26 matches
-
Medii nutritive pentru izolarea și cultura Ralstonia solanacearum Agar nutritiv (AN) Agar nutritiv (Difco) 23 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121° C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se toarnă pe plăci. Mediu drojdie - peptonă - glucoză - agar (YPGA) Extract de levură (Difco) 5 g Bacto-peptonă (Difco) 5 g D(+) glucoză (monohidrat) 10 g Bacto-geloză (Difco) 15
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Difco) 5 g Bacto-peptonă (Difco) 5 g D(+) glucoză (monohidrat) 10 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu zaharoză - peptonă-agar (SPA) Zaharoză 20 g Peptonă 5 g K2HPO4 0,5 g MgSO4·7H2O 0,25 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se ajustează la pH 7,2 - 7,4, dacă este necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se toarnă pe plăci. Mediul de tetrazoliu Kelman Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Dextroză 5 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Dextroză 5 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se adaugă o soluție apoasă sterilizată prin filtrare de clorurăr de trifeniltetrazoliu (Sigma) pentru obținerea concentrației finale de 50 mg la litru. Se toarnă pe plăci. Apendicele 2
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
0 Acest tampon este utilizat la macerarea țesuturilor. Na2HPO4 4,26 g KH2PO4 2,72 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Este recomandată adăugarea de 5% polivinilpirolidonă-40000 MWT (PVP-40) la efectuarea testului PCR direct, pentru a reduce incidența inhibiției amplificării datorate moleculelor aromatice din extract. Este recomandată adăugarea unui peptizant, a unui agent antispumant
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
talonului și extractelor concentrate de cartof. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Apendicele 3 Materiale pentru testul IF Tampon IF: 10 mM salin tamponat fosfatic (PBS) pH 7,2 Acest tampon este utilizat pentru diluarea antiserurilor. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
diluarea antiserurilor. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Tampon IF-Tween Acest tampon este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1% Tween 20 la tamponul IF. 0,1 M glicerol tamponat fosfatic pH 7,6 Acest tampon este utilizat ca fluid
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
acoperire din carbonat dublu concentrat, pH 9,6 Na2CO3 6,36 g NaHCO3 11,72 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Poate fi adăugat sulfit de sodiu la o concentrație finală de 0,2% ca antioxidant dacă extractul conține un procent ridicat de molecule aromatice. 10 × salin tamponat fosfatic (PBS), pH 7,4 NaCl
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
pH 7,4 NaCl 80 g KH2PO4 2 g Na2HPO4·12H2O 29 g KCl 2 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Salin tamponat fosfatic-Tween (PBS-T) 10 × PBS 100 ml 10% Tween 20 5 ml Apă distilată 895 ml Tampon de blocare (anticorpi) (trebuie proaspăt preparat) 10 × PBS 10 ml Polivinilpirolidonă-4000 MWT (PVP-44) 2
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se ajustează pH-ul, dacă este necesar, la 6,5 înainte de autoclavizare. Ralstonia solanacearum nu se dezvoltă bine într-un mediu cu pH >7,0. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Se răcește la 50 C°. Se adaugă următoarele ingrediente (toate de Sigma) pentru a obține concentrațiile
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se ajustează pH-ul, dacă este necesar, la 6,5 înainte de autoclavizare. Ralstonia solanacearum nu se dezvoltă bine într-un mediu cu pH >7,0. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Se răcește la 50 C°. Se adaugă următoarele ingrediente (toate de Sigma) pentru a obține concentrațiile finale specificate: Violet cristalizat 5 mg la litru Sulfat de polimixină B 100 mg la litru (circa
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Corso Lodi, 23, Milan; 4. KÜPPER Mitteldeutsche Samen GmbH, Hessenring 22, D-37269 Eschwege. Apendicele 6 MEDII PENTRU CREȘTEREA ȘI IZOLAREA LUI C. SEPEDONICUM Agar nutritiv (NA) Agar nutritiv difco bacto în apă distilată la standardul producătorului. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 ș C timp de 15 minute. Dextroză nutritivă agar (NDA) Agar nutritiv difco bacto cu un conținut de 1 % D (+) glucoză (monohidrat). Se sterilizează prin autoclavizare la 115 ș C timp de 20 minute. Drojdie de glucoză peptidică
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
nutritiv difco bacto în apă distilată la standardul producătorului. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 ș C timp de 15 minute. Dextroză nutritivă agar (NDA) Agar nutritiv difco bacto cu un conținut de 1 % D (+) glucoză (monohidrat). Se sterilizează prin autoclavizare la 115 ș C timp de 20 minute. Drojdie de glucoză peptidică agar (YPGA) Extract de drojdie difco bacto (nr. 0127) 5 g Peptonă difco bacto (nr. 0118) 5 g D (+)- glucoză (monohidrat) 10 g Agar purificat difco bacto (nr.
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
difco bacto (nr. 0127) 5 g Peptonă difco bacto (nr. 0118) 5 g D (+)- glucoză (monohidrat) 10 g Agar purificat difco bacto (nr. 0560) 15 g Apă distilată 1 litru Se sterilizează 0,5 l de volume de mediu prin autoclavizare la 115 ș C timp de 20 de minute. Mediu de extract de drojdie de săruri minerale (YGM) Extract de drojdie bacto difco 2,0 g D (+)- glucoză (monohidrat) 2,5 g K2HPO4 0,25 g KH2PO4 0,25 g
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
g MgSO4 . 7H2O 0,1 g MnSO4 . H2O 0,015 g NaCl 0,05 g FeSO4 . 7H2O 0,005 g Agar purificat difco bacto 18 g Apă distilată 1 litru Se sterilizează 0,5 l de volume de mediu prin autoclavizare la 115 ș C timp de 20 de minute. Apendicele 7 TESTE NUTRIȚIONALE ȘI FIZIOLOGICE PENTRU IDENTIFICAREA LUI C. SEPEDONICUM Toate mediile trebuie să fie incubate la 21ș C și se examinează după 6 zile. Dacă creșterea nu a avut
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
ajustează la un pH de 7,0 până la 7,2 cu IN KOH. Se distribuie în tuburi de cultură Pyrex de 16 mm x 100 mm (capacitate 12 ml) în volume de 5 ml și 10 ml. Se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 minute Se inoculează prin tăiere tuburi de 5 ml și 10 ml din fiecare cultură. Se adaugă aseptic 1 până la 2 ml parafină lichidă sterilă la tubul de 10 ml. Se incubează. Reacție pozitivă
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
din mediul de creștere pot da rezultate pozitive false. Producția de acid din lactoză, ramnoză, salicin, glicerol. Se prepară un mediu Hugh și Leifson O/F fără glucoză. Se distribuie în volume de 5 ml în tuburi. Se sterilizează prin autoclavizare la 115 ș C timp de 10 minute. La baza topită la 45 ș C se adaugă aseptic 0,5 ml de soluții apoase sterilizate prin filtrare 10 % fie de glicerol, lactoză, ramnoză sau salicin. Se amestecă cu grijă. Reacție
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
Reductaza nitratului și denitrificarea (Bradbury, 1970) Mediu de cultură: KNO3 (fără nitrit) 1g Extract de drojdie difco bacto 1g K2HPO4 5 g Apă distilată 1 litru Se dozează în volume de10 ml în sticle de 10 ml. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 C timp de 15 minute. Reactiv A: H2SO4 8 g Acid acetic SN 1 litru Reactiv B: Naftilamină 5 g Acid acetic SN 1 litru Se inoculează mediul de nitrat în duplicat. Se testează după 10 și 20
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
până la nitrit (numai reductaza nitratului) roșu - Reducerea nitratului peste nitrit (denitrificare ― reductaza nitratului și nitritului) incolor incolor ― Producția de urează (Lelliott, 1966) Mediu bazal: Bază de uree oxoid agar (CM53) 2,4 g Apă distilată 95 ml Se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 20 de minute. Se răcește baza topită la 50ș C și se adaugă 5 ml de soluție de uree apoasă sterilizată prin filtrare 40 % (oxoid SR20). Se amestecă bine. Se dozează în volume de 6
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
urează. Utilizarea citratului (Christensen) (Skerman, 1967) Bază de citrat agar (Merck 2503) 23 g Apă distilată 1 litru Se amestecă și se dizolvă prin încălzire. Se dozează în volume de 6 ml ca pentru mediul de uree. Se sterilizează prin autoclavizare la 121ș C timp de 15 de minute și se lasă să se depună în pantă. Reacție pozitivă: Utilizarea citratului este indicată printr-o reacție de schimbare a culorii mediului din portocaliu în roșu. Producția de sulfură de hidrogen (Ramamurthi
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
Ramamurthi, 1959) Mediu: Tripton difco bacto (nr. 0123) 10 g K2HPO4 1 g NaCl 5 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă și se dozează în volume de 6 ml în tuburi de 16 x 100 mm. Se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 de minute. Se inoculează și se suspendă aseptic o hârtie de acetat de plumb (Merck 9511) la gura tubului. Se fixează cu capacul. Se incubează timp de maximum douăzeci de zile. Reacție pozitivă: Producerea
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
dintre eter și fracțiunile apoase. ― Creștere la 37 ș C (Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv bacto difco 8 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se dozează în volume de 6 ml în tuburi. Se sterilizează prin autoclavizare la 121ș C timp de 15 de minute. Se inoculează și se incubează la 37 0 C. Reacție pozitivă: Se urmărește creșterea. - Creșterea în clorură de sodiu 7 % (Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv difco bacto 8 g NaCl 70 g
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
urmărește creșterea. - Creșterea în clorură de sodiu 7 % (Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv difco bacto 8 g NaCl 70 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se dozează în volume de 6 ml în tuburi. Sterilizați prin autoclavizare la 112 0 C timp de 15 minute. Reacție pozitivă: Se urmărește creșterea. ― Hidroliza gelatinei (Lelliot, Billing & Hayward, 1966) Mediu: Gelatină difco bacto (nr. 0143) 120 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă prin încălzire și se dozează
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
Se urmărește creșterea. ― Hidroliza gelatinei (Lelliot, Billing & Hayward, 1966) Mediu: Gelatină difco bacto (nr. 0143) 120 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă prin încălzire și se dozează în volume de 6 ml în tuburi. Se sterilizează prin autoclavizare la 121ș C timp de 15 de minute. Reacție pozitivă: Lichefierea gelatinei chiar dacă este ținută la 5ș C timp de 30 de minute. ― Hidroliza amidonului Mediu: Agar nutritiv bacto difco (topit) 1 litru Amidon solubil bacto difco (nr. 0178) 2
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
minute. Reacție pozitivă: Lichefierea gelatinei chiar dacă este ținută la 5ș C timp de 30 de minute. ― Hidroliza amidonului Mediu: Agar nutritiv bacto difco (topit) 1 litru Amidon solubil bacto difco (nr. 0178) 2 g Se amestecă și se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 de minute. Se toarnă în talere. Inoculați în spoturi talerele. Dacă se constată o creștere bună (10 până la 20 de zile), se îndepărtează o parte din creștere și se imersează în iod Lugol. Reacție
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]