2,677 matches
-
adaugă 50 de microlitri din amestecul nutritiv (pct. 5.1.4) în fiecare eprubetă sau fiolă. 6.4. Se amestecă cu atenție eșantionul de lapte pentru analiză și se transferă, cu ajutorul seringii (pct. 4.1.4), 0,1 ml în eprubeta sau fiola etichetată. Se utilizează câte un capac de unică folosință pentru transferarea fiecărui eșantion. 6.5. După metoda descrisă la pct. 6.4, se prepară 2 martori din soluția etalon de penicilină ce conține 0,004 g/ml ( = 0
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
de penicilină ce conține 0,004 g/ml ( = 0,0067 UL/ ml) de penicilină. 6.6. După metoda descrisă la pct. 6.4, se prepară 2 martori din laptele martor fără substanțe inhibante (pct. 5.3). 6.7. Se închid eprubetele/ fiolele și se pun pe stativul cu eprubete/fiole, într-o baie de apă la 63 ± 1oC (pct. 4.1.2), timp de cel puțin 2 1/2 - 2 1/4 ore. 6.8. Se scoate stativul cu eprubete/fiole
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
0,0067 UL/ ml) de penicilină. 6.6. După metoda descrisă la pct. 6.4, se prepară 2 martori din laptele martor fără substanțe inhibante (pct. 5.3). 6.7. Se închid eprubetele/ fiolele și se pun pe stativul cu eprubete/fiole, într-o baie de apă la 63 ± 1oC (pct. 4.1.2), timp de cel puțin 2 1/2 - 2 1/4 ore. 6.8. Se scoate stativul cu eprubete/fiole din baia de apă. 6.9. Se studiază
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
închid eprubetele/ fiolele și se pun pe stativul cu eprubete/fiole, într-o baie de apă la 63 ± 1oC (pct. 4.1.2), timp de cel puțin 2 1/2 - 2 1/4 ore. 6.8. Se scoate stativul cu eprubete/fiole din baia de apă. 6.9. Se studiază culoarea mediului gelatinat (vezi pct. 7). 7. Interpretarea rezultatelor 7.1. O colorație roșiatică a mediului gelatinat din eprubetele/fiolele cu soluția etalon de penicilină sau cu eșantionul de lapte indică
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
1/2 - 2 1/4 ore. 6.8. Se scoate stativul cu eprubete/fiole din baia de apă. 6.9. Se studiază culoarea mediului gelatinat (vezi pct. 7). 7. Interpretarea rezultatelor 7.1. O colorație roșiatică a mediului gelatinat din eprubetele/fiolele cu soluția etalon de penicilină sau cu eșantionul de lapte indică prezența antibioticelor sau a sulfamidelor (aproximativ) la nivelul "pozitiv" specificat în tabelul de la pagina 39. Sensibilitatea mediului este satisfăcătoare dacă colorația eprubetelor/fiolelor cu soluția etalon de penicilină
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
colorație roșiatică a mediului gelatinat din eprubetele/fiolele cu soluția etalon de penicilină sau cu eșantionul de lapte indică prezența antibioticelor sau a sulfamidelor (aproximativ) la nivelul "pozitiv" specificat în tabelul de la pagina 39. Sensibilitatea mediului este satisfăcătoare dacă colorația eprubetelor/fiolelor cu soluția etalon de penicilină (pct. 6.5.) rămâne roșu închis. 7.2. O colorație parțial roșiatică a mediului gelatinat sau o colorație neregulată în eprubetele/fiolele cu eșantionul de lapte indică prezența unor substanțe inhibante între nivelurile specificate
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
pozitiv" specificat în tabelul de la pagina 39. Sensibilitatea mediului este satisfăcătoare dacă colorația eprubetelor/fiolelor cu soluția etalon de penicilină (pct. 6.5.) rămâne roșu închis. 7.2. O colorație parțial roșiatică a mediului gelatinat sau o colorație neregulată în eprubetele/fiolele cu eșantionul de lapte indică prezența unor substanțe inhibante între nivelurile specificate în tabelul de la pagina 39. 7.3. O colorație galbenă a mediului gelatinat în eprubetele/fiolele cu lapte martor fără substanțe inhibante sau cu eșantionul de lapte
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
O colorație parțial roșiatică a mediului gelatinat sau o colorație neregulată în eprubetele/fiolele cu eșantionul de lapte indică prezența unor substanțe inhibante între nivelurile specificate în tabelul de la pagina 39. 7.3. O colorație galbenă a mediului gelatinat în eprubetele/fiolele cu lapte martor fără substanțe inhibante sau cu eșantionul de lapte revelă absența substanțelor inhibante în organismul de probă. 7.4. Dacă toate eprubetele/ fiolele supuse analizei, inclusiv martorul negativ, prezintă o colorație roșiatică, eprubetele/fiolele nu conțin spori
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
specificate în tabelul de la pagina 39. 7.3. O colorație galbenă a mediului gelatinat în eprubetele/fiolele cu lapte martor fără substanțe inhibante sau cu eșantionul de lapte revelă absența substanțelor inhibante în organismul de probă. 7.4. Dacă toate eprubetele/ fiolele supuse analizei, inclusiv martorul negativ, prezintă o colorație roșiatică, eprubetele/fiolele nu conțin spori viabili și eșantioanele trebuie să fie supuse unei noi analize, folosindu-se de data aceasta, pe parcursul întregului procedeu, substanțe proaspăt preparate. 8. Confirmarea rezultatelor 8
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
a mediului gelatinat în eprubetele/fiolele cu lapte martor fără substanțe inhibante sau cu eșantionul de lapte revelă absența substanțelor inhibante în organismul de probă. 7.4. Dacă toate eprubetele/ fiolele supuse analizei, inclusiv martorul negativ, prezintă o colorație roșiatică, eprubetele/fiolele nu conțin spori viabili și eșantioanele trebuie să fie supuse unei noi analize, folosindu-se de data aceasta, pe parcursul întregului procedeu, substanțe proaspăt preparate. 8. Confirmarea rezultatelor 8.1 Rezultatele tuturor eșantioanelor cu reacții descrise la pct. 7.1
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
adaptat pentru filtrarea în vid și un racord tată din sticlă rodată 12/21. 3.8. Balon cu vid de 50 ml cu un racord mamă din sticlă rodată 12/21 adaptabil la pâlnia de filtrare (3.7). 3.9. Eprubetă cu fund conic de 10 ml, cu dop ermetic. 3.10. Cromatograf în fază gazoasă adaptat la funcționarea cu coloană capilară, echipat cu un sistem de fracționare, alcătuit din: 3.10.1. Incintă termostatată pentru coloană, permițând menținerea temperaturii dorite
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
cu eter etilic (aproximativ 10 ml de fiecare dată) și se colectează filtratul în același fel în balonul conectat la pâlnia de filtrare. Se evaporă filtratul până ajunge la un volum de aproximativ 4-5 ml, se transvazează soluția reziduală în eprubeta de 10 ml (3.9) cântărită în prealabil, se usucă prin încălzire ușoară într-un ușor curent de azot, se continuă cu câteva picături de acetonă, se usucă din nou, se pune timp de aproximativ 10 minute în etuvă la
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
ușor curent de azot, se continuă cu câteva picături de acetonă, se usucă din nou, se pune timp de aproximativ 10 minute în etuvă la 105°C, apoi se lasă să se răcească în exsicator și se cântărește. Reziduul din eprubetă este alcătuit din fracțiunea alcoolilor. 5.3. Prepararea trimetilsilileterilor 5.3.1. Se adaugă, în eprubeta ce conține fracțiunea alcoolilor, reactivul de sililare, constituit dintr-un amestec de piridină-hexametildisilazan-trimetilclorosilan 9/3/1 (V/V/V) (nota 5) într-o proporție
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
pune timp de aproximativ 10 minute în etuvă la 105°C, apoi se lasă să se răcească în exsicator și se cântărește. Reziduul din eprubetă este alcătuit din fracțiunea alcoolilor. 5.3. Prepararea trimetilsilileterilor 5.3.1. Se adaugă, în eprubeta ce conține fracțiunea alcoolilor, reactivul de sililare, constituit dintr-un amestec de piridină-hexametildisilazan-trimetilclorosilan 9/3/1 (V/V/V) (nota 5) într-o proporție de 50 μl pe miligram de alcooli alifatici, evitând toate absorbțiile de umiditate (nota 6). Nota
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de umiditate (nota 6). Nota 5: În comerț există soluții gata preparate: în plus, alți reactivi silanizanți, precum, de exemplu, bi-trimetilsililtrifluorescentamida + 1 % trimetilclorosilan care trebuie să se dilueze cu un volum egal de piridină anhidră. 5.3.2. Se închide eprubeta, se agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a alcoolilor alifatici. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura camerei, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
adaptat pentru filtrarea în vid și un racord tată din sticlă rodată 12/21. 3.8. Balon cu vid de 50 ml cu un racord mamă din sticlă rodată 12/21 adaptabil la pâlnia de filtrare (3.7). 3.9. Eprubetă cu fund conic de 10 ml, prevăzută cu dop ermetic. 3.10. Cromatograf în fază gazoasă adaptat la funcționarea cu coloană capilară, dotat cu un sistem de separare, alcătuit din: 3.10.1. Incintă termostatată pentru coloană, care permite menținerea
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de trei ori cu eter etilic (aproximativ 10 ml de fiecare dată) și se colectează filtratul în balonul conectat la pâlnia de filtrare. Se evaporă filtratul până când ajunge la un volum de aproximativ 4-5 ml, se transvazează soluția reziduală în eprubeta de 10 ml (3.9) cântărită în prealabil, se usucă încălzind-o ușor într-un ușor curent de azot, se continuă cu câteva picături de acetonă, uscând-o din nou, se pune timp de aproximativ 10 minute în etuvă la
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
ușor într-un ușor curent de azot, se continuă cu câteva picături de acetonă, uscând-o din nou, se pune timp de aproximativ 10 minute în etuvă la 105°C, apoi se lasă să se răcească în exsicator. Reziduul din eprubetă este alcătuit din fracțiunea sterolică. 5.3. Prepararea trimetilsilileterilor 5.3.1. Se adaugă, în tubul care conține fracțiunea sterolică, reactivul de sililare, constituit dintr-un amestec de piridină-hexametildisilazan-trimetilclorosilan 9/3/1 (V/V/V) (nota 4) într-o proporție
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
absorbțiile de umiditate (nota 5). Nota 4: În comerț există soluții gata pentru folosire: în plus, alți reactivi silanizanți, precum, de exemplu, bi-trimetilsililtrifluoracentamida + 1 % trimetilclorosilan care se diluează cu un volum egal de piridină anhidră. 5.3.2. Se închide eprubeta, se agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a sterolilor. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura ambiantă, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în faza
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
silicagelul pe filtru. Se spală de trei ori cu cloroform cald (aproximativ 10 ml de fiecare dată) și se colectează filtratul într-un balon de 100 ml. Se evaporă până la obținerea unui volum de 4-5 ml, se transvazează într-o eprubetă de centrifugare cu fund conic de 10 ml cântărit în prealabil, se usucă încălzind ușor într-un curent de azot, apoi se cântărește. 5.3. Prepararea trimetilsilileterilor Se procedează conform indicațiilor de la pct. 5.3 din metoda descrisă în anexa
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
Pahar de laborator de 50 ml. 4.6. Pâlnie de decantare de 500 ml. 4.7. Coloană de sticlă pentru cromatografie (diametru interior: 13 mm; lungime: 400 mm) echipată cu un disc din sticlă sinterizată și un robinet. 4.8. Eprubetă de centrifugare de 10 ml cu dop din sticlă rodată. 4.9. Biuretă de 5 ml cu gradații de 0,05 ml. 4.10. Seringă hipodermică de 1 ml echipată cu un ac fin. 4.11. Microseringă pentru picături de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
cromatografie în strat subțire. 4.16. Etuvă reglată la 103 ± 2°C. 4.17. Termostat reglabil între 30 și 45°C, la aproximativ 0,5°C. 4.18. Evaporator rotativ. 4.19. Agitator electric vibrant, care permite agitarea energică a eprubetei de centrifugare. 4.20. Lampă cu ultraviolete pentru examinarea plăcilor pentru cromatografie în strat subțire. Pentru controlul activității lipazei: 4.21. pH-metru 4.22. Agitator cu spirală 4.23. Biuretă de 5 mililitri 4.24. Cronometru. Pentru prepararea eventuală a
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
2°C. Se aduc plăcile la temperatura ambiantă într-un exsicator, înainte de folosire. Plăci astfel preparate se găsesc în comerț. 8. MODUL DE LUCRU 8.1. Hidroliza cu lipază pancreatică Se cântăresc aproximativ 0,1 g de probă preparată în eprubeta de centrifugare (4.8). Dacă este vorba de o substanță grasă solidă, se dizolvă în 0,2 ml de hexan încălzind ușor, dacă este necesar. Se adaugă 20 ml de lipază (5.10) și 2 ml de soluție tampon (5
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
2 ml de soluție tampon (5.15). Se agită convenabil, dar prudent, apoi se adaugă 0,5 ml de soluție de colat de sodiu (5.14) și 0,2 ml de soluție de clorură de calciu (5.13). Se închide eprubeta cu dopul din sticlă rodată, se agită cu prudență (se va evita umezirea dopului) și se pune eprubeta imediat în termostat (4.17), menținut la 40 ± 0,5°C. Se agită cu mâna timp de exact 1 minut. Se scoate
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de soluție de colat de sodiu (5.14) și 0,2 ml de soluție de clorură de calciu (5.13). Se închide eprubeta cu dopul din sticlă rodată, se agită cu prudență (se va evita umezirea dopului) și se pune eprubeta imediat în termostat (4.17), menținut la 40 ± 0,5°C. Se agită cu mâna timp de exact 1 minut. Se scoate eprubeta din termostat și se agită energic cu ajutorul unui agitator electric (4.19) timp de exact 2 minute
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]