186 matches
-
prezentei directive până la 30 iunie 1985 și informează Comisia cu privire la aceasta. Articolul 3 Prezenta directivă se adresează statelor membre. Adoptată la Bruxelles, 25 iulie 1984. Pentru Comisie Poul DALSAGER Membru al Comisiei ANEXĂ DOZAREA SPIRAMICINEI PRIN DIFUZIUNE ÎN MEDIU DE GELOZĂ 1. Obiect și domeni de aplicare Metoda permite dozarea spiramicinei în hrană și preamestecuri. Limita interioară de dozare este de 1 mg/kg (1ppm)13. 2. Principiu Mostra se supune unei extracții printr-un amestec de metanol și de tampon
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
se supune unei extracții printr-un amestec de metanol și de tampon fosfat - bicarbonat cu pH 8. Extractul se decantează sau se centrifughează, apoi se diluează. Activitatea antibiotică a extractului se determină prin măsurarea difuziunii spiramicinei într-un mediu de geloză, fertilizat cu Micrococcus luteus. Difuziunea se manifestă prin formarea de zone de inhibare a microorganismului. Diametrul acestor zone se consideră ca fiind direct proporțional cu logaritmul concentrației de antibiotic pentru gama concentrațiilor utilizate. 3. Microorganism : Micrococcus luteus ATCC 9341 (NCTC
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
Micrococcus luteus. Se incubează timp de 34 ore la 30°C, se păstrează în frigider la aproximativ 4°C și se reînnoiește fertilizarea la fiecare 15 zile. 3.2 Prepararea suspensiei bacteriene (a) Se recoltează germenii dintr-un tub de geloză (3.1.) preparată recent cu ajutorul a 2 până la 3 ml de soluție de clorură de sodiu (4.3.). Cu această suspensie se fertilizează 250 ml din mediul de cultură (4.1.) într-o fiolă Roux și se incubează timp de
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
C. 4. Medii de cultură și reactivi 4.1 Mediu de întreținere a culturii (b) Peptonă din carne 6,0 g Triptonă 4,0 g Extract de drojdie 3,0 g Extract de carne 1,5 g Glucoză 1,0g Geloză 10,0 la 20,0 g Apă 1 000 ml pH 6,5 - 6,6 (după sterilizare) 4.2 Mediu de bază al dozării (b) Triptonă 5,0 g Extract de drojdie 4,0 g Extract de carne 3,0
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
0 la 20,0 g Apă 1 000 ml pH 6,5 - 6,6 (după sterilizare) 4.2 Mediu de bază al dozării (b) Triptonă 5,0 g Extract de drojdie 4,0 g Extract de carne 3,0 g Geloză 10,0 la 20,0 g Apă 1 000 ml pH 8,0 (după sterilizare). 4.3 Soluție la 0,8 % (p/t) de clorură de sodiu Se dizolvă în apă 8 g de clorură de sodiu, se diluează la
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
se determină cantitatea de suspensie bacteriană ce permite obținerea, pentru diferitele concentrații de spiramicină. a unor zone de inhibiție care să fie cât mai întinse posibil și care, în același timp, să fie limpezi. 7.2 Pregătirea cutiilor Difuzarea pe geloză se efectuează în cutii cu cele patru concentrații de soluție etalon (S8, S4, S2, S1) și cele patru concentrații de extract (U8, U4, U2, U1). În fiecare cutie trebuie să se introducă cele patru concentrații de soluție etalon și de
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
concentrații de extract (U8, U4, U2, U1). În fiecare cutie trebuie să se introducă cele patru concentrații de soluție etalon și de extract. În acest scop, se alege dimensiunea cutiilor în așa fel încât să se facă în mediul de geloză cel puțin 8 cavități cu un diametru de 10 - 13 mm , ale căror centre să nu fie distanțate la mai puțin de 30 mm. În loc de cutii se pot utiliza tăvițe de sticlă plane suspendate cu un inel de aluminiu sau
jrc902as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86041_a_86828]
-
5΄-GGGGGTAGCTTGCTACCTGCC-3΄ Amorsă Y-2 5΄-CCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGT-3΄ Pentru materiale a se vedea Seal et al (1993). Apendicele 7 Materiale pentru testele de placare selectivă și de îmbogățire Mediu selectiv SMSA (Engelbrecht, 1994 modificat de Elphinstone et al, 1996) dar se elomină geloza și sărurile de tetrazoliu. Mediu de bază Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Glicerol 5 ml Geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de placare selectivă și de îmbogățire Mediu selectiv SMSA (Engelbrecht, 1994 modificat de Elphinstone et al, 1996) dar se elomină geloza și sărurile de tetrazoliu. Mediu de bază Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Glicerol 5 ml Geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se ajustează pH-ul, dacă este necesar, la 6,5 înainte de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
etanol la concentrațiile date pentru volumul de mediu preparat. Unele ingrediente ca polimixina B și cloramfenicolul necesită o ușoară încălzire și agitare. Mediu nutritiv SMSA (Elphinstone et al., 1996) Se prepară ca și pentru mediul selectiv SMSA, dar se elimină geloza. Se împarte în alicote de 3 ml în tuburi de unică folosință Universal de 30 ml. Bibiografie Buddenhagen, I.W.; Sequeira, L. and Kelman, A. 1962. Description of races in Pseudomonas solanacearum.Phytopathology 52, 726. Cook, D.; Elizabeth B. and
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Suspensiile de celule bacteriene sunt expuse la substanța de testat în prezența și în absența unui sistem exogen de activare metabolică. În procedeul de încorporare prin depunere pe o placă, suspensiile menționate se amestecă cu o geloză de acoperire (agar) și se depun imediat pe un mediu minimal. În procedeul cu preincubare, amestecul de tratare se incubează și apoi se amestecă cu geloza de acoperire înaintea depunerii pe un mediu minim. Pentru ambele metode, după două sau
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
procedeul de încorporare prin depunere pe o placă, suspensiile menționate se amestecă cu o geloză de acoperire (agar) și se depun imediat pe un mediu minimal. În procedeul cu preincubare, amestecul de tratare se incubează și apoi se amestecă cu geloza de acoperire înaintea depunerii pe un mediu minim. Pentru ambele metode, după două sau trei zile de incubare, coloniile care produc inversarea se numără și numărul obținut se compară cu cel al coloniilor spontane de inversare aflate pe plăci cu
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
producă un număr de colonii spontane de reversie pe fiecare placă, între limitele de frecvență estimate pe baza datelor de laborator anterioare și, de preferință, între limitele semnalate în literatura de specialitate. 1.5.1.2. Mediul Se utilizează o geloză minimală corespunzătoare (de ex. una care conține mediu minimal E Vogel-Bonner și glucoză) și o geloză de acoperire care conține histidină și biotin sau triptofan pentru a permite divizarea doar a unui număr mic de celule (1) (2) (9). 1
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
pe baza datelor de laborator anterioare și, de preferință, între limitele semnalate în literatura de specialitate. 1.5.1.2. Mediul Se utilizează o geloză minimală corespunzătoare (de ex. una care conține mediu minimal E Vogel-Bonner și glucoză) și o geloză de acoperire care conține histidină și biotin sau triptofan pentru a permite divizarea doar a unui număr mic de celule (1) (2) (9). 1.5.1.3. Activarea metabolică Expunerea bacteriilor la substanța de testat ar trebui să se realizeze
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de obicei, un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de soluție de testat, 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și 0,5 ml de tampon steril cu 2,0 ml geloză de acoperire (agar). Pentru testul cu activare metabolică, se prepară, de obicei, un amestec din 0,5 ml preparat de activare metabolică, ce conține o cantitate specifică de fracție postmitocondrială (în proporție de 5 până la 30% vol./ vol. în preparatul
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
metabolică, se prepară, de obicei, un amestec din 0,5 ml preparat de activare metabolică, ce conține o cantitate specifică de fracție postmitocondrială (în proporție de 5 până la 30% vol./ vol. în preparatul de activare metabolică), 2,0 ml de geloză de acoperire, bacterii și substanța de testat/soluția de testat. Conținutul din fiecare eprubetă se agită și se toarnă pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
5 până la 30% vol./ vol. în preparatul de activare metabolică), 2,0 ml de geloză de acoperire, bacterii și substanța de testat/soluția de testat. Conținutul din fiecare eprubetă se agită și se toarnă pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru metoda de preincubare (2) (3) (5) (6), substanța de testat/soluția de testat se supune la preincubare împreună cu sușa experimentală (ce conține aproximativ 108 celule viabile
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
vol. în preparatul de activare metabolică), 2,0 ml de geloză de acoperire, bacterii și substanța de testat/soluția de testat. Conținutul din fiecare eprubetă se agită și se toarnă pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru metoda de preincubare (2) (3) (5) (6), substanța de testat/soluția de testat se supune la preincubare împreună cu sușa experimentală (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și cu tamponul steril
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
la preincubare împreună cu sușa experimentală (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și cu tamponul steril sau sistemul de activare metabolică (0,5 ml) de obicei timp de 20 de minute sau mai mult, la 30-37oC, înainte de a fi amestecată cu geloza de acoperire și turnată pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. De obicei, se prepară un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de substanță de testat/soluție de testat, 0,1 ml bacterii și
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și cu tamponul steril sau sistemul de activare metabolică (0,5 ml) de obicei timp de 20 de minute sau mai mult, la 30-37oC, înainte de a fi amestecată cu geloza de acoperire și turnată pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. De obicei, se prepară un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de substanță de testat/soluție de testat, 0,1 ml bacterii și 0,5 ml amestec S9 sau tampon steril cu 2,0
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
pe placă. De obicei, se prepară un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de substanță de testat/soluție de testat, 0,1 ml bacterii și 0,5 ml amestec S9 sau tampon steril cu 2,0 ml geloză de acoperire. Eprubetele ar trebui să fie aerate cu ajutorul unui agitator în timpul preincubării. Pentru o bună estimare a variației, ar trebui să se utilizeze câte trei plăci cu depuneri pentru fiecare doză. Se acceptă utilizarea a doar două plăci cu
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și numărarea coloniilor. - Metoda diluării în bulion de azotură de sodiu (Litsky). Numărarea potrivit numărului cel mai probabil (NMP). Salmonella /1 l Concentrare prin filtrare (pe membrană sau printr-un filtru adecvat). Inoculare în mediu pre-îmbogățit. Îmbogățire și transfer în geloză de izolare - identificare Calitatea biologică Până la armonizarea pe teritoriul întregii Comunități, statele membre vor folosi propriile metode." Articolul 2 Prezenta decizie se adresează statelor membre. Adoptată la Bruxelles, 24 noiembrie 1986. Pentru Consiliu Președintele W. WALDEGRAVE 1 JO C 321
jrc1089as1986 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86228_a_87015]
-
nr. 99 și USDA 1119 sau orice altă sușă de sensibilitate echivalentă. 7. Mediile de cultură utilizate atât pentru întreținerea sușei în laborator, cât și pentru producerea antigenului, trebuie alese astfel încât să nu favorizeze disocierea bacteriană (S-R); trebuie utilizată geloză de cartof. 8. Emulsia bacteriană trebuie făcută cu ser fiziologic (NaCl 8,5 la 1000) fenolizat la 0,5%. Nu trebuie utilizat formol. 9. Institutele oficiale indicate mai jos trebuie să asume controlul oficial al antigenilor: a) Republica Federală Germania
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Weybridge nr. 99 sau a sușei USDA 1119 sau orice altă sușă de sensibilitate echivalentă. 5. Mediile de cultură utilizate pentru conservarea sușei în laborator și pentru producerea antigenului nu trebuie să provoace disocierea bacteriană (S-R); se indică utilizarea gelozei de cartof sau a metodelor de cultură continuă. 6. Antigenul este testat cu ajutorul a 8 seruri uscate prin procedeul frigorific, seruri despre care nu se știe dacă sunt pozitive sau respectiv negative. 7. Supravegherea și controlul oficial al serului și
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
enzimatic (ELISA) în condițiile descrise la pct. C. Metoda de imunodifuziune este rezervată testelor individuale. Dacă rezultatele testelor fac obiectul unei contestații motivate, se efectuează un control complementar cu ajutorul unei probe de imunodifuziune. A. Testul de imunodifuziune pe placă de geloză pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Antigenul utilizat în acest test trebuie să conțină glicoproteine ale virusului leucozei bovine. Antigenul trebuie standardizat în raport cu un ser etalon (ser EI) furnizat de Statens Veterinære Serum Laboratorium din Copenhaga. 2. Institutele din statele
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]