408 matches
-
cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică 100 μl de diluție conjugată în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC.
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Apendicele 3 Materiale pentru testul IF Tampon IF: 10 mM salin tamponat fosfatic (PBS) pH 7,2 Acest tampon este utilizat pentru diluarea antiserurilor. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
3 (i) Diluția de extract concentrat repus în suspensie 1/100 1/1 1/1 1/1 1/1 Diluție de extract concentrat repus în suspensie (T = titru) T/2 T/4 T/2 T 2T Diluție pe jumătate a antiserului/anticorpului ***[PLEASE INSERT FIGURE AND THE FOLLOWING TEXT IN RO LANGUAGE]*** échantillon 1 = eșantion 1 double de l'échantillon 1 ou de l'échantillon 2 = dublul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 Figura 2. Prepararea lamei de test în conformitate cu punctele
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
échantillon 1 = eșantion 1 double de l'échantillon 1 ou de l'échantillon 2 = dublul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 Figura 2. Prepararea lamei de test în conformitate cu punctele 4.1 (ii) și 4.3 (ii) Diluția de lucru de antiser/anticorp 1/1 1/10 1/100 gol gol Diluție la a zecea parte de extract concentrat repus în suspensie ***[PLEASE INSERT FIGURE AND THE FOLLOWING TEXT IN RO LANGUAGE]*** échantillon 1 = eșantion 1 double de l'échantillon 1 ou
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se vedea apendicele 9) + 9.2. Test de imunofluorescență (IF) (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru într-un tampon de imunofluorescență (a se vedea apendicele 3). (b) Se prepară o diluție la jumătate dintr-un antiser adecvat. (c) Se urmează procedura testului de imunofluorescență (a se vedea secțiunea 4). (d) Pentru ca un test IF să fie pozitiv, titrul obținut cu cultura trebuie să fie echivalent cu cel obținut cu martorul pozitiv. 9.3. Test PCR (a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
fiind virus al pestei de subtipul H5 sau H7 în plus față de virusul bolii Newcastle. Fluidele hemaglutinice ar trebui folosite într-un test de inhibare hemaglutinic descris în capitolele 5 și 6. Inhibarea pozitivă, adică 24 sau mai mult, cu antiser policlonal specific pentru subtipurile H5 sau H7 ale pestei A și un titru de cel puțin 29 se utilizează pentru identificarea preliminară permițând impunerea măsurilor provizorii de control. 2. Identificarea de confirmare Deoarece există 13 subtipuri hemaglutinice și 9 subtipuri
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
identificarea preliminară permițând impunerea măsurilor provizorii de control. 2. Identificarea de confirmare Deoarece există 13 subtipuri hemaglutinice și 9 subtipuri neuramidice ale virusului pestei, iar în cadrul acestora apar variații, nu este practic sau economic ca fiecare laborator național să dețină antiser care să permită o caracterizare antigenecă completa a tulpinilor de virusuri. Oricum, fiecare laborator național trebuie să: (i) confirme că izolatul este un virus al pestei A folosind testul de imuno-dublă difuzie pentru a detecta grupe de antigene conform capitolului
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
prezenței sau absenței unor picături în formă de lacrimă care se scurg cu aceeași viteză ca adânciturile de control care conțin exclusiv hematii (0,025) ml și STF (0,05 ml). 9. Titrul HI este cea mai mare diluție de antiser care provoacă inhibarea completă a patru sau opt unități de virus (o titrare HA pentru confirmarea prezenței HAU dorit trebuie să fie inclusă în fiecare test). 10. Valabilitatea rezultatelor depinde de obținerea unui titru mai mic de 23 pentru 4
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
0% clorură de sodiu adusă la o soluție tamponată de fosfat de 0,1 M și pH 7,2. Virusul pestei A este confirmat prin liniile de precipitare formate de antigenul de testare și de antigenul considerat pozitiv împotriva unui antiser cunoscut și el ca fiind pozitiv care, amestecate, formează o linie de identitate. ANEXA IV LISTA LABORATOARELOR NAȚIONALE PENTRU PESTA AVIARĂ Belgia Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, B-1180 Bruxelles Danemarca National Veterinary Laboratory, Poultry Disease Division, Hangoevej 2
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
aviară: 1. să coordoneze, în colaborare cu Comisia CE, metodele puse în practică în statele membre pentru diagnosticarea pestei aviare. În mod special prin: (a) clasificarea, stocarea și livrarea de tulpini ale virusului pestei aviare, pentru testele serologice și prepararea antiserului; (b) furnizarea de ser standard și de alți reactivi de referință către Laboratoarele naționale de referință, cu scopul de a standardiza testele și reactivii folosiți de statele membre; (c) colectând și păstrând o colecție de tulpini și izolați ai virusului
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
CATARALĂ Laboratorul de referință comunitară are funcțiile următoare: 1. să coordoneze, după consultarea Comisiei, metodele de diagnosticare pentru febra catarală în statele membre, în special prin: (a) specificarea, deținerea și livrarea de sușe ale virusului în vederea testărilor serologice și preparării antiserului; (b) livrarea serului de referință și a altor reactivi de referință către laboratoarele de referință națională în vederea standardizării testărilor și a reactivilor utilizați în fiecare stat membru. (c) realizarea și conservarea unei colecții de sușe și de segmente izolate de
jrc4616as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89782_a_90569]
-
cu Comisia Europeană, a metodelor de diagnostic pentru boala limbii albastre în statele membre ale Uniunii Europene, în special prin: a) specificarea, deținerea și furnizarea tulpinilor de virus al bolii limbii albastre, în scopul testelor serologice și al preparării de antiser; ... b) furnizarea unui ser de referință și a altor reagenti de referință laboratoarelor naționale de referință, în scopul standardizării testelor și reagentilor utilizați în fiecare stat membru al Uniunii Europene; ... c) stabilirea și conservarea unei colecții de tulpini și izolate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140706_a_142035]
-
să fie în măsură să identifice prezența virusului acestei boli. Lichidele hemaglutinante se utilizează într-o reacție de hemaglutinare cum este cea descrisă la cap. 5 și 6. O inhibiție pozitivă, adică de 2^4 sau mai mult, cu ajutorul unui antiser policlonal specific de virus al bolii de Newcastle, cu un titru de cel puțin 2^9, va putea servi la identificarea preliminară permițând punerea în practică a măsurilor de control preliminar. 2. Confirmarea identificării Laboratorul sanitar veterinar național trebuie să
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220682_a_222011]
-
practică a măsurilor de control preliminar. 2. Confirmarea identificării Laboratorul sanitar veterinar național trebuie să efectueze diagnosticul diferențial complet al agenților hemaglutinanți. Confirmarea virusului bolii de Newcastle trebuie să se facă din nou prin reacția de inhibare a hemaglutinării cu antiseruri monospecifice de găină. Pentru toate izolatele pozitive trebuie să se efectueze teste de stabilire a indicelui de patogenitate pe cale intracerebrală stabilite la capitolul 7. Indicii de patogenitate mai mari de 0,7 indică prezența virusului și necesită aplicarea deplină a
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220682_a_222011]
-
unui flux în formă de lacrimă, care se înclină în același ritm cu godeurile martor care conțin numai hematii 'ad 0,025 ml și tampon fosfat salin 'ad 0,05 ml; ... i) titrul inhibohemaglutinant corespunde diluției celei mai mari de antiser care a determinat o inhibare completă a 4 sau 8 unități de virus; pentru fiecare test de inhibare a hemaglutinării trebuie să fie inclusă titrarea hemaglutinării pentru confirmarea numărului cerut de unități hemaglutinante; ... i) validarea rezultatelor depinde de obținerea unui
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220682_a_222011]
-
și conjugatul. Aceste godeuri reprezintă culoarea cea mai pronunțată. Media valorilor densității optice ale acestui control reprezintă valoarea de inhibiție 0 %. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E și F. Aceste godeuri cuprind antigenul BTV, antiserul puternic pozitiv și, respectiv, slab pozitiv, AcM și conjugatul. Control negativ (C-) Godeurile 2A și 2B corespund controalelor negative, care cuprind antigenul BTV, antiserul BTV negativ, AcM și conjugatul. Ser de testare: Pentru studii serologice la scară mare și teste
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E și F. Aceste godeuri cuprind antigenul BTV, antiserul puternic pozitiv și, respectiv, slab pozitiv, AcM și conjugatul. Control negativ (C-) Godeurile 2A și 2B corespund controalelor negative, care cuprind antigenul BTV, antiserul BTV negativ, AcM și conjugatul. Ser de testare: Pentru studii serologice la scară mare și teste de control rapide, serurile se pot testa într-o diluție unică 1:5 (apendicele 1). Eventual, 10 seruri se pot testa într-o serie
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
plăcile de microtitrare, înainte de adăugarea celulelor MDBK. Celulele sunt folosite la o concentrație care formează un monostrat complet după 24 de ore. Controale: (i) controlul infecțiozității virusului; (ii) controale de toxicitate a serului; (iii) controale de culturi celulare neinoculate; (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului folosit la testare se înregistrează după trei până la șase zile de incubare la temperatura de 37 °C. Titrurile serului se consideră negative, în cazul în care nu există nici o neutralizare
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
În acest moment, se poate efectua o citire microscopică finală sau plăcile se pot fixa și colora în vederea unei citiri macroscopice, utilizând, de exemplu, solutie salină formolată 10 % și albastru de metilen 0,05 %. Controale: Controalele fiecărui test cuprind un antiser omolog de un titru cunoscut, un control al celulelor, un control de toxicitate a serului, un control al mediului și o titrare a virusului pe baza căreia se calculează cantitatea reală a virusului utilizată în test. Interpretare: Godeurile care prezintă
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
precedente. În cazul în care controalele se găsesc în afara acestor limite, se repetă testele. Un titru final de 1/11 sau mai mic se consideră negativ. C. Detectarea și cuantificarea anticorpului prin testul ELISA se efectuează în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: Antiseruri de iepure față de șapte tipuri de antigenul 146S al virusului febrei aftoase (FMDV) folosite la o concentrație optimă predeterminată într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigene din tulpinile de virus selectate, cultivate pe monostraturi
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
adăugarea unui volum egal de PBST (tampon fosfat salin, conținând 0,05 % Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o densitate optică între 1,2 și 1,5. Virusurile pot fi folosite inactivate. PBST este folosit ca diluant. Se prepară antiseruri de cobai prin inocularea cobailor cu antigen 146S din fiecare serotip. Se prepară o concentrație optimă predeterminată în PBST, ce conține 10 % ser bovin normal și 5 % ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulină de iepure anticobai conjugată cu peroxidază
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
ser/antigen din plăcile purtătoare în plăcile ELISA acoperite cu ser de iepure și se incubează la temperatura de 37 °C timp de o oră într-un agitator rotativ. 5. După spălare, se adaugă în fiecare godeu 50 µl de antiser de cobai la antigenul folosit la punctul 4. Se incubează plăcile la temperatura de 37 °C timp de o oră într-un agitator rotativ. 6. Se spală plăcile și se adaugă în fiecare godeu 50 µl de imunoglobulină de iepure
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
spectrofotometrică a plăcilor la 492 nm cu ajutorul unui cititor ELISA, cuplat la un microcalculator. Controale: Pentru fiecare antigen utilizat, 40 de godeuri nu conțin ser, ci antigen diluat într-un PBST. O serie dublă de diluții în progresie geometrică de antiser bovin omolog de referință. O serie dublă de diluții în progresie geometrică de ser bovin negativ. Interpretare: Titrurile anticorpilor sunt exprimate ca reprezentând diluția finală a serurilor de testare, dând 50 % din valoarea medie DO înregistrate în godeurile de control
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
plăcile de microtitrare, înainte de adăugarea celulelor adecvate. Celulele sunt folosite la o concentrație care formează un monostrat complet după 24 de ore. Controale: (i) controlul infecțiozității virusului; (ii) controale de toxicitate a serului; (iii) controale de culturi celulare neinoculate; (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului folosit la testare se înregistrează după trei până la șase zile de incubare la temperatura de 37 °C. Titrurile serului mai mici decât 1/2 (ser nediluat) se consideră negative. B.
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]