel epigenomic, aspect care poate fi studiat prin studiul metilomului ADN. ADN-ul acestor virusuri evoluează de la o stare nemetilată întâlnită
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
col uterin sunt: - persistența infecției cu HPV hr peste 10 ani. Dacă vârful prevalenței infecției HPV este la 25 ani, vârful incidenței cancerului de col uterin este la 35 ani. - imunosupresia (exemplu, asocierea infecției HIV); - anticoncepționale (progesteron) administrate prelungit. În genomul viral (regiunea LCR) sunt elemente care răspund la corticoizi; - numărul mare de sarcini; - fumatul prin efectele imunosupresoare și mutagene; - coinfecția cu alte virusuri transmise sexual (herpesvirusuri: HSV2, HHV 6, CMV) sau cu multiple genotipuri HPV oncogene și nononcogene; - încărcarea virală
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
virali poate fi explicat și prin faptul că ciclul de viață al HPV nu este litic și deci nu induce semnale pro-inflamatorii care să activeze celulele dendritice, ci induce doar persistența în micromediul local. În afara proteinelor capsidare L1 și L2, genomul HPV codifică mai multe proteine timpurii (E1, E2, E4, E5, E6, și E7) care reglează replicarea virală și interacționează cu genomul celulei gazdă. Imortalizarea și transformarea celulelor infectate sunt asociate cu proteinele E6 și E7 ale tipurilor HPV înalt oncogene
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
pro-inflamatorii care să activeze celulele dendritice, ci induce doar persistența în micromediul local. În afara proteinelor capsidare L1 și L2, genomul HPV codifică mai multe proteine timpurii (E1, E2, E4, E5, E6, și E7) care reglează replicarea virală și interacționează cu genomul celulei gazdă. Imortalizarea și transformarea celulelor infectate sunt asociate cu proteinele E6 și E7 ale tipurilor HPV înalt oncogene. Acestea sunt oncoproteine care interacționează cu reglarea ciclului celular, induc anomalii cromozomiale și blochează apoptoza. DIFERENȚE ÎNTRE MECANISMELE DE EVAZIUNE IMUNĂ
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
profilactice HPV care conțin proteina capsidară majoră L1 asamblată în VLP (virus-like particles). Vaccinurile sunt produse prin expresia genelor L1 în celule prokariote (Gardasil®) sau eukaryote (Cervarix®). Aceste proteine se asamblează în VLP care sunt capside virale goale, lipsite de genomul viral. Cele două vaccinuri comerciale sunt: Gardasil® - vaccin tetravalent; protejează împotriva genotipurilor HPV6/11/16/18. Vaccinul recombinant tetravalent produs de Merck Sharp & Dohme (MSD) poate preveni cancerul de col uterin, leziunile precanceroase, verucile genitale și alte afecțiuni cauzate de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
din cele două principii de detecție ADN HPV: - amplificarea țintei - tehnici de tip PCR; - amplificarea semnalului - tehnici de hibridizare - HC2. PCR este tehnica cea mai sensibilă și permite atât detecția cât și genotiparea. Cele mai multe perechi de primeri vizează porțiuni din genom care codifică proteina capsidară L1. Sensibilitatea testelor PCR este superioară celor de tip hibridizare dar depinde de caracteristicile populației investigate (tabelul 34). TEHNICI DE HIBRIDARE Testul comercializat pentru această metodă este HPV Hybrid Capture®2 [HC2] High Risk Test, Digene
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
relativ ușor de utilizat și oferă o metodă rapidă, standardizată pentru detecția și genotiparea ADN HPV. Ele sunt utile în studiile epidemiologice pentru evaluarea eficienței vaccinării. Identificarea genotipului ar trebui completată cu determinarea încărcării virale, a statusului de integrare a genomului viral și a ARNm pentru oncoproteinele virale ceea ce ar ameliora informația oferită clinicianului, încă dependent de interpretarea citologiei clasice. Determinarea încărcării virale ar putea, teoretic, indica un risc oncogen proporțional cu doza. Tehnica este complexă și interferată de prezența simultană
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
numai prima a fost validată clinic: - detecția ADN HPV prin o tehnică rapidă de tip imunochimic (Qiagen Fast DNA HPV); - detecția proteinei E6 printr-o metodă de tip dot blot (Strip Line E6). Testul Qiagen Fast DNA HPV detectează rapid genomul HPV printr-o reacție imunoenzimatică în godeuri care poate fi citită după numai 2,5 ore. Testul poate fi executat pe probe autorecoltate și se pretează automatizării. Metoda este comparabilă ca sensibilitate și specificitate cu HC 2. SCREENING-ul DUBLU
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
indubitabil participarea infecției persistente cu genotipurile HPV cu risc oncogen înalt în neoplaziile anogenitale au fost aduse de studii asupra bolnavelor cu cancer de col. Într-o serie de peste 1000 de cazuri, Munoz N., și colab., 2004, au detectat prezența genomului HPV 16 sau 18 în tumori în proporție de 99,7%. Într-un studiu sponsorizat de International Agency for Research on Cancer (IARC), Lyon, France, 2005, în 22 țări, riscul pentru cancer de col asociat infecției persistente HPV a fost
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
inconstant anti-HPV31 [54,5% (95% CI: 11,5-77,7%)] (Harper D. și colab., 2006). Un aspect complementar este posibilitatea selecției unor variante care eludează răspunsul imun chiar dintre genotipurile incluse în vaccin (escape mutants). Datorită stabilității replicative a virusurilor cu genom ADN apariția mutantelor era teoretic puțin probabilă și nu a fost argumentată nici practic, după secvențierea izolatelor HPV 16 provenind din mai multe areale geografice. Gardasil este un vaccin tetravalent recombinant non-infecțios preparat din particule asemănătoare virusului. Vaccinul este tetravalent
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
Saccharomyces cerevisiae) și ele au proprietatea de a se autoasambla în particule asemănătoare virusului (VLP - virus like particles). Vaccinul este noninfecțios în sensul că nu poate produce bolile împotriva căruia este destinat ci asigură protecție împotriva lor. VLP nu conțin genomul viral, nu pot infecta celulele susceptibile. HPV infectează numai oamenii și primatele hominoide, demonstrând spectrul restrâns de gazdă al acestor virusuri. Același lucru s-a constatat pentru papilomavirusurile animale. Conceptul utilizării unor vaccinuri împotriva infecției cu papilomavirusuri ca mijloc de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
funcționale a E7 și E6 de la genotipurile din vaccin de aceleași proteine ale altor genotipuri oncogene sau chiar neoncogene. Proteina virală timpurie E6 este activă în oncogeneză prin blocarea genei celulare pentru antioncoproteina p53 (tumour-suppressor protein). P53 este paznicul integrității genomului celular. În multe cancere p53 este anihilat funcțional dar căile sale de acțiune rămân intacte și pot fi resuscitate (fig. 1). Funcția nealterată a p53 face celula capabilă să răspundă la leziunile genomice provocate de carcinogeni distincți: radiații, carcinogeni chimici
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
în etiologia unor cancere genitale (mai ales de col uterin) și oro-laringiene. Infecții neproductive asociate numai cu expresia unor gene virale timpurii caracterizează celulele transformate cu aceste virusuri. Virionii HPV, icosaedrici, neanvelopați au dimensii mici (55 nm) și sunt termorezistenți. Genomul este ADN ds, circular și conține 8 cadre de citire. Receptorul HPV este integrina alfa 6. Situl de transcriere este în nucleu. Replicarea este trifazică: a) prima amplificare (în stratul bazal), b) replicarea de menținere și c) a 2-a
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
Cu toate acestea, infecția HPV nu este o boală sexual transmisă (BST) raportabilă. Date actuale susțin existența a mai mult de 100 tipuri de papilomavirusuri umane (Howley PM și colab., 2004) dar numai 15-18 sunt considerate cu potențial oncogen înalt. Genomurile a aproximativ 100 tipuri HPV au fost izolate și complet secvențiate, iar observații indirecte (adesea obținute prin PCR) susțin existența și a altor tipuri sau variante HPV. Papilomavirusurile umane și animale infectează epiteliul bazal al dermului sau mucoaselor, de unde dihotomia
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
risk - HPVlr), cu risc înalt (high risk - HPVhr) și cu risc nedeterminat. În grupul cu risc crescut sunt incluse și unele genotipuri care sunt rar întâlnite în cancere, dar sunt decelate adeseori în leziuni precursoare (SIL - squamous intraepithelial lesions). STRUCTURA GENOMULUI HPV Papilomavirusurile umane sunt virusuri neanvelopate cu capside icosaedrice care își replică genomul în nucleii celulelor gazdă infectate (Longworth M.S. și Laimins L.A., 2004). Genomul este ADN dublu catenar circular, covalent închis, de aproximativ 7500-8000 pb cu greutatea moleculară de
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
grupul cu risc crescut sunt incluse și unele genotipuri care sunt rar întâlnite în cancere, dar sunt decelate adeseori în leziuni precursoare (SIL - squamous intraepithelial lesions). STRUCTURA GENOMULUI HPV Papilomavirusurile umane sunt virusuri neanvelopate cu capside icosaedrice care își replică genomul în nucleii celulelor gazdă infectate (Longworth M.S. și Laimins L.A., 2004). Genomul este ADN dublu catenar circular, covalent închis, de aproximativ 7500-8000 pb cu greutatea moleculară de 4950-5280 kDa. Genomul este complexat de histonele celulare (Pfister H. și Fuchs P.G.
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
întâlnite în cancere, dar sunt decelate adeseori în leziuni precursoare (SIL - squamous intraepithelial lesions). STRUCTURA GENOMULUI HPV Papilomavirusurile umane sunt virusuri neanvelopate cu capside icosaedrice care își replică genomul în nucleii celulelor gazdă infectate (Longworth M.S. și Laimins L.A., 2004). Genomul este ADN dublu catenar circular, covalent închis, de aproximativ 7500-8000 pb cu greutatea moleculară de 4950-5280 kDa. Genomul este complexat de histonele celulare (Pfister H. și Fuchs P.G., 1994). Proteinele capsidare ale virusului sunt sintetizate în citoplasmă, apoi transferate în
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
umane sunt virusuri neanvelopate cu capside icosaedrice care își replică genomul în nucleii celulelor gazdă infectate (Longworth M.S. și Laimins L.A., 2004). Genomul este ADN dublu catenar circular, covalent închis, de aproximativ 7500-8000 pb cu greutatea moleculară de 4950-5280 kDa. Genomul este complexat de histonele celulare (Pfister H. și Fuchs P.G., 1994). Proteinele capsidare ale virusului sunt sintetizate în citoplasmă, apoi transferate în nucleu, unde asamblează minicromozomul viral (genomul) într-o particulă sferică. Studii recente au stabilit că cele 72 capsomere
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
covalent închis, de aproximativ 7500-8000 pb cu greutatea moleculară de 4950-5280 kDa. Genomul este complexat de histonele celulare (Pfister H. și Fuchs P.G., 1994). Proteinele capsidare ale virusului sunt sintetizate în citoplasmă, apoi transferate în nucleu, unde asamblează minicromozomul viral (genomul) într-o particulă sferică. Studii recente au stabilit că cele 72 capsomere sunt identice (pentameri) și se autoasamblează. Autoasamblarea este dictată de structura proteică tridimensională care permite interacțiuni adaptabile între componente (Elbasha EH. și colab., 2007). Genomul ADN al tuturor
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
asamblează minicromozomul viral (genomul) într-o particulă sferică. Studii recente au stabilit că cele 72 capsomere sunt identice (pentameri) și se autoasamblează. Autoasamblarea este dictată de structura proteică tridimensională care permite interacțiuni adaptabile între componente (Elbasha EH. și colab., 2007). Genomul ADN al tuturor papilomavirusurilor poate fi divizat în trei segmente de mărimi diferite (IARC Working Group, 1995) (fig. 5): 1 - regiunea noncodantă -LCR- Long Control Region numită și URR- Upstream Regulatory Region sau NCR - Non Coding Region reprezintă 10% din
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]
-
ADN al tuturor papilomavirusurilor poate fi divizat în trei segmente de mărimi diferite (IARC Working Group, 1995) (fig. 5): 1 - regiunea noncodantă -LCR- Long Control Region numită și URR- Upstream Regulatory Region sau NCR - Non Coding Region reprezintă 10% din genom. Această regiune conține secvențe reglatorii (promoter, enhancer, silencer etc.) pentru controlul expresiei genelor virale și are cea mai mare variabilitate. LCR conține elemente de „stimulare” (enhancer) care pot fi activate de factori celulari sau virali cu o anumită specificitate. Cu
Vaccinarea în cancerul de col uterin by Costin Cernescu () [Corola-publishinghouse/Science/92273_a_92768]