9,927 matches
-
Monica Bodea și colab., 2009). Studii și experimentări de analiză genetică au fost efectuate și la INCDBH Ștefănești (Carmen Popescu și colab., 2010) în scopul evaluării diversității fondului de gene al soiurilor autohtone de viță de vie, prin utilizarea markerilor moleculari și fenotipici. 3.2.2. METODE GENETICE DE INVESTIGARE A SOIURILOR DE VIȚĂ DE VIE. Identificarea soiurilor în primele stadii de dezvoltare este greu de realizat, deoarece plantațiile tinere nu posedă toate caracterele morfologice tipice unei plantații adulte. De asemenea
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
soi pot apărea diferențe considerabile de fenotip deși par să aibă unele "amprente" mai mult sau mai puțin identice din punct de vedere morfologic (Franks ș.a., 2002; Riaz ș.a., 2002). Pentru depășirea acestor limite, în ultimul timp, odată cu apariția markerilor moleculari, diferențierea și identificarea cultivarelor de viță de vie s-a realizat atât la nivel de proteine cu ajutorul izoenzimelor, dar mai ales la nivel de ADN utilizând mai multe metode. 3.2.1.1. Amprenta aminoacizilor liberi. Bazele teoretice. Aminoacizii se
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
în cercetările pornind de la originea soiurilor atât la plantele cultivate cât și la vița de vie. O etapă superioară în identificarea originii genetice a soiurilor a constituit-o analiza genomului la nivel ADN ca urmare a progreselor înregistrate în biologia moleculară (markeri moleculari). Metodele clasice care au la bază caracterele fenotipice nu sunt suficiente să rezolve aceste probleme, ca urmare a instabilității caracterelor morfologice sub influența factorilor de mediu, precum și a faptului că în identificarea plantelor tinere informațiile nu pot fi
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
pornind de la originea soiurilor atât la plantele cultivate cât și la vița de vie. O etapă superioară în identificarea originii genetice a soiurilor a constituit-o analiza genomului la nivel ADN ca urmare a progreselor înregistrate în biologia moleculară (markeri moleculari). Metodele clasice care au la bază caracterele fenotipice nu sunt suficiente să rezolve aceste probleme, ca urmare a instabilității caracterelor morfologice sub influența factorilor de mediu, precum și a faptului că în identificarea plantelor tinere informațiile nu pot fi utilizate. Deoarece
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
cultivarelor la nivel ADN este extrem de utilă, deoarece rezultatele obținute reflectă direct individul. Polimorfismul ADN, este determinat de numărul de secvențe de nucleotizi și poate fi ușor de relevat din aproape orice țesut de plantă (Rodica Pop, 2004). Dintre tehnicile moleculare utilizate din ce în ce mai mult pentru identificarea speciilor, soiurilor de Vitis și a varietăților somaclonale sunt: metoda PCR (Polymerase Chain Reaction - reacția în lanț a polimerazei), RFLP (Random Framenth Leht Polymorfism - polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție), RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA - polimorfismul
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
lanț a polimerazei (PCR). Tehnica Polymerase Chain Reaction-Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost descoperită de Kary Mullis și colaboratorii în anul 1988 și constituie subiectul a foarte multe cărți (peste 60) și mii de articole din domeniul biologiei moleculare, motiv pentru care în anul 1993, autorul primește premiul Nobel pentru chimie. Metoda se bazează pe amplificarea enzimatică a ADN-ului în vitro, pornindu-se de la cantități foarte mici din matrița de ADN (nanograme), se pot obține milioane de copii
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
timp relativ scurt. Avantajul acestei metode constă în faptul că reacția în lanț a polimerazei are loc cu o viteză foarte mare. De asemenea, metoda prezintă selectivitate și sensibilitate, aplicațiile ei în diferite scopuri deschizând foarte multe posibilități în biologia moleculară (M.L. Metzker, 2001). Amestecul reacție în lanț a polimerazei, conține mai multe componente: ADN polimerază termostabilă , prima polimerază utilizată în reacția PCR a fost ADN polimeraza I, extrasă din Escherichia coli (Mullis K.B. și Faloona F, 1986), a cărui mare
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
adăugată la fiecare ciclu. Acest neajuns a fost înlăturat după ce Saiki și colab, 1988 folosesc pentru prima dată o ADN polimerază termostabilă (ADN polimeraza Taq), extrasă din bacteria termofilă Thermus aquaticus, fapt ce constituit începutul unei noi ere în genetica moleculară, permițând automatizarea PCR; o pereche de oligonucleotide sintetice care poate fi ADN dublu sau monocatenar, circular sau linear. Aplicațiile tehnicii PCR sunt multiple, ele deschizând noi posibilități în biologia moleculară. Dintre acestea amintim: detectarea polimorfismelor genetice, care pot fi datorate
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
aquaticus, fapt ce constituit începutul unei noi ere în genetica moleculară, permițând automatizarea PCR; o pereche de oligonucleotide sintetice care poate fi ADN dublu sau monocatenar, circular sau linear. Aplicațiile tehnicii PCR sunt multiple, ele deschizând noi posibilități în biologia moleculară. Dintre acestea amintim: detectarea polimorfismelor genetice, care pot fi datorate numărului diferit de repetiții în tandem, precum și variației secvențelor mini- sau microsateliților; studiul expresiei genice prin reacția de amplificare sub aspectul cantității produșilor finali (PCR cantitativ), iar analiza produșilor de
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
unei probe necunoscute prin compararea ei cu alte varietăți), situația este mai dificilă, atunci când se înregistrează un nou soi și trebuie identificat, descris pentru prima dată precum și verificat sub aspectul uniformității și stabilității sale. Preluarea tehnicilor de analiză la nivel molecular de către UPOV, organism care se ocupă cu protecția noilor varietăți de plante este încă în discuție, motiv pentru care ele nu au fost încă acceptate pentru caracterizarea noilor genotipuri de plante, deși este recunoscut faptul că acestea vor înlesni pe
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
dată de Farria și colab. în anul 1994, reprezintă un ansamblu de fragmente specifice de ADN, generate din ADN genomic prin digestie endonucleazică. RFLP este marker genetic, caracterizat prin variabilitate de la un individ la altul și transmitere mendeliană. Principul tehnicii moleculare RFLP de realizare a amprentei genetice are la bază următoarele etape de lucru: izolarea ADN genomic de la organismele de interes; digestia ADN folosind enzime de restricție; separarea fragmentelor de restricție prin electroforeză în gel de agaroză; denaturarea, neutralizarea și fixarea
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
fi compușii cuaternari de amoniu cu catenă lungă R4N+, pot fi formate membrane lichide schimbătoare de anioni. Moleculele schimbătorilor de ioni pot fi dizolvate în alt solvent organic pentru a forma membrana. Eterii ciclici (inelari) cu structura alăturată conform modelului molecular au proprietăți hidrofobe. Sunt solubili în solvenți organici și au capacitatea de a transfera ionii metalici din apă în faza organică. În scopul folosirii lor ca electrozi membrană, acești eteri sunt dizolvați într-un solvent organic, distribuția ionilor în această
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de a transfera ionii metalici din apă în faza organică. În scopul folosirii lor ca electrozi membrană, acești eteri sunt dizolvați într-un solvent organic, distribuția ionilor în această fază a membranei organice are loc prin includerea lor în cavitatea moleculară. Din această distribuire rezultă o abatere de la electroneutralitate și ca urmare se dezvoltă un potențial. Capacitatea acestor membrane de a dezvolta un potențial este consecința permeabilității lor selective pentru anumiți ioni. Când electrodul este imersat în soluția probă se stabilește
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
insulină, fibrinogen, proteine, lipoproteine, glicoproteine, hemoglobine ; - geluri de agaroză (proteine), agar (proteine, vitamine, carbohidrați), poliacrilamidă, silice, rășini schimbătoare de ioni, amidon (enzime) etc. Acestea din urmă se caracterizează printr-o mare putere de rezoluție și o mare putere de selecție moleculară. Metoda de analiză pe hârtie care constă în: proba de analizat se aplică pe banda de hârtie îmbibată cu soluție tampon. Fracționarea are loc sub influența tensiunii aplicate la capetele benzii. Revelarea se face cu un colorant potrivit. In cazul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
tranziții n - π* (compuși carbonilici); - tranziții d - d (metale). Tranziții σ-σ* Stabilitatea mare a legaturilor σ în compușii organici este reflectată de diferența de energie semnificativă dintre orbitalii ocupați si orbitalii liberi. Tranziția unui electron între legatura σ și orbitalul molecular nelegat σ* degajă o energie mare, aceasta apărând în UV îndepărtat. Acesta este motivul pentru care hidrocarburile saturate ca hexanul sau ciclohexanul care conțin doar legături σ apar transparente în zona UV convențională. Spre exemplu, hexanul are λmax=135 nm
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
tuturor spinilor electronilor din învelișul electronic. La un număr par de electroni, S are valoarea 0 sau un număr întreg, iar dacă numărul total de electroni este impar, S va fi impar sau jumătatea unui număr întreg. Multiplicitatea stării energetice moleculare este egală cu 2S + 1. Cele mai multe molecule organice conțin un număr impar de electroni, cu toate acestea cele mai multe tranziții electronice de interes spectroscopic sunt cele din starea fundamentală la stările excitate cele mai coborâte. Numai o pereche de electroni sunt
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
este proporțională și cu Io și astfel creșterea sensibilității poate fi asigurată prin creșterea intensității radiației incidente excitante pentru o anumită concentrație (aceasta este de fapt diferența fundamentală dintre fluorimetrie și spectrofotometrie). Intensitatea de fluorescență este proporțională și cu absorbția moleculară. Pentru excitație se folosește un fascicul radiant al cărui domeniu este astfel ales încât să includă și maximul spectrului de excitație (absorbție). Procedura analitică este în esență cea descrisă în cadrul analizei spectrofotometrice a unui singur component. Se trasează o curbă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
aplică pentru: - aminoacizi (sunt derivatizați cu clorură de dansil și ortoftalaldehida); - acizi și alcooli cu catenă scurtă. II. 4. SPECTROSCOPIA DE CHEMILUMINISCENȚĂ Desemnează emisia de lumină ce însoțește desfășurarea unor reacții chimice. Aceste reacții se caracterizează prin producerea unei specii moleculare fluorescente într-o stare electronică excitată care revine la starea fundamentală prin emisia unui foton. După descoperirea sa, la sfârșitul sec. al XIX-lea acest fenomen a rămas mult timp o curiozitate de laborator. Aplicațiile analitice nu au apărut decât
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
polimer pe bază de siliciu al cărui monomer este Si6H6O3 și posedă o structură ciclică cu 6 atomi de siliciu (2D-poli[1,3,5-trihidroxociclohexasilan]) Siloxenul este un reducător puternic, prin intermediul legăturilor sale Si-Si care pot fixa oxigenul sau clorul molecular ca și apa sau NH3, cu eliberare de hidrogen. Oxidarea siloxenului cu unii agenți ca peroxidul de hidrogen sau KMnO4, în soluție acidă este însoțită de o chemiluminiscență intensă a cărei culoare depinde de condițiile experimentale. Peroxioxalatul Numeroși derivați ai
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
ECL (Enzymatic Chemiluminescence) se utilizează reacția catalizată de peroxidul de hidrogen și peroxidaza din eritrocitele de cal, HRP (Horseradish Peroxidase). Lumina apărută se datorează tripletului excitat de la nivelul grupării carbonil. INFRARED SPECTROSCOPY (IR) Principii generale Spectrele în IR sunt spectre moleculare, mult mai complexe decât cele atomice, molecula reprezentând un sistem în care nu se poate considera întreaga masă concentrată într-un singur punct; masa moleculei este dată de nucleele atomilor corespondenți care sunt considerate puncte materiale. Energia oricărei molecule poate
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
substanțelor cercetate. Datorită acumulării de energie are loc fragmentarea moleculelor cu ruperea unor legături interatomice, proces prin care rezultă mai ales ioni pozitivi (rar negativi), radicali, ioni radicali și molecule neutre. Aceste fragmente contituie piese importante de reconstituire a structurii moleculare. Prin fragmentare se produc mai ales ioni pozitivi, fragmente purtătoare de sarcină caracterizate prin raportul dintre masă și sarcină (m/z sau m/e). O condiție necesară fragmentării moleculelor este ca substanța analizată să fie adusă în stare gazoasă, ea
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
un colector, înregistrându-se abundența lor relativă. Toate operațiunile se fac sub vid, iar sistemul este total computerizat. Dacă un electron are o energie suficientă să scoată un electron de valență dintr-o moleculă neutră, dă naștere la un ion molecular pozitiv, cu număr impar de electroni. Ionul M + și alți ioni derivați din el trebuie separați cu ajutorul unui câmp magnetic, care deviază particulele în funcție de raportul m/z, în care m=masa exprimată în unități atomice, iar z este sarcina electrică
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
îmbunătățite, pot ajunge la 106 Da; -sub forma unui spectru de fragmente, numit și spectru de bare, a căror intensitate se exprimă în procente în raport cu picul cel mai intens, care se numește și pic de bază și care corespunde ionului molecular cu cea mai mare abundeță, numit și ion de bază. Pentru identificarea compușilor moleculari analizați prin spectroscopia de masă se poate proceda în două moduri: - structura moleculară a compusului inițial poate fi reconstituită din fragmentele rezultate prin ionizare; lucrul acesta
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
spectru de bare, a căror intensitate se exprimă în procente în raport cu picul cel mai intens, care se numește și pic de bază și care corespunde ionului molecular cu cea mai mare abundeță, numit și ion de bază. Pentru identificarea compușilor moleculari analizați prin spectroscopia de masă se poate proceda în două moduri: - structura moleculară a compusului inițial poate fi reconstituită din fragmentele rezultate prin ionizare; lucrul acesta este dificil din cauza fragmentărilor succesive a ionilor, care sunt procese complexe și anume, cu
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
mai intens, care se numește și pic de bază și care corespunde ionului molecular cu cea mai mare abundeță, numit și ion de bază. Pentru identificarea compușilor moleculari analizați prin spectroscopia de masă se poate proceda în două moduri: - structura moleculară a compusului inițial poate fi reconstituită din fragmentele rezultate prin ionizare; lucrul acesta este dificil din cauza fragmentărilor succesive a ionilor, care sunt procese complexe și anume, cu atât mai complexe cu cât masa compusului este mai mare; - prin compararea spectrului
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]