36 matches
-
sulfat dimetilic, - în ceea ce privește materiile grase cu o aciditate mai mare de 3 %, se utilizează numai metodele cu metanol și cu acid clorhidric sau sulfat dimetilic, - pentru determinările prin cromatografie în fază gazoasă a izomerilor trans, se utilizează numai metodele cu metilat de sodiu sau sulfat dimetilic, - metoda cu metanol, hexan și acid sulfuric trebuie să se utilizeze pentru prepararea esterilor metilici ai micilor cantități de materii grase ce provin din separarea prin cromatografie în strat subțire. Prezența nesaponificabilelor poate fi neglijată
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
nesaponificabilelor poate fi neglijată dacă nu depășește 3 %, în caz contrar, esterii metilici trebuie să fie preparați folosind acizi grași. 1. OBIECT În continuare este prezentată descrierea a cinci metode de preparare a esterilor metilici din materii grase: (a) cu metilat de sodiu; (b) cu metilat de sodiu în balon închis; (c) cu metanol și acid clorhidric în balon închis; (d) cu sulfat dimetilic; (e) cu metanol, hexan și acid sulfuric. Metoda A 2. PRINCIPIU Substanța grasă de analizat este încălzită
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
nu depășește 3 %, în caz contrar, esterii metilici trebuie să fie preparați folosind acizi grași. 1. OBIECT În continuare este prezentată descrierea a cinci metode de preparare a esterilor metilici din materii grase: (a) cu metilat de sodiu; (b) cu metilat de sodiu în balon închis; (c) cu metanol și acid clorhidric în balon închis; (d) cu sulfat dimetilic; (e) cu metanol, hexan și acid sulfuric. Metoda A 2. PRINCIPIU Substanța grasă de analizat este încălzită cu reflux cu ajutorul alcoolului metilic
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de sodiu și filtrată. Se adaugă 35 ml de metanol, se adaptează condensatorul și se fierbe până la reflux timp de câteva minute. 5.2. Se întrerupe reîncălzirea, se detașează condensatorul și se adaugă rapid 3,5 ml de soluție de metilat de sodiu; se reconectează condensatorul și se fierbe la reflux timp de cel puțin 3 ore. Metilarea este considerată completă atunci când toată substanța grasă este trecută în soluție și amestecul de reacție este perfect limpede la temperatura ambiantă. 5.3
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
filtrează pe hârtie, colectând filtratul într-un balon de 200 ml. Se distilează solventul prin completarea prelungirii la baie de aburi într-un curent de azot pur. Metoda B 2. PRINCIPIU Substanța grasă de analizat trebuie să fie tratată cu metilat de sodiu în soluție metanolică, într-un balon închis, la 85-90°C. 3. INSTRUMENTE 3.1 Balon de sticlă cu pereți robuști, de aproximativ 5 mm (înălțimea 40-50 mm; diametrul 14-16 mm). 3.2. Pipetă gradată de 1 ml cu
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
metanol anhidru. 5. MOD DE LUCRU 5.1. În balonul de sticlă se introduc 2 g de substanță grasă deshidratată în prealabil cu sulfat de sodiu și filtrată. Se adaugă 0,3 g (aproximativ 0,4 mililitri) de soluție de metilat de sodiu și se închide balonul la flacără. 5.2. Se menține balonul timp de două ore într-o baie la 85-92°C și se agită din când în când; limpezimea conținutului balonului este cea care, după sedimentarea glicerinei și
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
0,1% Arsenic Maximum 3 mg/kg Plumb Maximum 5 mg/kg Mercur Maximum 1 mg/kg E 900 DIMETIL POLISILOXAN Sinonime Polidimetil siloxan, fluid siliconic, ulei siliconic, dimetil silicon Definiție Dimetilpolisiloxanul este un amestec de polimeri siloxanici lineari complet metilați conținând unități repetate ale formulei (CH3)2 SiO și stabilizat cu unități trimetilsiloxi cu blocare terminală ale formulei (CH3)3 SiO Denumire chimică Siloxani și siliconi, di-metilici Formulă chimică (CH3)3-Si-[O-Si(CH3)2]n-O-Si(CH3)3
jrc4608as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89774_a_90561]
-
de diazometan preparată anterior (5.2.5.2.) 5.2.5.1 Metilare in situ În aparatura de metilare (5.2.3.2) conținând 1 ml de eter (5.2.2.11) se introduc 50 l soluție "S" și se metilează prin metoda (5.2.3.2) cu aproximativ 300 mg 1-metil-3-nitro-1-nitrozoguanidină (5.2.2.8). După 15 minute (soluția de eter trebuie să fie galbenă pentru a indica excesul de diazometan) se transferă soluția probă într-un flacon de 2
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
2.2.8). După 15 minute (soluția de eter trebuie să fie galbenă pentru a indica excesul de diazometan) se transferă soluția probă într-un flacon de 2 ml având un dop etanș. Se depozitează în frigider peste noapte. Se metilează două probe simultan. 5.2.5.2. Metilare cu soluție de diazometan preparată anterior Într-un pahar cu dop de 5 ml se introduc 1 ml soluție de diazometan (5.2.2.12), apoi 50 l soluție "S". Se lasă
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
6. Preparare standard Se prepară o soluție standard de acid mercaptoacetic (5.2.2.1) de concentrație cunoscută, conținând aproximativ 60 mg acid mercaptoacetic pur (5.2.2.1) la 2 ml. Aceasta este soluția "E". Se precipită, determină și metilează conform 5.2.4 și 5.2.5. 5.2.7. Condiții pentru cromatografia de gaze 5.2.7.1. Coloană Tip: oțel inoxidabil Lungime: 2 m Diametru: 3mm 5.2.7.2. Umplutură 2% didecil ftalat /chromosorb, WAW 80
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
de albumina serică . Metabolizare/ eliminare : Tolcapona este aproape complet metabolizată înainte de excreție , o cantitate foarte mică ( 0, 5 % din doză ) regăsindu- se nemodificată în urină . Principala cale metabolică a tolcaponei este conjugarea la glucuronidul său inactiv . În plus , compusul este metilat de către COMT în 3- O- metil- tolcaponă și metabolizat de izoenzimele 3A4 si 2A6 ale citocromului P450 într- un alcool primar ( hidroxilare a grupului metil ) care este ulterior oxidat la un acid carboxilic . Într- o măsură mai mică au loc
Ro_1024 () [Corola-website/Science/291783_a_293112]
-
de albumina serică . Metabolizare / eliminare : Tolcapona este aproape complet metabolizată înainte de excreție , o cantitate foarte mică ( 0, 5 % din doză ) regăsindu- se nemodificată în urină . Principala cale metabolică a tolcaponei este conjugarea la glucuronidul său inactiv . În plus , compusul este metilat de către COMT în 3- O- metil- tolcaponă și metabolizat de izoenzimele 3A4 si 2A6 ale citocromului P450 într- un alcool primar ( hidroxilare a grupului metil ) care este ulterior oxidat la un acid carboxilic . Într- o măsură mai mică au loc
Ro_1024 () [Corola-website/Science/291783_a_293112]
-
hidroxil fenolice Legarea azotului la macromolecula de lignină se realizează doar dacă grupele hidroxil fenolice sunt oxidate la chinone. Blocarea prin eterificare a acestora conduce la o micșorare a reacției de legare a azotului. Astfel, lignina alcalină (24,85% OCH3Ă metilată cu diazometan, supusă amonolizei a condus la obținerea unui preparat cu 21% grupări OCH3 și 4,96% azot, în timp ce lignina nemetilată și oxidată conține 5,6% grupări OCH3 și 18,67% azot. O cantitate mică de azot fixată în cazul
LIGNINA – POLIMER NATURAL AROMATIC CU RIDICAT POTENȚIAL DE VALORIFICARE by ELENA UNGUREANU () [Corola-publishinghouse/Science/1630_a_2976]
-
activității mutatoare a ADN polimerazei (a cărei genă a suferit la rândul ei mutație), apoi depurinării și dezaminării 5-metilcitozinei, sub acțiunea unor agenți oxidanți (radicalii liberi ai oxigenului și monoxidul de azot). În insulele CpG, în care restul Citozină este metilat, mutațiile punctiforme apar cu frecvență mare. Spre deosebire de mutațiile genei p53 din linia germinală, care au caracter stohastic, mutațiile genei p53 din celulele somatice au localizare preferențială. În sindromul Li-Fraumeni (SLF) mutațiile din linia germinală apar în orice regiune a genei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
2. hipermetilarea locală a promotorilor genelor supresor tumorale, și 3. mutageneza directă - situsurile CpG sunt hot spot-uri pentru tranziția C → T determinată de deaminarea hidrolitică spontană (sau chiar de implicarea însăși a enzimei ADN metiltransferaza). De asemenea, situsurile CpG metilate pot fi ținte pentru unii carcinogeni chimici. Fiecare dintre aceste alterări contribuie la inițierea, progresia și menținerea stării de transformare malignă. Ele pot contribui și simultan la alterarea homeostaziei mecanismelor epigenetice, determinând apariția fenotipului canceros. Hipometilarea genomică este una dintre
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
promotorii genelor autozomale silențiate selectiv, ca un mecanism specific eucariotelor de reglare a activității genice (Surani, 1998). Cercetările moleculare epigenetice recente asupra diferitelor tipuri de cancer la om au evidențiat că multe gene implicate în tumorigeneză au secvențe nucleotidice intens metilate la nivelul insulelor CpG din promotor care, în mod normal sunt submetilate (Baylin și colab., 1998; Jones și Laird, 1999). Aproape jumătate dintre genele supresoare de tumori care sunt implicate în cancere familiale (ereditare) pot fi inactivate prin hipermetilarea promotorului
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
semnalele celulare (săgețile negre scurte) care influențează cantitățile complexelor și starea post-translațională, în special, starea de acetilare a histonelor și a altor proteine. B. Promotorul într-o stare de hipermetilare aberantă dintr-o celulă canceroasă (stelele negre reprezintă CpG-uri metilate din secvența genică. În acest scenariu, complexul activ de transcripție este redat ca fiind dispersat și fără a avea acces la ADN, pe când un nou complex represor se asociază strâns la duplexul ADN prin intervenția unei proteine de legare la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și menținerea stării de metilare diferențiată (Neumann și colab., 1995). Insulele CpG de peste 200 pb au în componență o concentrație de dinucleotide CpG semnificativ crescută în comparație cu restul genomului. În timp ce aproximativ 80% dintre dinucleotidele CpG, de la nivelul întregului genom uman sunt metilate, insulele CpG sunt nemetilate, exceptând pe cele asociate genelor amprentate și X-lincate (Razin și Cedar, 1994; Reik și Walter, 2001). Recent, insulele CpG au fost clasificate în mai multe categorii, în funcție de localizarea față de situsul start al transcripției, structura lor și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și expresie monoalelică bine conservate la șoarece și om. La șoarece, acest cluster este situat în partea distală a cromozomului 7, în timp ce la om este amplasat în regiunea 11p15.5. În ambele cazuri, alela paternă inactivă a genei H19 este metilată, iar alela maternă activă este nemetilată (Bartolomei și colab., 1993; Ferguson și colab., 1993). Pentru gena Igf2/IGF2, alela paternă este activă. Ambele gene sunt exprimate în timpul dezvoltării fetale și postnatale timpurii și sunt strâns relaționate, fiind amprentate reciproc. Astfel
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și astfel este inactivată IGF2 (Peters, 2000). În această zonă există două regiuni metilate diferențiat: DMD situată înaintea lui H19 și DMR1 situată înaintea lui IGF2, ambele fiind metilate în cromozomul patern și nemetilate în cel matern. Când DMD este metilat în cromozomul patern, enhancerii activează promotorul IGF2. Când DMD este nemetilat în cromozomul matern, acesta acționează ca element de graniță, prevenind activarea de către enhanceri a promotorului IGF2 (fig. 31.5). Studii recente efectuate de Drewell și colaboratorii (2000) au arătat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de imunoprecipitare a cromatinei au arătat că promotorii Oct3/4 și Nanog și-au crescut nivelul de acetilare a histonei H3 și au redus dimetilarea lizinei 9 din această fracție histonică, pe când dinucleotidele CpG ai acestor promotori au rămas parțial metilate în celulele iPS. Celulele desemnate în experiment iPS-MEF4 și iPS-MEF10 au fost pozitive pentru fosfataza alcalină și SSEA-1 și au prezentat înaltă activitate telomerazică. De reținut că acetilarea histonelor permite funcționarea genelor, pe când metilarea ADN se asociază cu silențierea genică
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
se evidențiază o corelație inversă între nivelul de metilare a citozinei din cadrul unei gene și rata transcrierii sale (Razin, 1988). Genele metilate, neexprimate, pot fi activate prin tratarea celulelor cu inhibitorul metilării 5-azacitidina (5-azaC) (Jones, 1985). Când secvențele genice sunt metilate in vitro și apoi sunt integrate în genomul de mamifere, la situsul de integrare cromatina adoptă o conformație inactivă și asemenea secvențe nu sunt exprimate (Keshlet și colab., 1986). Metilarea in vitro a unor regiuni discrete ale secvenței genice înainte de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
genică (Yisraeli și colab., 1988). Genomul multor specii de plante prezintă metilare atât la nivelul dinucleotidului CpG, cât și la nivelul trinucleotidului CpNpG în care N poate fi A, C sau T și peste 30% dintre resturile C pot fi metilate la anumite specii (Gruenbaum și colab., 1981). Nivelul metilării genelor din T-ADN din celulele cancerului de colet și din elementele transpozabile și genele proteinelor de rezervă se corelează invers cu expresia genică. Genele neexprimate din T-ADN pot fi
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
parțial metilate. S-a evidențiat existența unui contrast evident între pattern-ul de metilare a ADN la nivelul locusului ipt din linia CX2 și acela identificat în liniile care au exprimat această genă. În linia CX2, secvența ipt a fost metilată la nivelul oricărui situs analizat. Totuși, în revertanții spontani sau induși cu 5-azacitidină ai acestei linii în care expresia ipt fusese reinițiată, ca și în țesuturile descendenților înrudiți ai CX2, ai liniei CX1 care au exprimat ipt s-a evidențiat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Reducerea expresiei genelor MLH1 și MSH2 se asociază cu rezistența la chimioterapie și mai puțin cu dezvoltarea tumorală [91]. Tipurile metilării ADN sunt generate de trei ADN metiltransferaze active DNMT1, DNMT3A și DNMT3B, dintre care DNMT1 acționează în timpul replicării și metilează preferențial ADN hemimetilat, iar DNMT3A și DNMT3B acționează independent de replicare și metilează ADN nemetilat și pe cel hemimetilat. În CHC analiza nivelului de expresie a metiltransferazelor și a statusului metilării ADN a raportat o supraexpresie a celor trei metiltransferaze
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]